急性ST段抬高型心肌梗死自溶假象对临床预后的影响

目的 分析急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)梗死相关血管(IRA)自溶(SI)的假象,探讨自溶假象对临床预后的影响.方法 观察56例考虑梗死相关血管(IRA)自溶(SR)而未予静脉溶栓治疗,择期行冠状动脉造影的STEMI患者,根据冠状动脉造影特点分成自溶组(TIMI≥2级)和非自溶组(TIMI 0～1级),分析自溶假象对左心室功能及临床转归的影响.结果 经冠脉造影证实非自溶18例,占总例数32.1％,该类患者并发症多,预后差.结论 自溶假象是影响STEMI患者预后的预测指标.     

金黄色葡萄球菌重组蛋白AtlG体外抗菌效应探讨

目的 通过基因原核表达技术获取金黄色葡萄球菌(ATCC25923)自溶素片段AtlG重组蛋白,初步探讨其体外抗菌效应.方法 根据GenBank中的atlG基因序列设计合成特异引物,采用PCR技术以金黄色葡萄球菌的基因组为模板扩增相应atlG基因序列;分别构建克隆载体PMD19-T-atlG和表达载体pET-32a(+)/atlG;构建的表达载体经由IPTG诱导后通过等电点洗脱技术获取纯化的重组蛋白AtlG;采用微量肉汤稀释法测定AtlG对金黄色葡萄球菌及其苯唑西林耐药株的最低抑菌浓度(MIC),动态测定金黄色葡萄球菌及其耐药株对AtlG的药物敏感性,初步探讨重组蛋白AtlG的体外抗菌活性.结果 成功构建了原核表达载体pET-32a(+)/atlG,表达的重组蛋白AtlG对金黄色葡萄球菌标准株和苯唑西林耐药株的MIC分别为16 μg/ml和64 μg/ml;相比于未加药物的对照组,rAtlG对标准株作用1h后细菌数显著降低(P=0.045),抑菌效果持续到5h测定点(P=0.006);对苯唑西林耐药株作用3h后显示出抑菌效果(P=0.003),5h后与对照组相比差异无统计学意义.结论 50μg/ml的rAtlG对金黄色葡萄球菌标准株抑菌作用发生快、持续时间长,对苯唑西林耐药株也有一定的抑菌作用,具有作为抗菌药物的可能性.     

肺炎链球菌菌体蛋白LytA和CbpA对感染小鼠的诊断价值

目的 通过基因工程技术获取肺炎链球菌自溶素(autolysin,LytA)和胆碱结合蛋白A(choline binding protein A,CbpA),探讨其对肺炎链球菌感染小鼠的血清学诊断价值.方法 根据GenBank中lytA和cbpA基因保守序列设计合成特异性引物,采用PCR技术从肺炎链球菌基因组中扩增lytA和cbpA保守序列片段;经由IPTG诱导并通过等电点洗脱方法获取纯化的重组蛋白LytA和CbpA;Western blot测定表达蛋白的抗体结合活性.以LytA和CbpA为抗原,建市ELISA反应模式测定感染小鼠血清中相应的IgG和IgM抗体,评价诊断价值.结果 成功构建了原核表达载体pET-32a(+)/lytA和pET-32a(+)/cbpA,表达的重组蛋白LytA和CbpA具有较好的抗体结合活性.实验组小鼠(肺炎链球菌感染组)IgM和IgG类抗LytA抗体滴度高于对照组(止常对照组和乙型链球菌感染对照组),差异有统计学意义(P<0.05),CbpA抗体与正常对照组差异有统计学意义,与乙型链球菌感染组差异无统计学意义(P>0.05).CbpA蛋白对感染小鼠诊断的敏感性较高(IgG:83.3%;lgM:75.0%),而LytA特异性较高(IgG:100%;IgM:100%).结论 协同利用重组蛋白CbpA诊断敏感性及LytA的特异性,对肺炎链球菌感染小鼠的血清学诊断具有一定价值,为进一步用于临床检验奠定基础.

Abstract：

Objective To obtain the pneumococcal autolysin(LytA)and choline binding protein A(CbpA)by prokaryotic expression system and investigate their diagnosis for infection caused by Streptococcus pneumoniae.Methods The specific primers were designed according to lytA and cbpA of Streptococcus pneumoniae gene sequence.lytA and cbpA were amplified by PCR form the pneumococcus genome.After IPTG inducing,the recombinant proteins were purified by electroeluting of bag filter,detected by SDS-PAGE and Western blot.Serum lgG and IgM antibodies accordingly of BALB/c mice infected with Streptococcus pneurnoniae were detected by ELISA.Results The recombinant plasmid pET-32a(+)/lytA and pET-32a (+)/cbpA were constructed successfully.Fusion proteins LytA and CbpA were expressed and displayed expected antigenicity.IgM and IgG antibodies level anti LytA were significantly higher than the control group (infections with B Streptococcus group and healthy mice),(P<0.05),but antibodies level anti CbpA did not increase as compared with group infected with B Streptococcus(P>0.05).Diagnostic sensitivity of CbpA was 83.3%(IgG)and 75.0%(IgM).Diagnostic specificity of LytA was 100%(IgG and IgM).Conclusion The synergistic use of specificity of LytA and sensitivity of CbpA may be worthy of serological diagnosis for Streptococcus pneumoniae infection,and may be used for further clinical test.     

