中药对间质干细胞分化为神经细胞的影响

中药成分促进间质干细胞分化为神经细胞的研究是目前中医药和生物医学领域的热点之一。中药对间质干细胞的作用可以概括为促进间质干细胞的生长、增殖、分化,改变其分泌状态及其保护分化后的神经细胞等多个环节。从细胞培养、细胞分化、作用机制以及治疗作用等方面,分类综述了三七、黄芪、麝香、绞股蓝、川芎、丹参对间质干细胞分化为神经细胞的影响,并简述了问题和展望。     

双胸蚓溶栓酶对胎鼠大脑神经元突起生长的影响

应用神经细胞体外培养技术观察了不同剂量双胸蚓溶栓酶作用下的1～30日内Wistar胎鼠大脑神经细胞的生长发育过程。结果显示,不同剂量溶栓酶对神经元突起数量以及轴索的形成和发展均有促进作用。     

莫诺苷抑制过氧化氢诱导的SH-SY5Y神经细胞氧化损伤

目的研究莫诺苷对H2O2诱导的神经细胞氧化损伤的影响。方法培养的人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞加入莫诺苷(1、10、100μmol/L)预孵育24h,加入H2O2500μmol/L作用18h诱导产生氧化损伤,测定细胞内活性氧(ROS)、一氧化氮(NO)和谷胱甘肽(GSH)含量。结果莫诺苷(10、100μmol/L)使活性氧的释放分别降低了37%(P<0.01)、27%(P<0.05),NO的释放分别降低了31%(P<0.05)、53%(P<0.01),莫诺苷(1、10、100μmol/L)有明显抑制GSH的降低的作用。结论莫诺苷能够抑制H2O2诱导的SH-SY5Y细胞氧化损伤,有神经保护作用。     

柴胡注射液体外抑制PGE2释放的生物活性测定法

目的: 建立rrIL-1β体外干扰下丘脑神经细胞释放PGE₂离体模型,考察柴胡注射作用下该模型中PGE₂含量与药物作用浓度的相关性。 方法: 体外培养下丘脑神经细胞,加入rrIL-1β(40 μg·L^-1)刺激并于不同时间点收集细胞液,ELISA法检测各时间点收集的细胞液中PGE₂含量;体外培养下丘脑神经细胞,加入rrIL-1β刺激后,各组加入不同浓度柴胡注射液,ELISA法检测细胞上清液中PGE₂含量变化,分析加样浓度与对PGE₂抑制率的线性关系。 结果: rrIL-1β能刺激体外培养的下丘脑神经细胞释放PGE₂,并在10 h时达到峰值;柴胡注射液能够显著干扰离体模型中PGE₂的释放(P<0.01,P<0.05),且干扰作用与柴胡注射液作用浓度呈一定的线性相关(r=0.911,P<0.01)。 结论: rrIL-1β能够干扰体外培养的下丘脑神经细胞释放PGE₂,且对PGE₂的抑制生成作用与药物浓度相关性较好。     

碱性成纤维生长因子对体外培养鼠胚胎中脑神经细胞缺氧反应的影响

目的:观察不同浓度碱性成纤维生长因子(bFGF)对胚胎中脑神经细胞缺氧的保护作用.方法:14 d的大鼠胚胎中脑取材,分离、消化后作原代培养,分为对照组,单独缺氧组,不同浓度的(1.0,5.0,10.0,50.0,100.0 ng/mL)bFGF+缺氧组;采用羟胺比色法对超氧化物歧化酶(SOD)活性进行测定,采用硫代巴比妥酸比色法进行丙二醛(MDA)测定;采用考马斯亮蓝法进行相对蛋白质含量测定,同时进行细胞形态学观察.结果:单独缺氧组中脑神经细胞MDA含量升高,SOD活性、相埘蛋白质含量及细胞集落存活率下降,与对照组比较(P<0.01),并出现细胞形态学损伤;5.0～50.0 ng/mL bFGF+缺氧组中脑神经细胞MDA含量下降,SOD活性、相对蛋白质含量、细胞集落存活率升高,与单独缺氧组比较(P<0.01),细胞无明显形态学损伤;当bFGF剂量为1.0 ng/mL和100 ng/mL时神经细胞MDA含量、SOD活性、相对蛋白质含量及细胞集落存活率与单独缺氧组比较无明显改变(P>0.05),细胞有明显的形态学损伤.结论:适当的bFGF剂量能对胚胎中脑神经细胞缺氧损伤具有明显保护作用.     

