忍冬藤中环烯醚萜苷成分含量测定及制备方法

目的分析忍冬藤中马钱子苷及当药苷含量,研究环烯醚萜苷类成分的制备方法。方法建立马钱子苷及当药苷含量HPLC测定方法,分析不同产地及采收时间药材中两种成分的含量差异,比较溶剂法及大孔树脂法两种方法富集环烯醚萜苷类成分。结果 HPLC法测定含量方法准确,马钱子苷和当药苷的平均回收率分别为100.6%、99.8%,含量分别为1.5%、2.6%;且从秋季到冬季有逐渐减少的趋势;不同产地间含量有差别,以湖南、湖北两地较高;大孔树脂法富集环烯醚萜苷类成分,马钱子苷和当药苷的转移率分别为47.23%和62.35%,纯度分别为8.88%和17.72%,较溶剂萃取法好。结论不同产地及采收时间的忍冬藤中两种环烯醚萜苷类成分有一定差异,并以秋季采收最佳;大孔树脂法富集忍冬藤中环烯醚萜苷类较好。     

不同采收期忍冬藤中马钱苷含量分析

目的:研究不同采收期忍冬藤有效成分马钱苷的含量,为忍冬藤的最佳采收期提供参考。方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Agilent DB C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-磷酸盐缓冲液(23∶77),流速1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长236 nm。结果:不同采收期忍冬藤药材中马钱苷含量差异有统计学意义。结论:忍冬藤的最佳采收期为每年的十一月中旬至十二月上旬。     

多因素正交试验法优化忍冬藤提取工艺研究

目的通过正交试验优选确定忍冬藤中有效成分绿原酸和咖啡酸水煎提取工艺条件。方法以加水量、提取次数和提取时间为考察因素,每个因数分别选取三个水平进行试验设计,以高效液相色谱测定绿原酸、咖啡酸提取含量为考察指标进行L9(34)正交试验。以直观分析法和方差分析法分析研究水提忍冬藤中绿原酸、咖啡酸的影响因素,确定最佳提取工艺。结果按提取忍冬藤中绿原酸、咖啡酸含量的影响因素大小顺序,依次为提取液用量、提取次数和提取时间。最佳提取工艺为A3B2C3组合,即15倍水煎煮3次,每次时间分别为30 min、60 min和30 min。结论正交试验优选新工艺条件稳定,快速简便,重现性较好,对忍冬藤中绿原酸和咖啡酸提取含量可提高近15%,为生产工艺改进提供指导。     

4种藤类中药材干燥模型、动力学及有效成分稳定性研究

目的建立鸡矢藤、忍冬藤、首乌藤、番薯藤4种藤类中药材干燥共有模型,测定其干燥动力学参数,研究其有效成分干燥过程的稳定性。方法应用9种薄层干燥模型(Page、Wang and Singh、Two-term exponential、Newton、Logarithmic、Aghbashlo、Two-term、Midilli、Diffusion approach)对40、50、60、70℃条件下4种藤类药材的干燥曲线进行拟合,采用决定系数(R~2)、卡方(χ~2)及均方根误差(RMSE)判断拟合的优劣;根据Fick扩散定律求算干燥动力学参数;根据化学动力学原理研究有效成分在干燥过程中的稳定性。结果 Aghbashlo模型可被选作描述4种藤类中药材干燥过程的最佳共有模型。4种藤类中药材的有效水分扩散系数(D)及干燥活化能(E_a)分别为1×10~(-10)~1×10~(-9) m~2/s及40~50 kJ/mol。熊果酸、二苯乙烯苷及多糖的降解均符合一级动力学规律。绿原酸的含量随干燥温度、干燥时间的增加而增加。结论不同部位中药材的干燥动力学参数值可能具有不同的特征区间,其干燥过程可用特定的共有模型描述;干燥过程对中药材品质有较大影响。     

正交设计法优选忍冬藤中绿原酸提取工艺

目的:对忍冬藤中绿原酸的提取工艺进行研究。方法:采用正交设计法设计忍冬藤中绿原酸的微波提取工艺和超声波提取工艺,采用高效液相法测定各提取工艺下的绿原酸含量,并将两种提取方法得到的结果进行比较。结果:微波提取法的最佳提取工艺为:微波时间为60 s,乙醇浓度为50%,料液比为1∶15,绿原酸含量为0.357%。超声波法最佳提取工艺为:提取功率为50 Hz,甲醇浓度为50%,料液比为1∶20,绿原酸含量为0.321%。以绿原酸含量为指标,微波提取法优于超声波提取法。结论:忍冬藤中绿原酸的最佳提取方法为微波提取法,此方法时间短,耗能低,提取率优于超声波提取法,可用于忍冬藤中绿原酸的提取。     

