药用植物亲缘学理论创新与应用实践

通过回顾药用植物亲缘学的建立、发展历程,总结了其在寻找进口药的国产替代资源、药用植物新分类群的发现、新药源寻找和资源开发利用、中药(民族药)质量评价等方面研究内容及实践成果。在未来的发展道路中,其将不断融合新知识、新技术,整理、总结药用植物研究开发经验技术,促进中药资源可持续利用和中医药传承创新。     

肉苁蓉药材市场调查及规格等级标准

肉苁蓉是我国常用补益类名贵药材,具有补肾阳、益精血、润肠通便等功效。同时,肉苁蓉(荒漠)还被国家卫生健康委员会列入既是食品又是中药材的物质名单,日常使用需求量大。市场上肉苁蓉分级混乱、标准不一,不同商品规格的肉苁蓉价格相差很多。通过对本草典籍、国家标准、行业标准及文献中肉苁蓉规格等级标准进行梳理及对各大药材市场的实际分级情况和商品价格进行调研,分析基原、产地因素、野生来源与人工种植、采收季节、生育期、生长年限和个体大小等与规格等级有关的因素对肉苁蓉药材质量的影响,提出了根据基原区分规格,以产地、生育期和个体大小划分等级的建议标准,以期为肉苁蓉商品规格等级的优化提供参考。     

Notch信号通路在糖尿病并发症中的研究进展

Notch是一种广泛存在于脊椎动物和非脊椎动物中高度保守的信号转导通路,它通过介导细胞间的关联而调节细胞生理和病理过程,包括细胞的增殖、分化和凋亡。研究发现,Notch通路的异常与糖尿病及其并发症有密切的关系,该文对Notch信号通路的分子基础及其异常表达与糖尿病之间的关系进行综述,重点探讨Notch信号通路及其关键分子对糖尿病并发症及其机制的影响。     

Triterpenoid saponins from <Emphasis Type="Italic">Clinopodium chinense</Emphasis> (Benth.) O. Kuntze and their biological activity

Four new ursane-type triterpenoid saponins, clinopoursaponins A–D (1–4), six new oleanane-type triterpenoid saponins, clinopodiside VII–XII (5–10), as well as eight known triterpene analogues (11–18), were isolated from the aerial parts of Clinopodium chinense (Benth.) O. Kuntze. The structures of the new compounds were determined based on extensive spectral analyses, including 1D (¹H and ¹³C) and 2D NMR experiments (COSY, NOESY, HSQC, 2D TOCSY, HSQC-TOCSY and HMBC), HR-ESI-MS and chemical methods. Compounds 1–18 were evaluated for their protective effects against anoxia/reoxygenation-induced apoptosis in H9c2 cells and cytotoxicities against murine mammary carcinoma cell line 4T1. Compounds 8, 9 and 18 exhibited significant protective effects, while compound 1 exhibited cytotoxic activity with IC₅₀ value of 7.4 μm compared to 7.6 μm for the positive control 10-hydroxycamptothecin.     

基于基因芯片技术研究生物黏附材料促进三七皂苷吸收的机制

目的 采用基因芯片技术研究3种生物黏附材料——壳聚糖、卡波姆和羟丙基甲基纤维素（HPMC）促进三七皂苷（PNS）吸收的机制。方法 将药物分为4组,分别是PNS组、PNS-壳聚糖组、PNS-卡波姆组和PNS-HPMC组,各组药物经Caco-2细胞转运后,通过基因芯片分析发生显著性变化的溶质运载蛋白（the solute carrier,SLC）和ABC家族转运蛋白（ATP-binding cassette transporters,ABC）基因,从而探索生物黏附材料对PNS吸收的影响机制。结果 与PNS组相比,壳聚糖和卡波姆均提高了SLC基因的表达水平。壳聚糖降低了多药耐药基因和P-gp外排基因的表达水平。HPMC对SLC和ABC两大蛋白家族基因表达无显著影响。结论 壳聚糖和卡波姆提高PNS的口服生物利用度与SLC和ABC转运蛋白有关。而HPMC对基因变化影响较小,其作用机制可能与延长吸收部位滞留时间有关。     

