组织多肽抗原在卵巢癌诊断及监测中的应用

目的评价组织多肽抗原（ＴＰＡ）在卵巢癌诊断和监测中的临床价值。方法应用放射免疫方法测定了２４例正常妇女、２７例妇科良性疾患及６０例卵巢癌患者的血清ＴＰＡ及ＣＡ１２５值并进行比较分析。结果ＴＰＡ在卵巢上皮性癌患者中的异常检出率为８２％,ＣＡ１２５为７０％,二者总的异常检出率为９２％。在绝大多数正常妇女和卵巢良性肿瘤患者中,ＣＡ１２５和ＴＰＡ在正常范围。作为卵巢癌相关标志物,ＴＰＡ与ＣＡ１２５具有相似敏感性。１９例动态观察结果显示,ＴＰＡ和ＣＡ１２５二者与病情转归是一致的。结论ＴＰＡ和ＣＡ１２５联合应用对卵巢癌的鉴别诊断及提高总的异常检出率具有价值。     

红细胞带Ⅲ蛋白C1肽链的纯化及其功能的初步研究

目的：研究红细胞带Ⅲ蛋白Ｃ１肽链（带Ⅲ蛋白Ａｌａ８９３－Ｖａ１９１１）的特性及其功能。方法：以１００ｍｍｏｌ／ＬＮａＯＨ预处理红细胞膜血影，再用胰蛋白酶消化，采用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）及氨基酸测序仪分析检定了从红细胞血影中释放的多肽，并纯化了带Ⅲ蛋白Ｃ１肽链，以不同浓度的Ｃ１肽链与新鲜的红细胞血影进行温浴。结果：Ｃ１肽链与红细胞内的新蛋白酶活性有关。     

乳酸-羟基乙酸-L-赖氨酸多肽接枝聚复合FK506和神经生长因子缓释膜促进大鼠坐骨神经再生的实验研究

目的 观察乳酸.羟基乙酸-L-赖氨酸(RGD)多肽接枝聚复合FK506和神经生长因子(NGF)缓释膜桥接大鼠坐骨神经5 mm缺损促进神经再生的效果.方法 将24只雄性Wistar大鼠随机分成三组,切断左侧坐骨神经形成5 mm缺损,分别以RGD多肽接枝聚复合FK506和NGF缓释膜(A组)、RGD多肽接枝聚复合FK506缓释膜(B组)和RGD多肽接枝聚膜(C组)桥接缺损;A组膜FK506与NGF的含量分别为0.48 mg和2μg,B组膜FK506的含量为0.72 mg,C组为对照组.术后3个月,采用大体观察、神经电生理、小腿三头肌湿重恢复率、组织学观察和图像分析等方法规查神经再生情况. 结果术后3个月,膜外形完整、质脆;各组再生神经均通过了缺损,且A组的再生神经各项检测指标明显优于B组和C组.结论 RGD多肽接枝聚复合FK506和NGF缓释膜能够有效地促进损伤的大鼠坐骨神经再生,且FK506和NGF联合应用,可减少FK506的用量.     

99Tcm-RGD-4CK在动物体内的分布及显像

目的探讨^99Tc^m-环形精氨酸．甘氨酸-天冬氨酸九肽（RGD-4CK）在健康小鼠体内的生物分布及在健康家兔体内的动态显像表现。方法采用预锡化法以^99Tc^m直接标记RGD-4CK，3MM色谱纸层析测定^99Tc^m-RGD-4CK标记率，并计算其比活度。研究^99Tc^m-RGD-4CK于1、5、20、60、90、120、180和240min在健康小鼠体内的生物分布特性；通过SPECT显像，结合感兴趣区（ROI）时间-放射性曲线分析，观察240min内^99Tc^mmRGD-4CK在健康家兔体内的动态分布变化。结果^99Tc^mmRGD-4CK的标记率为（97．80±0．28）％，比活度为（11．91±0．04）TBq／mmol。小鼠血液放射性清除迅速，通过肾脏排泄较快，其余组织器官放射性均随时间逐渐降低，而脑放射性水平始终最低。家兔各组织器官放射性均随时间逐渐下降，与同一时间肾、心、肝相比，肺、胃、肌肉放射性呈低水平；1min双肾即显影，5min心、肝影开始减淡，肺放射性分布均匀，强度低于肝脏，膀胱显影；5min后膀胱影持续增浓，20min后软组织影逐渐减淡；胆囊始终未显影，腹部放射性呈持续低水平，胃区放射性始终缺损，颈部未见明显放射性浓聚。结论^99Tc^m-RGD-4CK制备方法简便，标记率高，体内稳定性好，具有比较珲椒并符合实际的动物体内动力学表现。     