RP-HPLC法同时测定忍冬藤中绿原酸和咖啡酸含量

目的建立一种反相高效液相色谱法用于同时测定忍冬藤中绿原酸和咖啡酸含量。方法忍冬藤药材经水提醇沉过滤后,以Lichrospher C18化学键合硅胶为固定相,乙腈-0.2%磷酸溶液(15:85;v/v)为流动相进行色谱等度分离,UV 326 nm波长下定量检测。结果在本文建立的分析条件下,绿原酸、咖啡酸的色谱保留时间分别约为6.6 min和10.8 min,色谱峰形清晰对称,与药材中其余内源性物质分离完全,定量准确,12 min内可完成一次分离分析过程。绿原酸、咖啡酸进样量在0.02-0.70μg范围与峰面积线性良好,相关系数分别为r=0.999 7和r=0.999 8。连续5次测定进样量为0.1μg绿原酸、咖啡酸对照品的相对标准偏差分别为1.29%和1.50%。忍冬藤药材提取处理后样品可稳定10 h以上,对5份同一忍冬藤药材中绿原酸和咖啡酸同时测定相对标准偏差分别为1.29%和1.30%,测定平均回收率分别为(99.4±1.4)%和(99.3±1.9)%,方法已成功应用于同时测定不同产地忍冬藤药材中绿原酸和咖啡酸含量。结论本方法可同时测定忍冬藤药材中绿原酸、咖啡酸含量,简便实用、快速可靠,适用于忍冬藤药材质量控制和药品含量检测。     

聚酰胺树脂分离纯化忍冬藤叶中绿原酸的工艺优选

目的:优选忍冬藤叶中绿原酸的分离纯化工艺条件.方法:以绿原酸含量为指标,通过单因素试验考察聚酰胺树脂的静态和动态吸附、解吸性能,并考察上样量、水洗用量、洗脱剂种类和用量;以绿原酸纯度和保留率为指标,采用L9(34)正交试验考察洗脱流速、洗脱剂浓度和用量对忍冬藤叶中绿原酸的分离纯化工艺的影响.结果:优选的分离纯化工艺为绿原酸上样量10 mg·g-1树脂,用2 BV水洗除杂,加3 BV 65％乙醇洗脱,洗脱流速0.4 BV·h-1,收集洗脱液.结论:优选的工艺合理、稳定可行,可为工业化分离纯化绿原酸提供参考.     

忍冬藤提取物抗结肠癌作用研究

【摘要】目的研究忍冬藤提取物的体外抗结肠癌作用。方法体外培养结肠癌HCT116和SW480细胞并用忍冬藤提取物干预,采用CCK8法检测忍冬藤提取物对HCT116和SW480细胞增殖的影响;采用Hochest法和Annexin V/PI法检测忍冬藤提取物及p53抑制剂PFT α对HCT116和SW480细胞凋亡的影响;JC 1法检测忍冬藤提取物对HCT116细胞线粒体膜电位的影响;Western Blot检测忍冬藤提取物对HCT116细胞相关蛋白表达水平的影响。结果相较于空白组,忍冬藤提取物可明显抑制结肠癌HCT116和SW480细胞增殖,并促进细胞凋亡（P<001）,促进HCT116细胞线粒体膜电位坍塌,明显上调HCT116细胞Bax/Bcl 2的比值（P<001）以及Cleaved PARP、Cyt C、Cleaved Caspase 3和p53蛋白表达（P<005,P<001）;相较于忍冬藤提取物组,忍冬藤提取物+PFT α明显抑制HCT116细胞凋亡（P<001）。结论忍冬藤提取物可通过诱导p53依赖的线粒体凋亡发挥抗结肠癌作用。     

忍冬藤与其伪品金银忍冬藤、连翘茎的鉴别研究

目的:对忍冬藤与其伪品金银忍冬藤、连翘茎进行比较和鉴别。方法:按生药学常规方法对忍冬藤、金银忍冬藤及连翘茎在基源、性状、显微方面进行比较和鉴别。结果:忍冬藤、金银忍冬藤及连翘茎在基源、性状及显微特征方面均存在一定差异。结论:性状鉴别和显微鉴别方法简便、可靠,为保证忍冬藤药材质量提供了有效的鉴别方法。     

HPLC法测定忍冬藤饮片中绿原酸的含量

目的采用高效液相色谱法测定忍冬藤饮片中绿原酸的含量。方法 Dikma Diamonsil C18(4.6 mm×250mm,5μm);以乙腈-0.4%磷酸溶液(10:90)为流动相;检测波长为327 nm,流速为1.0 mL.min-1。理论板数按绿原酸峰计算应不低于1000。结果绿原酸与其相邻杂质峰能完全分离,绿原酸进样量在0.080 4~0.804μg之间与峰面积呈良好的线性关系,相关系数r=0.999 9,平均加样回收率为100.3%,RSD=0.71%(n=6)。结论本方法操作简便,精密度好,结果准确可靠,可用于忍冬藤饮片的质量控制。