姜黄素通过调控miR-7641/PTPN14分子轴抑制乳腺癌发展进程的分子机制研究

目的 探讨姜黄素通过调控miR-7641/PTPN14分子轴抑制乳腺癌发展进程的分子机制。方法 采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测乳腺癌患者癌组织及细胞系中miR-7641表达情况;使用Kaplan-Meier方法作乳腺癌患者生存曲线;采用不同浓度的姜黄素处理细胞,或转染miR-7641 mimic、Anti-miR-7641及pcDNA-PTPN14载体,采用qRT-PCR检测miR-7641表达情况,MTT实验及克隆形成实验检测细胞增殖能力,Transwell小室法检测细胞迁移及侵袭,western blotting检测Ki67、pcDNA、CyclinD1、Bax、Bcl-2、caspase-3、caspase-8蛋白表达水平,采用双荧光素酶报告基因系统检测miR-7641与PTPN14靶向调控关系。结果 与癌旁组织或乳腺正常上皮细胞比较,miR-7641在乳腺癌患者癌组织及乳腺癌细胞系中高表达（P<0.01、0.001）,且miR-7641能够明显促进乳腺癌细胞的增殖、迁移及侵袭（P<0.05、0.01、0.001）,并促进Ki67、pcDNA、CyclinD1、Bcl-2蛋白表达,抑制Bax、caspase-3、caspase-8蛋白表达;miR-7641与PTPN14 3''-UTR靶向结合,姜黄素通过miR-7641/PTPN14分子轴抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移及侵袭（P<0.01、0.001）,并抑制Ki67、pcDNA、CyclinD1、Bax蛋白表达,促进Bcl-2、caspase-3、caspase-8蛋白表达。结论 姜黄素可通过下调miR-7641促进PTPN14表达,进而抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移及侵袭。     

改良左肋缘下斜切口在手助腹腔镜根治性左肾切除术中的应用

目的观察改良左肋缘下斜切口在手助腹腔镜根治性左肾切除术中的应用价值。方法 2011年9月至2012年12月本科室对58例左肾肿瘤患者采用改良左肋缘下斜行切口作为手助切口,行手助腹腔镜根治性左肾切除术。其中,男36例,女22例,年龄42~74岁,平均56.3岁。肿瘤直径4.2~11cm,平均7.6cm。结果 58例患者手术均成功完成,手术时间46~86分钟,平均58.5分钟。切口均获一期愈合,无一例出现腹部切口感染、脂肪液化等并发症。结论改良左肋缘下斜切口行手助腹腔镜根治性左肾切除术,有利于术者左手辅助操作暴露,减少术者手部不适,是一种较理想的左侧手助切口选择。     

先天性心脏病合并支气管异常多层螺旋CT血管成像分析

目的通过MSCT血管成像分析先天性心脏病合并支气管异常诊断价值。方法选择我院2013年5月～2015年5月间经手术治疗的35例婴幼儿(6月～7岁)复杂性先天性心脏病患者作为研究对象,通过VRT、MPR、MIP和MinP等后处理技术,评估患儿心脏血管畸形情况和气管支气管异常情况。结果 MSCT显示共存在心血管畸形104处,诊断准确率分别为97.2%。其中心内畸形诊断准确率分别为98.2%(57/58);心脏-大血管连接异常诊断准确率为100.0%(24/24);心外大血管畸形诊断准确率为92.0%(23/25)。35例患儿共检出气管性支气管12例(12/35),Ⅰ型3例,Ⅱ型2例,Ⅲ型5例,Ⅳ型2例。检出气管狭窄6例(6/35),气管憩室1例。结论先天性心脏病患儿气管支气管异常发生率较高,MSCT血管成像在评估心脏血管异常的基础上可以准确评估气管支气管异常情况。     