应用神经细胞体外培养观察抗衰老中草药的作用

 神经细胞在体外培养中，可以表现出类似休内神经细胞衰老过程中的变化，其中，神经细胞数量减少和其突起数量及分枝减少较为明显。本文以这些变化为基本指标，初步地观察了按中医药理论认为有延缓衰老作用的中草药对体外培养的人胚和鼠神经细胞裹老性变化的作用。实验中，不仅观察了单味药制剂的作用，还观察了自制的中草药合剂的作用。结果表明，单味药中五味子和酸枣仁促进鼠胚神经细胞体外生长最为明显，酸枣仁、当归和五味子均具有防止神经细胞数量减少的作用。     

大鼠骨髓间充质干细胞神经分化蛋白的表达

目的研究大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)体外神经分化蛋白的表达。方法采用全骨髓贴壁筛选法分离培养大鼠骨髓MSCs。取生长状态良好的第1、3、7代细胞绘制生长曲线,免疫细胞化学法鉴定其性质,检测巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、微管相关蛋白2(MAP2)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)以及酪氨酸羟化酶(TH)的表达。结果细胞传代后1-2d为滞留期,3d后达对数生长期,第6d进入平台期。免疫细胞化学法鉴定大鼠骨髓MSCsCD44呈阳性,CD34呈阴性,nestin、NSE、MAP2、GFAP、TH均呈不同程度的阳性表达,其阳性表达率分别为(25.5±5.6)%、(14.2±2.1)%、(1.4±0.5)%、(4.5±1.2)%、(3.6±1.2)%。结论大鼠骨髓MSCs在体外能自发地表达神经干细胞和神经细胞的某些标志蛋白,这种潜能使其有可能成为神经系统疾病细胞移植治疗的种子细胞。     

锌对大鼠胚胎脑神经元细胞生长发育作用研究

目的：观察锌对脑细胞生长发育的作用。方法：采用大鼠胚胎中脑神经元细胞进行体外培养。结果：锌能促进体外培养中脑神经元细胞突起生长，突起数增多，神经元的存活数和神经元胞体的直径和面积增加。用流式细胞术分析证明，神经元蛋白质含量增高。结论：锌对胚胎中脑神经元细胞生长发育具有促进作用。     

豁痰开窍中药对急性实验性缺血脑细胞超微结构的影响

本文通过电镜病理形态观察豁痰开窍中药对缺血脑细胞的保护作用，对照组的神经元高度肿胀，细胞器溶解，毛细胞管内皮细胞膜缺损不完整。给药组的社会元仅有轻度肿胀，细胞器形态基本正常，毛细血管内皮细胞膜完整。     

丹参素联合生长因子体外诱导人脐血间充质干细胞分化为神经细胞的研究

人脐血间充质干细胞(MSCs)是从脐带血中分离和培养的一种多潜能成体干细胞。本实验通过密度梯度离心法分离人脐血单个核细胞,贴壁法筛选出脐血MSCs,体外扩增,免疫荧光方法检测表面抗原。传3代的脐血MSCs经20ng/mlbFGF预诱导24h、3μg/μl丹参素诱导6h、20ng/mlEGF和20ng/mlbFGF诱导分化5d后出现类似神经元样细胞的形态改变,伸出长突起。免疫组织化学和免疫荧光方法鉴定显示,诱导后的细胞能特异性表达神经元特异性标志NeuN和β-TubulinⅢ,而星形胶质细胞特异性标志GFAP阳性细胞较少。上述结果表明,丹参素联合生长因子EGF和bFGF在体外可定向诱导人脐血MSCs分化为神经元样细胞。