鬼臼毒素人工抗原的合成与鉴定

目的合成和鉴定鬼臼毒素人工抗原，以获取具有特异性和高度亲和性的鬼臼毒素多克隆抗体。方法 通过酯化反应合成半抗原鬼臼毒素半琥珀酰酯；利用活泼酯法和混合酸酐法偶联成免疫和包被所需的人工抗原；按常规免疫法，从免疫的兔血清中获取高效的抗鬼臼毒素抗体。结果质谱、核磁共振和红外分析表明两种不同方法均成功地合成了半抗原鬼臼毒素半琥珀酰酯。人工抗原的偶联比因载体蛋白和合成方法的不同而有所不同，Hapten-BSA₁为88.6，Hapten-BSA₂为40.3，Hapten-OVA₁为17.8和Hapten-OVA₂为54.2。利用兔M4440产生的抗血清建立的ELISA方法对鬼臼毒素的最低检测浓度为0.12 μg·mL^-1，半数抑制浓度为221 μg·mL^-1。结论成功地合成了鬼臼毒素人工抗原，并获得了抗鬼臼毒素抗体，为鬼臼毒素免疫分析方法的进一步研究提供了条件。     

球形和扁球肿瘤双功能抗体和与酶结合的抗体两步法的双 …

由于恶性肿瘤内部存在生理屏障，药物很难到达肿瘤核心区，给诊断和治疗带来了困难。具有高度特异性的小分子药物的两步法在一定程度上克服了这一问题。本文对于球形和扁球肿瘤，采用包括血浆和组织液的双重介质分布参数模型，对双功能抗体ＢＦＡ（Ｂｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）－半抗原（Ｈａｐｔｅｎ）和与酶结合的抗体ＥＣＡ（Ｅｎｚｙｍｅ－ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）－前药物（Ｐｒｏｄ     

半抗原-琼脂扩散试验鉴别布鲁氏菌感染抗体和S2、Rev.1免疫抗体的研究与应用

目的布鲁氏菌病严重威胁着我国畜牧业生产和公共卫生安全,现有的常规血清学检测方法虽具有较高的敏感性与特异性,但无法区分布鲁氏菌感染抗体和S2、Rev.1疫苗免疫抗体(以下简称"鉴别诊断"),给我国执行扑杀布病感染动物的政策带来阻力。因此在S2和Rev.1疫苗免疫背景下研究天然半抗原-琼脂扩散试验(NH-GD)的鉴别诊断能力。方法优化NH-GD试验条件,测定其敏感性、特异性、重复性及鉴别诊断能力,并与荧光偏振测定法(FPA)作比较。结果 NH-GD试验具有很好的特异性和重复性,对S2免疫羊群从疫苗接种开始就具有鉴别诊断能力,而对Rev.1免疫羊群从疫苗接种122d开始具有鉴别诊断能力;与FPA作比较,一致性较好,且操作技术和所需仪器都非常简单,特别适合在基层推广使用,为我国羊布病监测提供了一个很好的检测方法。     

不同牛PrP合成肽段的抗原性研究

目的研究PrP多肽的抗原性以及不同偶联方法对多肽免疫原性的影响。方法选择4段牛PrP多肽(BoP1、BoP2、BoP3、BoP4)为半抗原,KLH为载体,MBS、戊二醛两种偶联方法进行偶联,免疫BALB/c小鼠,间接ELISA方法检测小鼠血清中抗体效价,并对两种偶联方法进行比较。结果两组动物均出现死亡,戊二醛偶联多肽免疫小鼠出现不同程度的腹水,MBS偶联多肽免疫小鼠未见其它异常反应;戊二醛偶联的4种多肽产生的抗体效价无显著性差异(P>0.05),MBS偶联的KLH-BoP1、KLH-BoP2、KLH-BoP4产生抗体效价无显著性差异(P>0.05),MBS偶联的KLH-BoP3抗体效价低于其它3种多肽(P<0.05);对同一种多肽而言,不同偶联方法KLH-BoP1、KLH-BoP2、KLH-BoP4所产生抗体效价无显著性差异(P>0.05),戊二醛偶联KLH-BoP3产生的抗体效价明显高于MBS偶联KLH-BoP3产生的抗体效价(P<0.05)。结论PrP多肽可作为半抗原刺激小鼠强烈的免疫反应,不同偶联方法,不同肽段抗原性不同,为抗PrP多克隆及单克隆抗体的制备奠定了基础。     