形变配准技术在心脏剂量评估中的应用

目的:研究基于形变配准技术评估心脏及左心室肌剂量-体积指标的可行性。方法:回顾性分析21例患者屏气下心电门控四维CT(4DCT),在4DCT的20个时相(0%、5%......95%)上分别勾画心脏、左心室肌。使用商用软件MIM Maestro(MIM)中的基于密度的自由形变算法,将最小体积和以0%时相为参照的最小相似性指数(DSC)时相的心脏、左心室肌分别形变到最大体积和DSC时相上,并参照其形变场对剂量进行相应的形变。分析形变前后心脏及左心室肌相对于最大体积/DSC时相的体积、平均剂量(D_(mean))、V_(20)、V_(30)及V_(40)等参数的变化。结果:将最小体积时相的心脏形变到最大体积时相,形变前后的体积与最大体积的差由(13.87±2.84)%减小到(1.72±1.45)%。将最小DSC时相的心脏形变到最大DSC时相,形变前后的心脏与最大DSC时相相比,其DSC由0.899±0.014增加到0.950±0.009。形变后心脏的D_(mean)、V_(20)、V_(30)及V_(40)与最大体积/最大DSC时相相比差异均具有统计学意义(P0.05)。将最小体积时相的左心室肌形变到最大体积时相,形变前后的体积与最大体积时相的差由(18.77±6.64)%仅减小到(17.38±7.89)%,且形变前后的体积与最大体积间的差异均具有统计学意义(P0.05)。将最小DSC时相的左心室肌形变到最大DSC时相,形变后的左心室肌与最大DSC时相相比,其DSC仅达到0.773±0.052,而形变前后的D_(mean)、V_(20)、V_(30)及V_(40)等参数与最大DSC时相相比差异均具有统计学意义(P0.05)。结论:心脏的剂量-体积指标变化与其体积及形态变化之间没有线性关系,且由于过度形变的存在,有必要对心脏进行局部个体化的形变配准。而左心室肌体积和形态变化的不一致性可能是导致其剂量-体积评估不确定性的主要因素,因此应考虑引入多维参数的形变配准算法。     

siRNA沉默FOXF2基因对宫颈癌Hela细胞迁移与增殖的影响研究

目的 探究siRNA沉默FOXF2基因对宫颈癌Hela细胞迁移与增殖的影响研究。方法 在该院于2018年1月-2018年12月检测siRNA沉默FOXF2,选择Western Blot、Real Time-PCR法,之后Hela细胞中蛋白表达、FOXF2基因mRNA的变化。siRNA沉默FOXF2后细胞增殖,选择CCK8检测;siRNA沉默FOXF2后细胞迁移选择划痕试验检测。结果 多重对比各组,选择Dunnett T3,结果显示:3条siRNA链沉默FOXF2后,相较于Hela细胞SNC组合Hela细胞,siRNA-FOXF2 mRNA显著降低(65%~85%),对比差异有统计学意义(P<0.05);相较于Hela细胞SNC组及Hela细胞组,Hela细胞FOXF2蛋白表达水平出现显著降低;在siRNA沉默FOXF2基因后,经细胞划痕试验显示,相较于Hela细胞SNC组及Hela细胞组,Hela细胞的迁移能力显著较高;较Hela细胞SNC组及Hela细胞组,siRNA-FOXF21415组增殖率显著较高,对比差异有统计学意义(P<0.05)。结论 宫颈癌患者针对其Hela细胞的迁移与增殖能力,选择SiRNA沉默FOXF2基因有极大的促进作用,具有临床应用价值。     