药载比对和厚朴酚-分枝状聚乙二醇聚合物G2纳米粒形态及体外抗肿瘤活性的影响

目的 采用分支状聚乙二醇化聚合物G2制备不同药载比的和厚朴酚（HK）纳米粒,考察其稳定性、体外释放及细胞毒等体外表征,以期丰富现有的纳米载药系统并筛选合适的药载比。方法 采用超声-蒸发法将有机相（HK和G2的丙酮溶液的混合相）缓慢注入到去离子水中,减压旋蒸除去有机溶剂即得HK-G2纳米粒（HK-G2-Nps）,分别制备药载比为1∶1、2∶1、4∶1、8∶1的纳米粒。利用马尔文粒度分析仪测定HK-G2-Nps粒径、Zeta电位及聚合物分散性指数（PDI）值;高效液相色谱（HPLC）法测定各药载比载药量;用扫描电镜观察其形态;动态膜透析法进行体外释药试验;以乳腺癌4T1细胞为模型用MTT法评价质量浓度为50.0、10.0、5.0、2.5、1.0、0.5、0.1 μg/mL的各药载比HK-G2-Nps细胞毒作用。结果 各药载比HK-G2-Nps的粒径分布较为集中,分散较为均匀;载体G2的用量影响HK-G2-Nps的粒径大小,随着药载比的增加,粒径逐渐减小,载药量提高。稳定性结果显示,纳米粒室温下放置稳定;纳米粒在0.9% NaCl中粒径明显增大,在5%葡萄糖溶液、PBS缓冲液和血浆中可稳定存在。电镜结果显示,药载比为1∶1时,纳米粒没有均一的形态;药载比为2∶1时,纳米粒呈现出不规则的类球状;药载比为4∶1时,呈现出规则均一的球形;药载比达到8∶1时,纳米粒呈现出明显的立方柱状形态同时存在不规则球状。体外释放试验结果显示,在前24 h,纳米粒能够迅速释放,药载比为4：1时累计释放最高,可达70%左右;24 h之后,4个药载比均缓慢释放至120 h,药载比1∶1和2∶1的累计释放率均在60%左右,药载比4∶1和8∶1的累计释放率可达80%、89%。HK-G2-Nps各药载比4T1细胞增殖抑制率均大于游离组HK,药载比为4∶1时作用最显著,其中质量浓度50.0、10.0、2.5、1.0、0.5、0.1 μg/mL显著高于HK组（P<0.05）,半数抑制浓度（IC₅₀）值为3.83 μg/mL。结论 成功筛选并制备药载比为4∶1的HK-G2-Nps,其对乳腺癌4T1细胞增殖抑制率大于HK。     

右归饮联合盐酸雷洛昔芬给药治疗小鼠骨质疏松症

目的 观察右归饮和盐酸雷洛昔芬联合给药对骨质疏松模型小鼠的治疗作用,并研究其作用机制。方法 将C57BL/6雌性小鼠切除卵巢制备骨质疏松模型,手术12周后将小鼠随机分为4组：模型组、右归饮（0.1 g/只）组、盐酸雷洛昔芬（10mg/kg）组和联合给药（右归饮0.1 g/只与盐酸雷洛昔芬10 mg/kg联合给药）组,另设假手术组,连续7周每天ig给药1次。给药结束后,将动物处死,Micro-CT测定骨密度和骨组织微形态,并测定骨形态计量指标——骨体积分数（BV/TV）、骨表面积/骨体积（BS/BV）、骨小梁的平均厚度（Tb.Th）、骨小梁数量（Tb.N）、骨小梁分离度（Tb.Sp）;试剂盒法测定血清中I型胶原氨基端（P1NP）、胶原羧基端（CTx）水平;分离并培养骨髓间充质干细胞,体外培养7 d,CCK-8法测定细胞增殖率,试剂盒法检测分化相关指标碱性磷酸酶（ALP）水平。结果 与模型组比较,右归饮组、盐酸雷洛昔芬组和联合给药组的骨密度、BV/TV、Tb.Th、Tb.N显著升高,BS/BV和Tb.Sp显著降低（P<0.05）;与盐酸雷洛昔芬组比较,联合给药组的BV/TV、Tb.Th、Tb.N显著升高,BS/BV和Tb.Sp显著降低（P<0.05）。联合给药组P1NP水平、细胞增殖率均显著高于其他各组（P<0.05、0.01）。ALP水平显著高于假手术组、模型组、盐酸雷洛昔芬组,显著低于右归饮组（P<0.01）。结论 在给药时间相同的前提下,右归饮和盐酸雷洛昔芬联合给药比单独给药更有效地抑制小鼠骨丢失,通过促进细胞的增殖和分化提高骨形成能力,达到增加骨密度、治疗骨质疏松的效果。     

