纳米二氧化硅对HaCaT细胞谷胱甘肽还原酶表达及活力的影响

目的探讨经不同粒径纳米二氧化硅处理后,HaCaT细胞内谷胱甘肽还原酶(GR)的表达及其活力的变化。方法将对数生长期HaCaT细胞经15μg/ml的15、30、100nm纳米二氧化硅处理24h后,采用实时荧光定量PCR(RT-Q-PCR)检测GR基因mRNA的表达水平,采用Westernblotting检测GR蛋白的表达水平,采用试剂盒检测GR活力变化。结果不同粒径纳米二氧化硅对GR基因的mRNA水平具有明显影响,纳米二氧化硅粒径越小,mRNA表达水平越低,但均低于对照组;GR蛋白表达量随纳米二氧化硅粒径增大而增大,且15、30nm纳米二氧化硅抑制GR表达,100nm纳米二氧化硅促进GR表达;GR活力随纳米二氧化硅粒径的增大而升高。结论纳米二氧化硅可能通过影响GR的表达及酶活力的变化促进氧化应激反应。     

磷酸三(1,3-二氯异丙基)酯对大鼠的急性和亚慢性毒性作用

目的：研究磷酸三(1,3-二氯异丙基)酯(TDCIPP)对大鼠的急性和亚慢性毒性作用。方法：急性毒性试验中,将50只SPF级SD大鼠随机分为5组,每组10只,雌雄各半,按照TDCIPP剂量464、1 000、2 150、4 640和10 000 mg/kg分别进行单次经口灌胃染毒,观察14 d。在亚慢性毒性试验中,将80只SPF级SD大鼠随机分为4组,每组20只,雌雄各半,TDCIPP按照0、13.3、40、120 mg/(kg·d)的剂量,每天1次,连续灌胃112 d。于试验结束当天分别称取大鼠体质量;腹主静脉取血进行血常规、血液生化指标的检测;处死大鼠后收集脑、心、肝、脾、肺、肾并称取质量,计算脏器系数,并对这些组织进行HE染色分析组织病理变化。选择具有代表性的指标为毒性效应,使用基准剂量法(BMD)评估在特定风险水平下的暴露水平,与无可见有害作用法(NOAEL)参考值进行比较,分析相对更具体和敏感的剂量限值。结果：在急性经口毒性试验中,TDCIPP对SD大鼠的半数致死剂量(LD50)为2 000～2 300 mg/kg,属低毒物质。在亚慢性经口毒性试验中,与对照组比较,120 m...     

深圳市罗湖区老年人发生认知功能障碍的饮食习惯影响因素分析

目的探讨深圳市罗湖区老年人发生认知功能障碍的饮食习惯影响因素。方法采用自制调查问卷对深圳市罗湖区60岁及以上老年人进行调查,根据简易智力状态评估量表(Mini-Cog)和简易精神状态检查量表(MMSE)筛选出249例认知功能障碍患者作为病例组。按照年龄±3岁、性别相同原则进行1∶1匹配对照组249例。收集两组对象的饮食习惯,运用多因素条件logistic回归分析导致老年人认知功能障碍的饮食习惯影响因素。结果单因素分析发现,大米、新鲜蔬菜、新鲜水果的食用频次和是否食用海水鱼等饮食习惯是老年人认知功能障碍的影响因素(P均<0.05)。logistic回归分析结果显示,每月进食新鲜蔬菜>60次(OR=0.639,95%CI:0.465~0.879)、30~60次(OR=0.598,95%CI:0.412~0.790)、食用海水鱼(OR=0.634,95%CI:0.418~0.960)是老年人认知功能障碍的保护因素。结论经常进食新鲜蔬菜(≥30次/月)和食用海水鱼的饮食习惯是深圳市老年人认知功能障碍的保护因素。     

不同粒径二氧化硅致人永生化表皮细胞氧化应激相关指标改变的比较

目的 探讨不同粒径、不同浓度的纳米二氧化硅(nm-SiO2)染毒人永生化表皮(HaCaT)细胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)水平以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)活力的变化.方法 将对数生长期HaCaT细胞...     