早期乳腺癌保乳术后瘤床同步加量调强放疗的临床观察

目的 探讨早期乳腺癌保乳术后瘤床同步加量调强放射治疗（SIB-IMRT）技术的疗效、不良反应及美容效果。方法 2009年8月-2013年10月山东省肿瘤医院收治的分期为T_1-2N_0-1M₀的乳腺癌保乳术后患者146例,其中60例行序贯瘤床加量调强放疗（常规组）,剂量分割方案：全乳1.8~2.0 Gy/次,共45~50 Gy/25次,后续瘤床加量10~16 Gy/5~8次,总疗程42~45 d;86例行SIB-IMRT短疗程调强放疗（SIB组）,剂量分割方案：全乳1.8 Gy×28次,瘤床同步加量2.15 Gy×28次,总疗程38 d。采用Kaplan-Meier法计算生存率和局部复发率,χ²检验比较两组资料可比性、不良反应及美容效果。结果 常规组与SIB组1、2、3级急性皮肤反应发生率分别为63.3%与75.8%、20.0%与16.2%、16.7%与8.0%（P>0.05）;0、1、2级皮肤及皮下组织晚期反应发生率分别为84.6%与85.8%、12.2%与10.6%、3.2%与3.6%（P>0.05）;0、1、2、3级中性粒细胞减少发生率分别为22.6%与33.7%、34.6%与40.7%、26.7%与20.9%、15.0%与4.7%（P>0.05）。常规组与SIB组放射性肺炎分别为2例（3.3%）与3例（3.5%）（P>0.05）;美容优良率分别为89.7%与89.2%（P>0.05）。随访24~74个月（中位数38个月）,随访率95.2%;两组1、3、5年生存率均为100%。常规组2例出现复发或转移（3.5%）,SIB组3例出现复发或转移（3.7%）。结论 保乳术后瘤床同步加量放疗与瘤床序贯放疗疗效相似,美容效果相当且未加重早晚期不良反应,并有缩短疗程的优势。     

β-Catenin蛋白在散发性结直肠癌中的异常表达和基因突变

目的: 观察β-Catenin蛋白在散发性结直肠癌(SCRC)中胞质胞核异常表达特征和基因突变发生率, 并探讨其与临床病理的相关性.方法: 用免疫组织化学EnVision二步法检测90例SCRC与22例散发性结直肠腺瘤标本的β-Ca t enin蛋白在胞质胞核中的异常表达. 以PCR扩增和直接测序检测上述标本中β-Catenin基因突变.结果: 正常结直肠黏膜中β-Catenin蛋白表达定位于细胞膜上,未见胞质胞核中的异常表达. SCRC中β-Catenin蛋白在胞质与胞核的异常表达率显著高于散发性腺瘤中的异常表达率(88.9% vs 59.1%, 41.1% vs 18.2%, P <0.05).SCRC的β-Catenin异常胞质表达率与肿瘤生长方式, 分化程度相关(P <0.05);胞核异常表达率在溃疡型生长高于在隆起型生长(50.0%vs 26.5%, P <0.05). 胞核异常表达往往出现在肿瘤的浸润前沿. 90例SCRC中仅发现1例β-Catenin基因突变;22例散发性结直肠腺瘤中未检测出突变.结论: β-Catenin蛋白胞质胞核异常表达可能在SCRC的发生发展中起重要作用. 在SCRC中β-Catenin基因突变可能不是β-Catenin蛋白异常表达的主要原因.     

腺病毒介导RNAi抑制胃癌FU97细胞AFP基因表达的研究

目的:研究甲胎蛋白特异siRNA腺病毒载体对人甲胎蛋白阳性胃癌细胞FU97AFP基因的抑制作用,及抑制甲胎蛋白基因后对此肿瘤细胞周期及凋亡的影响.方法:利用构建好的腺病毒Ad-EGFP-U6-AFP-siRNA载体转染入FU97细胞,筛选出最佳感染复数.结果:筛选出最佳感染复数为:MOI=100;Ad-EGFP-U6-AFP-siRNA转染细胞后能显著抑制AFP基因在mRNA和蛋白水平的表达,G0/G1期细胞百分率[(33.49±1.85)%]明显低于空载体对照组和空白对照组[(64.76±2.98)%和(74.81±2.60)%,P<0.01],G2/S期[(64.10±2.59)%]显著高于空载体组和空白对照组[(34.77±1.91)%和(29.85±2.85)%],P<0.01;凋亡分析,实验组与各对照组之间凋亡发生差异无统计学意义,P>0.05.结论:重组腺病毒介导的RNA干扰能够显著抑制AFP在FU97中mRNA水平和蛋白水平的表达;抑制AFP后,影响细胞增殖周期,但对细胞凋亡无影响.