寄生虫副肌球蛋白的分子免疫学研究进展

副肌球蛋白存在于无脊椎动物,由同源二聚体构成。副肌球蛋白具有多方面的生理作用,是一个重要的显性抗原,具有调节免疫反应的特性。近来,对副肌球蛋白的分子生物学特点和免疫学作用做了较广泛深入的研究。该文将从其分布,作用及分子特征,疫苗的研究,T、B淋巴细胞表位,参与免疫调节等研究进展进行了综述。     

抗人心肌肌球蛋白重链单克隆抗体的筛选与鉴定

用自制人心肌肌球蛋白作为哺抗原，按杂交瘤常规技术获得一株稳定的Ｇ４杂交瘤细胞株。单抗亚型为ＩｇＧ１型：用免疫印迹法对成人、胎儿、哺乳类动物及鲫鱼的心肌球蛋白提取液在２００ｋＤ处有一着色带；免疫组化ＡＢＣ法表明单抗与成人、胎儿、猪、免、大白鼠的心肌细胞胞浆均有阳性反应，与血管平滑肌均呈阴性反应。该单克隆抗体可用于与心肌坏死病理过程有关的疾病的诊断。     

寄生虫副肌球蛋白的分子免疫学研究进展

副肌球蛋白存在于无脊椎动物,由同源二聚体构成.副肌球蛋白具有多方面的生理作用,是一个重要的显性抗原,具有调节免疫反应的特性.近来,对副肌球蛋白的分子生物学特点和免疫学作用做了较广泛深入的研究.该文将从其分布,作用及分子特征,疫苗的研究,T、B淋巴细胞表位,参与免疫调节等研究进展进行了综述.     

非钙依赖性调节肌球蛋白活性对维持平滑肌张力的影响

目的：揭示肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase，MLCK)的一个活性片段对肌球蛋白功能的非钙依赖性调节作用，进一步完善平滑肌收缩的非钙依赖性调节机制研究，并为平滑肌系统疾病的治疗以及新药开发提供理论基础。方法：实验于2004-01／05在大连医科大学生化药理实验室完成。用胰蛋白酶(trypsin)水解MLCK，再经离子交换层析分离纯化而获得MLCK的活性片段(myosin light chain kinase fragment,MLCKF.61 ku)；用western blot检测MLCKF与完整MLCK的同源性：用SDS—PAGE及Scoin lmage扫描软件检测肌球蛋白轻链的磷酸化程度；用分光光度法测定肌球蛋白Mg^2 —ATP酶的活性。结果：在无Ca^2 ／CaM条件下，61 ku MLCKF能轻度磷酸化20ku肌球蛋白轻链，并提高肌球蛋白Mg^2 -ATP酶活性；其磷酸化效力强于无Ca^2 ／CaM时MLCK的磷酸化效力．但弱于有Ca^2 ／CaM时MLCK的磷酸化效力，且持续时间长，较稳定，不易被MLCK抑制剂ML-9抑制结论：MLCKF能以非钙依赖性方式轻度磷酸化肌球蛋白轻链．并提高肌球蛋白Mg^2 -ATP酶活性，对低钙时平滑肌张力的维持可能起一定作用。     

日本血吸虫大国大陆株副肌球蛋白编码基因的PCR扩增

根据已知的日本血吸虫菲律宾株的副肌球蛋白分子的部分ｃＤＮＡ序列，设计两对寡核苷酸引物（引物１／２和引物３／４），以聚合酶链式反应（ＰＣＲ），用引物１／２从本室两个日本血吸虫中国大陆株ｃＤＮＡ库中均扩增出与预期大小（９２７ｂｐ）一致的特定ＤＮＡ片断。巢式ＰＣＲ－以第一扩增产物为模板，用引物３／４扩增出约５０００ｂｐ的单一条带，与预期片段（４９４ｂｐ）大小一致。表明ＰＣＲ产物为编码副肌球蛋白的目的基因     

细菌脂多糖促进克氏锥虫抗原诱导的自身免疫性心肌炎

目的观察细菌脂多糖（LPS）对克氏锥虫抗原诱导自身免疫性心肌炎的影响。方法克氏锥虫抗原辅以完全弗氏佐剂免疫A／J小鼠，LPS经腹腔接种方式给药，其后加强免疫2次，28d后，测定心肌肌球蛋白特异的迟发型超敏反应（DTH）及自身抗体，并取鼠心脏观察心肌炎症情况。结果LPS提高锥虫抗原诱导的心肌肌球蛋白特异性DTH及自身抗体。并且25μg LPS与锥虫抗原免疫的小鼠可见明显的心肌炎。结论LPS能够促进心肌肌球蛋白特异的自身免疫反应及锥虫抗原诱导的自身免疫性心肌炎。     

香烟烟雾提取物对鼠成肌细胞分化的影响的研究

目的: [摘要]目的:为了探讨COPD患者周围骨骼肌萎缩的可能的分子机制,用香烟烟雾的提取物(CSE)对鼠成肌细胞系(C2C12)进行了体外实验研究.方法:把C2C12细胞按150个/ml的浓度接种在12孔的平底塑料盘里,分为对照组和实验组,24小时后,在实验组的细胞中加入不同浓度(1%,2.5%,3.5%,5%)的CSE.我们把加入CSE的当天记录为第0天(day 0),第二天记录为第1天(day 1),依次类推.CSE作用24小时后,用温的杜氏磷酸缓冲液(PBS)洗涤两次后换为10%马血清细胞分化生长液使细胞分化,而对照组更换新鲜的细胞生长液即可.并观察细胞的变化,并在加入CSE后的第0、3、6天,分别检测各组的肌酸激酶(CK)活性,并用激光扫描共焦荧光显微镜技术,观察各组的肌球蛋白重链(MHC)的生成情况.结果:重复相同实验4次后,对各组数值进行单因素方差分析的统计学处理,结果发现1%,2.5%组与对照组比较无显著差异(P>0.05);3.5%实验组与对照组比较day3有显著差异(P<0.05),day6无显著差异(P>0.05);5%实验组与对照组比较,day3,day6均有显著差异(P<0.05);并且激光扫描共焦荧光显微镜技术观察对照组和实验组(3.5%)的MHC的照片显示CSE对NHC的形成有影响.结论:体外研究显示,CSE对C2C12的分化有影响.     

大鼠脑损伤后星形胶质细胞结蛋白和肌球蛋白表达的研究

对大鼠脑基底节穿刺损伤后星形胶质细胞结蛋白和肌球蛋白的表达进行了动态观察。结果显示结蛋白的表达显著增强，７ｄ时达高峰并维持这一高水平至损伤后３０ｄ，损伤后早期（２～４ｄ）其反应限于伤口周围，随后波及整个同侧半球，但强度随与伤口距离增加而逐渐减弱。肌球蛋白的阳性细胞主要见于伤口周围，部分出现在皮质分子层。结果表明结蛋白表达增强与反应性胶质化密切相关，而肌球蛋白的表达可能与增生星形胶质细胞的迁移、收缩有关。文中还对脑损伤后星形胶质细胞骨架蛋白表达改变的意义进行了讨论。