早期静脉肝素化在老年ST段抬高型心肌梗死患者中的临床应用

目的研究早期静脉肝素化在老年ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者中的临床应用效果。方法选取急诊入院需接受直接经皮冠状动脉介入术(PCI)的老年急性STEMI患者130例进行研究。采用信封随机法,将患者分为治疗组(65例)和对照组(65例)。治疗组于诊室内确诊后即刻应用100 U/kg负荷量普通肝素,继以12 U/(kg·h)静脉维持至术前停用,对照组术前不给予普通肝素,两组均行冠脉造影和PCI。观察并比较两组冠脉造影情况、肌钙蛋白(cTnI)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)等血清心肌标志物水平、心肌梗死溶栓试验(TIMI)血流及住院期间及院外30 d内发生的主要心血管和出血事件。结果治疗组血栓抽吸率、替罗非班使用率及无复流发生率明显低于对照组,而血栓溶解率和TIMI3级血流发生率则显著高于对照组,差异均有统计学意义(均P0.05)。术后治疗组cTnI和CK-MB峰值水平明显低于对照组(P0.05);治疗组cTnI和CK-MB水平达峰时间明显短于对照组,两组比较差异均有统计学意义(均P0.05)。治疗组回旋支(LCX)、前降支(LAD)及右冠状动脉(RCA)的血栓自溶发生率均明显高于对照组(均P0.05)。治疗组出血事件发生率明显低于对照组、ST段回落率显著高于对照组,两组比较差异均有统计学意义(均P0.05)。结论早期静脉肝素化不仅可以安全有效地提高相关梗死动脉再通率,减少PCI术后无复流的发生率,降低出血事件,进一步提高STEMI患者救治率、改善患者预后。     

肺炎链球菌自溶素基因的克隆、表达及蛋白纯化

 目的 克隆肺炎链球菌自溶素（LytA）基因并在大肠埃希菌中表达及蛋白纯化。方法 用PCR方法从肺炎链球菌基因组中克隆肺炎链球菌自溶素基因,然后将其插入原核表达载体pET32a（+）,构建pET32a(+) - LytA重组质粒,经IPTG诱导使该基因在大肠埃希菌BL21 (DE3)中表达,亲和层析法纯化目的蛋白,将获得的蛋白用Western blot鉴定门结果扩增出的DNA序列与GenBank中的LytA基因序列一致,成功构建了pET32a(+) - LytA重组质粒并在大肠埃希菌中高效表达,所表达的蛋白经Western blot证实为肺炎链球菌自溶素融合蛋白。结论 成功克隆了肺炎链球菌自溶素基因,并将其在大肠埃希菌中表达、纯化,为新型肺炎链球菌疫苗的研制奠定了基础。     

干燥综合征伴肺动脉干巨大血栓短期自溶1例

干燥综合征(sjogren′s syndrome, SS)患者较一般人群易发血栓形成；巨大血栓形成后在低凝状态下短期内自溶病例罕见，此类高出血风险患者在内科治疗有效的情况下行溶栓治疗应慎重，如出现梗阻性休克征象介入治疗为首选。该文回顾SS患者肺主动脉干巨大血栓短期自溶病例1例。患者入院急诊心脏超声提示主肺动脉内可见范围为5.4 cm×3.0 cm低回声影漂浮影，给予低分子量肝素抗凝治疗，入院8 h后完善胸部CT血管造影：肺主动脉内巨大血栓自溶；仅可见两肺下叶背段及后基底段远端小动脉肺栓塞。该文总结患者病例的特点并进行相关分析，为临床医生在相关诊疗活动中提供帮助。     

啤酒废酵母中酵母抽提物的制备

主要研究了机械破壁、pH值以及麦芽根核酸酶的作用对啤酒酵母自溶过程的影响.均质破壁能显著提高自溶速率及酵母抽提物中蛋白质和核苷酸的含量,麦芽根核酸酶的加入有效地提高了酵母抽提物中5′-核苷酸含量,而提高自溶时的pH值不能显著地提高酵母抽提物中5′-核苷酸的含量.因此,有效地提高酵母抽提物中5′-核苷酸含量的方法是啤酒废酵母经0.5%NaHCO3脱苦后,加2倍体积无菌水和5%NaCl,再加质量分数为1%的核酸酶,搅拌均匀,在40MPa下均质3次,然后升温至55℃,自溶30h,得到的酵母抽提物中5′-GMP含量高达6.37mg/g.     

啤酒酵母自溶动力学的研究

研究了啤酒酵母自溶过程中溶出产物随自溶时间的变化 ,建立了啤酒酵母自溶过程中产物溶出的非结构性动力学模型 .应用非线性最小方差回归方法得到自溶反应的速度常数Ka及产物生成系数αKP、βLP等 .酵母自溶过程中产物溶出遵循一级反应速度方程 .