三氯乙烯对CYP1A2 高表达肝细胞株凋亡基因和癌基因的影响

目的： 构建CYP1A2基因高表达载体,转染到L02肝细胞,建立CYP1A2高表达细胞株并检测三氯乙烯对该细胞株凋亡基因和癌基因的影响。方法：根据GenBank提供的CYP1A2基因cDNA序列设计引物,PCR扩增该基因并将其克隆到慢病毒高表达载体pLVX-acGFP1-C1中,将已经构建的慢病毒载体对293FT细胞进行转染,收集病毒上清,感染正常L02肝细胞。用嘌呤霉素进行筛选得到CYP1A2高表达L02细胞株,通过荧光定量PCR和Western blot对细胞株进行鉴定。用不同剂量三氯乙烯对正常L02肝细胞和CYP1A2高表达细胞进行染毒12 h,采用PCR方法检测凋亡基因 (Bcl-2、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9)和癌基因 (c-fos、c-myc、K-ras、p53)mRNA表达的变化。结果：测序证明重组慢病毒高表达载体CYP1A2基因序列与GenBank提供的CYP1A2序列一致,荧光定量PCR检测显示CYP1A2高表达细胞株CYP1A2 mRNA表达比正常L02肝细胞提高317倍,Western blot结果显示CYP1A2高表达细胞株CYP1A2蛋白表达水平比正常L02肝细胞高3.41倍。三氯乙烯染毒后,CYP1A2高表达细胞中凋亡基因Bcl-2 mRNA表达水平与正常肝细胞无显著性差异(P>0.05),而Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9 mRNA表达水平高于正常肝细胞(P<0.05或P<0.01)。CYP1A2高表达细胞中癌基因c-myc和p53 mRNA表达水平低于正常肝细胞(P<0.05或P<0.01),而c-fos和K-ras mRNA则高于正常肝细胞(P<0.05或P<0.01)。结论：三氯乙烯对CYP1A2高表达细胞凋亡基因和癌基因表达有显著影响,提示CYP1A2是三氯乙烯在体内代谢的重要因素,与三氯乙烯毒性存在一定关系。     

结晶型硫化镍诱发细胞恶性转化过程中基因组总体DNA甲基化的改变

Objective To observe the effect of crystalline NiS on genome DNA methylation profile in in vitro cultured cells.Methods 16HBE Cells were treated with crystalline NiS at 0.25,0.50,1.00 and 2.00 μg/cm2 for 24 h and three times at total.DAC treatment was given at 3 μmol/L for 72 h.5-mC immunofluorescence and SssI emthyltrasferase assay methods were applied to investigate if the hypomethylation of genome DNA involved.Results The results of 5-mC immunofluorescence showed that the fluorescence intensity of NiS-treated cells were decreased in some degree, and transformed cells were decreased dramatically.By the SssI methylase assay, an average of (81.9 ± 7.3 )% methylated CpG were found in negative control cells.By contrast, ( 77.9 ± 6.2) %, ( 75.3 ± 6.8 ) %, ( 59.5 ± 4.9 ) %, ( 67.4 ±5.1 ) % methylated CpG were observed in cells treated with NiS for three times at dosage of 0.25,0.50,1.00and 2.00 μg/cm2 which were abbreviated as NiS0.25, NiS0.50, NiS1.00, NiS2.00 respectively.The ANOVA analysis results showed that there was a significant difference in the 5 groups above ( F = 124.95,P ＜0.01 ).The results of Dunnett-t test showed that the methylated CpG of both group NiS1.00 and NiS2.00were significantly decreased compared with the negative control group(t values were 7.64,4.89 respectively,P ＜0.01 ).For methylated CpG, (46.2 ±4.1 ) % and (43.6% ±4.3)% were observed in NiS-transformed cells (NSTC1 and NSTC2) which were dramatically decreased compared with the negative control group(t values were 12.79,13.56 respectively, P ＜ 0.01 ).Conclusion Genomic DNA methylation levels were decreased during NiS induced malignant transformation.     