99Tcm-RGD环肽二聚体的制备及其体内外评价

目的评价^99Tc^m标记的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（RGD）环肽二聚体E[c（RGDfK）]：的体内外特性及其用于整合素α，B，阳性肿瘤显像的可行性。方法以三羟甲基甘氨酸（tricine）和三苯基膦三磺酸钠（TPPTS）作为协同配体，以联肼尼克酰胺（HYNIC）作为双功能连接剂，采用无亚锡一步法制备^99Tc^m-HYNIC—E[c（RGDfK）]：，通过U87人神经胶质瘤细胞测定其半数抑制浓度（IC50），观察其体外与整合素α，B，受体的结合解离动力学、细胞内化及外化，评价其在荷人神经胶质瘤裸鼠的生物分布。结果^99Tc^m-HYNIC-E[c（RGDfK）]，的标记率〉95％，经Sep-PekC18柱纯化后其放化纯〉99％。与RGD环肽单体C（RGDyK）相比，HYNIC偶联的E[C（RGDfK）]：二聚体具有更高的整合素α，β3亲和力，IC50分别为80．0和9．07nmol／L。细胞实验显示，^99Tc^m-HYNIC—E[C（RGDfK）]：与整合素α，β，结合较快，并迅速被受体介导内化。生物分布实验显示，^99Tc^m -HYNIC—E[C（RGDfK）]：主要经肾脏排泄，在注射后0．5和4h，标记物在肿瘤的每克组织百分注射剂量率（％ID／g）分别为（2．46±0．66）和（3．10±0．35）％ID／g，标记物在肿瘤中的滞留时间足够长。1显像示注射后1h肿瘤清晰可见，注射后4h显像效果更佳。结论^99 Tc^mHYNIC-E[C（RGDfK）]：是一种有前景的用于整合素α，β3，阳性肿瘤显像的显像剂。     

海洋蛋白肽对小鼠免疫调节作用的实验研究

目的 探讨海洋蛋白肽(marine protein peptide,MPP)对小鼠的免疫调节作用及其可能的机制.方法 以小鼠为动物模型,观察不同剂量(0.22 g/kg、0.45 g/kg和1.35 g/kg)MPP对小鼠体重、免疫器官相对重量、细胞免疫功能、体液免疫功能、单核巨噬细胞功能、NK细胞活性、脾脏T淋巴细胞亚群以及血清中细胞因子的影响.结果 MPP 0.22 g/kg剂量组Con A诱导的小鼠淋巴细胞增殖能力(0.33±0.21)和足跖肿胀度(0.36±0.11)mm,较对照组的相应两值(0.15±0.10)和(0.21±0.10)mm均有显著提高.溶血空斑数对数转换值在MPP 0.22 g/kg组(1.64±0.06)、0.45 g/kg组(1.59±0.05)和1.35 g/kg组(1.56±0.10)中均显著高于对照组(1.38±0.10);血清半数溶血值在MPP 0.22 g/kg(141.00±23.00)和0.45 g/kg组(130.40±33.20)中均显著高于对照组(100.30±19.40).MPP 0.22/kg组的NK细胞活性对数转换值(1.672±0.142)比对照组(1.392±0.182)明显升高.CD4+T辅助细胞(Th细胞)百分比在MPP 0.22 g/kg组(32.84±3.776)%和0.45 g/kg组(32.42±3.507)%中均显著高于对照组(25.06±0.354)%.血清IL-2浓度在MPP 0.22 g/kg组181.06 pg/ml、0.45 g/kg组94.84 pg/ml和1.35 g/kg 102.61 pg/ml中均显著高于对照组0.50 pg/ml;血清IL-5浓度在MPP 0.22 g/kg组38.31 pg/ml中显著高于对照组0.50 pg/ml.结论 MPP具有增强小鼠免疫功能的作用,可能通过增强Th细胞功能以及刺激细胞因子分泌而实现.     