青霉素过敏反应的特殊临床表现一例

青霉素是半抗原,容易发生过敏反应,大多数发生在皮试或注射青霉素后,也可通过某些特殊途径发生过敏。现就我院1例患者对青霉素发生过敏反应的特殊临床表现报道如下。临床资料:患者,女,45岁。于2006年10月20日因肺炎入我院中西医结合科。第2日上午,早班护士配青霉素药液时,双手沾有青毒素药物,未     

小分子单克隆抗体的制备与敲除技术研究进展

随着单克隆抗体技术应用的愈加广泛,其生产技术也日臻完善。小分子单克隆抗体技术也日益成为人们研究的热点课题。中药小分子单克隆抗体技术的应用也日益广泛,这门技术给中药有效成分的敲除提供有力的技术支持。该文就小分子单克隆抗体制备与敲除技术进行了综述。就其制备过程中的几个步骤,如:半抗原的制备,半抗原与载体偶联,人工抗原的鉴定及偶联比率的测定,动物免疫与单克隆杂交瘤细胞株的建立,单克隆抗体的大规模制备;小分子单克隆抗体的敲除技术的免疫亲和色谱柱的方法进行了详尽的阐述。笔者相信这门技术会使得中药的研究上更高一个层次,并且提高中药研究的国际化水平。     

半抗原2,4-二硝基氟苯体内外抑制肝细胞癌的初步研究

[目的]初步研究半抗原2,4-二硝基氟苯(2,4-DNFB)在体内外对肝细胞癌的抑制作用.[方法]用不同浓度的DNFB、氟尿嘧啶(5-Fu)(对照组)分别处理SMMC-7721肝癌细胞株72h,用MTT法测定72h细胞存活率,并计算50％和90％抑制浓度(IC50和IC90).经H22肝癌细胞株皮下种植成功的18只昆明鼠随机分成3组:DNFB组、无水乙醇(Ethanol)组、磷酸盐缓冲液(PBS)组(对照组),并分别瘤内注射100μl的DNFB、Ethanol和PBS,每周2次,共4次.瘤内注射结束2周后剥离肿瘤称重,计算抑瘤率.[结果] DNFB和5-Fu对SMMC-7721肝癌细胞株的IC50分别为32.22μmol/L和3.62μmol/L; IC90分别为49.53 μmol/L和＞200μmol/L.DNFB组、无水乙醇组和PBS对照组最终的瘤重分别为0.97±0.53g、1.55±0.76g和3.79±0.75g.与PBS对照组比较,DNFB组和无水乙醇组的抑瘤率分别为74.43％(P=0.00004)和59.20％(P=0.00045),DNFB组和无水乙醇组之间的差异无统计学意义(P=0.16).[结论]DNFB可在体内外抑制肝癌细胞的生长.     

中药有效成分半抗原抗体应用研究进展

中药有效成分半抗原抗体的应用已经触及中药研究的各个领域.首先,可将半抗原单克隆抗体设计成ELISA试剂盒,定量分析牛物样本或植物粗提取物中有效成分的含量,应用于中药质量控制和中药药代动力学的研究.其次,可将半抗原单克降抗体与固相载体相偶联,做成免疫亲和柱,应用于复杂样品的前处理以及knock-out提取物的制备.最后,可将有效成分半抗原单克隆抗体单链可变区(scFv)的基因片段导入植物细胞内,基因重组后可得到有效成分高富集的新品种,实现药用植物的分子育种.     

赭曲霉毒素A的酶联免疫检测——Ⅰ.抗原的制备

采用活性酯法制备赭曲霉毒素A(OTA)的全抗原 ,并以正交试验L9(34 )来选择活性酯法的最佳条件。通过对实验结果的统计分析得出 ,当OTA与牛血清白蛋白 (BSA)的摩尔比为 2 0∶1,OTA∶N 羟基琥珀酰胺∶N’ ,N 二环乙基碳化亚胺的摩尔比为 1∶2∶4,OTA的活化时间为 6 0min ,偶联时间在 90min的情况下 ,OTA与BSA的连接比可达 9 6 4,OTA的利用率可达 48 2 %。     

抗醋酸甲羟孕酮抗体的制备及初步鉴定

目前,我国使用的检测醋酸甲羟孕酮(Medroxyprogester-oneacetate,MPA)的ELISA试剂盒主要依靠国外进口,因其价格非常昂贵,不可能在国内推广使用。本研究旨在提供原料研究了相关抗原的合成以及研制合格的抗MPA的抗体,组装检测MPA的ELISA试剂盒。1材料和方法1.1材料甲羟孕酮标准品