蛋白质组学在孤独症谱系障碍研究中的进展

<正>孤独症谱系障碍又名儿童孤独症或早年孤独样障碍,在我国香港、澳门、台湾等地及日本地区又常称为自闭症,是广泛性发育障碍(PDD)中最为常见的一种疾病。儿童孤独症谱系障碍一般发病在3岁前,以男性居多,男女比例为4~10:1。在西方发达国家,孤独症谱系障碍发病率同样呈现显著上升的趋势。在美国,1990年报道孤独症谱系障碍发病率为0.2%~0.7%;2007年的流行病学调查发现,全美3~17岁儿童青少年中,孤独症谱系障碍的患病     

结晶型硫化镍诱发细胞恶性转化过程中基因组总体DNA甲基化的改变

目的 探讨结晶型硫化镍(NiS)对体外培养细胞基因组总体DNA甲基化水平的影响.方法 分别以0.25、0.50、1.00、2.00 μg/cm2结晶型NiS处理人支气管上皮细胞系(16HBE)24 h,隔天再次进行相同处理,共处理3次;以3μmol/L DNA甲基化转移酶抑制剂5-脱氧杂氮胞苷(DAC)处理72 h的正常细胞为阳性对照.应用免疫荧光法和SssI甲基转移酶法定性、定量分析结晶型NiS处理细胞和恶性转化细胞(NSTC)基因组DNA总体甲基化的变化.结果 结晶型NiS处理细胞DNA甲基化免疫荧光的强度均有不同程度降低,转化细胞DNA甲基化免疫荧光的强度明显降低.定量分析结果显示,对照组基因组总体甲基化率(mCpG%)为(81.9±7.3)%,0.25、0.50、1.00、2.00 μg/cm2的结晶型NiS处理3次的细胞(NiS0.25、NiS0.50、NiS1.00、NiS2.00)基因组总体mCpG%则分别为(77.9±6.2)%、(75.3±6.8)%、(59.5±4.9)%、(67.4±5.1)%.经单因素方差分析显示,不同组间总体mCpG%差异有统计学意义(F=124.95,P＜0.01),两两比较发现NiS1.00和NiS2.00组与对照组相比,差异均有统计学意义(t值分别为7.64、4.89,P值均＜0.01);恶性转化细胞(NSTC1、NSTC2)基因组总体mCpG%分别为(46.2 ±4.1)%、(43.6±4.3)%,低于对照组,差异有统计学意义(t值分别为12.79、13.56,P值均＜0.01).结论 结晶型NiS诱发细胞恶性转化过程中,整体基因组DNA甲基化水平降低.     

宫颈癌免费筛查女性生殖道沙眼衣原体感染与高危型人乳头瘤病毒感染的关联性研究

摘 要：［目的］ 分析宫颈癌免费筛查女性中生殖道沙眼衣原体（GCT）感染与高危型人乳头瘤病毒（HR-HPV）感染的关联性。［方法］ 采用横断面研究设计,选取2021年11月至2022年5月期间于深圳市罗湖区妇幼保健院参加宫颈癌免费筛查的1 494名健康女性为研究对象,通过问卷调查收集研究对象的人口学资料、生活习惯、性行为史及生殖生育史。采用Logistic回归模型分析女性GCT感染与HR-HPV感染的关联性。［结果］ GCT的阳性率为4.4%,HR-HPV的阳性率为11.0%。其中,GCT阳性组的女性HR-HPV阳性率（25.8%）高于阴性组（10.4%）（P<0.001）。多因素Logistic回归模型结果显示,在校正人口学资料、生活习惯、性行为史和生殖生育史后,GCT感染与HR-HPV感染存在显著关联（OR=2.80,95%CI：1.51~5.19）。［结论］ 女性GCT感染与HR-HPV感染有显著关联性,GCT感染的女性HR-HPV感染的可能性更大,应加强对这部分人群的预防保健、早期筛查和及时干预工作。