海洋胶原肽延缓腺嘌呤所致大鼠慢性肾功能损伤

目的 研究海洋胶原肽对腺嘌呤所致大鼠慢性肾功能损伤的影响.方法 利用腺嘌呤100 mg/kg制备大鼠慢性肾功能损伤的模型,观察海洋胶原肽1.125 g/kg以及2.25 g/kg两个剂量对慢性肾功能损伤的影响.于实验的第0、1、3、5、8、12周检测各组大鼠血清肌酐、尿素氮的水平,收集大鼠24 h的尿量,计算肌酐清除率.实验期间观察大鼠的精神状态、体重增长的改变,实验结束时对肾脏组织超微结构的改变进行观察.实验持续12周.结果 实验5、8、12周时,模型组动物血清肌酐水平明显升高[(182.2±119.52)μmol/L、(308.17±88.37)μmol/L、(347.57±68.24)μmol/L],尿素氮水平也明显升高[(29.20±16.48)mmol/L、(63.03±18.68)mmol/L、(95.53±24.88)mmol/L],而肌酐清除率明显降低[(0.53±0.23)ml/min、(0.17±0.13)ml/min、(0.14±0.08)ml/min].海洋胶原肽2.25 g/kg干预组的血清肌酐和尿素氮水平在相应的时间点明显低于模型组大鼠血清的相应指标,而肌酐清除率则明显高于模型组[5、8、12周时血清肌酐水平:(105.60±11.84)ml/min、(175.40±73.93)ml/min、(240.14±71.53)ml/min;尿素氮水平:(23.62±3.89)mmol/L、(41.90±23.78)mmol/L、(72.93±26.12)mmol/L;肌酐清除率:(0.99±0.35)ml/min、(0.45±0.28)ml/min、(0.26±0.06)ml/min].肾脏超微结构较模型组的损伤明显减轻.海洋胶原肽1.125 g/kg干预组较模型组比较也有改善趋势,但血清肌酐、尿素氮水平及肌酐清除率的变化与模型组比较,差异没有统计学意义.结论 海洋胶原肽2.25 g/kg可以延缓腺嘌呤导致的大鼠慢性肾功能损伤的进程.     

孤啡肽基因敲除小鼠电针镇痛作用增强

目的：采用痛敏肽/孤啡肽FQ (OFQ)基因敲除的小鼠,进一步明确OFQ在电针镇痛中的作用。方法：选用足三里和三阴交两个穴位,电针参数如下：恒流输出方波,电针强度为0.5、0.7、0.9 mA递增,每一强度持续10 min,电针频率分别为2 Hz或100 Hz。采用热辐射甩尾方法测定痛阈,在电针前、电针中和电针后评价痛阈的变化。结果：OFQ基因敲除小鼠的基础热痛阈比野生型小鼠明显延长。无论是2 Hz还是100 Hz电针,对OFQ基因敲除小鼠和野生型小鼠都有镇痛作用,对OFQ基因敲除小鼠的镇痛作用更强。结论：在体情况下,OFQ致痛敏,但拮抗电针镇痛。     

99mTc-K237的制备及其在小鼠体内分布和显像

目的 探索99mTc标记多肽K237的方法 ,研究标记物的稳定性及其在小鼠体内的分布.方法 采用99mTc直接标记多肽K237.正常小鼠尾静脉注射99mTc-K237后不同时间处死,取血液及主要脏器,测定其每克组织百分注射剂量率(%ID/g).经尾静脉将99mTc-K237注入荷人肺癌A549裸鼠,于注射后不同时间显像.结果 99mTc-K237的标记率和放化纯均＞95%,其与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的最高特异性结合率为40.36%.99mTc-K237在生理盐水和正常人血清中放置24 h后,其放化纯分别为(89.1±1.4)%和(88.3±1.1)% (t=1.56,P＞0.05).静脉注射99mTc-K237后24 h内,小鼠血液放射性清除迅速,放射性主要聚集在肾脏并经其清除,其他组织器官的放射性随时间逐渐降低.99mTc-K237荷人肺癌A549裸鼠显像示肿瘤组织摄取高,肿瘤与对侧正常组织放射性计数比值(T/NT)最高可达3.97±0.31.结论 99mTc-K237易于制备,具有较理想且符合实际的动物体内动力学表现.     

多肽类肺癌显像剂的制备及其初步鉴定

目的 通过噬菌体随机七肽文库筛选出与体内肺癌组织特异结合的七肽,并制备肽类肺癌早期诊断试剂.方法 通过噬菌体展示体内筛选技术获得与肺癌特异结合的噬菌体,进行序列测定,合成特异结合的多肽,125I标记后经静脉注射入小鼠体内,观察其在小鼠Lewis肺癌模型中的分布.结果 通过4轮筛选获得了QYGQFAY七肽,该七肽经125I标记后可以很好地与肺癌组织特异结合,在体内2 h左右与肿瘤结合得最充分,而且体内代谢较快,6 h左右体内分布明显减少,基本代谢完毕.结论 该七肽可以较好地对Lewis肺癌进行显像和诊断.