三分枝六聚乙二醇接枝十二胺共聚物的合成及其性能研究

目的合成以三分枝六聚乙二醇为亲水部分、以十二胺为疏水部分的新型两亲性分子三分枝六聚乙二醇接枝十二胺共聚物(PGDA),并对其理化性质进行考察。方法通过苯磺酰化、取代反应、还原反应、酯化后形成酰胺5步反应合成了PGDA。使用核磁和质谱确定其结构和相对分子质量;芘荧光探针法测量其临界胶束浓度;并考察PGDA在水溶液中的形态、37℃稳定性。结果两亲性分子PGDA被成功合成。质谱实测相对分子质量与理论相对分子质量1 171.69吻合;该两亲性分子在水中很容易自组装成胶束,临界胶束浓度为75 mg/L;PGDA胶束37℃孵育24 h粒径无明显变化、稳定性良好。结论成功合成了三分枝六聚乙二醇为亲水部分和以十二胺为疏水部分的两亲性分子PGDA,其在水溶液中具有优良的胶束化行为,有望能作为一种药用辅料在难溶性药物的胶束等制剂中得到应用。     

西瑞香素纳米混悬剂的制备及其体外抗肿瘤作用研究

目的制备西瑞香素纳米混悬剂,并考察其对多种肿瘤细胞增殖的抑制作用。方法以粒径、Zeta电位、多分散性指数(PDI)为指标,考察稳定剂、药载比、超声温度、均质温度、均质次数对西瑞香素纳米混悬剂反溶剂沉淀法制备的影响,优化最佳处方和工艺条件。观察西瑞香素纳米混悬剂的透射电镜表征,并进行X射线衍射、差示扫描量热分析,考察其在血浆、PBS中的稳定性以及载药量、体外释放情况,采用MTT法比较其对BT474、SKBR-3、A549、He La、Hep G2细胞的体外细胞毒性。结果最佳处方和工艺条件:TPGS为稳定剂,药载比1∶1,共同溶解于DMSO中,在超声(25℃,250 W)条件下,缓慢滴注于去离子水中,透析除去有机溶剂,高压均质(25℃,150 MPa)20次,即得西瑞香素纳米混悬剂,其平均粒径为(163.1±5.4)nm,Zeta电位为(-11.4±0.7)m V,PDI为0.15±0.04。西瑞香素纳米混悬剂近乎为球形,大小较均匀;在血浆中稳定存在,不存在溶血现象,满足静脉注射需求,平均载药量为(39.16±1.09)%。西瑞香素纳米混悬剂对5种受试细胞的生长抑制作用显著提高,并呈现剂量相关性,尤其是对SKBR-3、A549、He La、Hep G2细胞,IC_(50)在2.1~3.4μg/m L。结论西瑞香素纳米混悬剂具有小粒径、高载药量、显著肿瘤细胞毒性等优点,在抗肿瘤研究方面具有良好的应用前景。     

Surface modification of doxorubicin-loaded nanoparticles based on polydopamine with pH-sensitive property for tumor targeting therapy

One major challenge of current surface modification of nanoparticles is the demand for chemical reactive polymeric layers, such modification is always complicated, inefficient, and may lead the polymer lose the ability to encapsulate drug. To overcome this limitation, we adopted a pH-sensitive platform using polydopamine (PDA) as a way of functionalizing nanoparticles (NPs) surfaces. All this method needed to be just a brief incubation in weak alkaline solution of dopamine, which was simple and applicable to a variety of polymer carriers regardless of their chemical reactivity. We successfully conjugated the doxorubicin (DOX)-PDA-poly (lactic-co-glycolic acid) (PLGA) NPs with two typical surface modifiers: folate (FA) and a peptide (Arg-Gly-Asp, RGD). The DOX-PDA-FA-NPs and DOX-PDA-RGD-NPs (targeting nanoparticles) were characterized by particle size, zeta potential, and surface morphology. They were quite stable in various physiological solutions and exhibited pH-sensitive property in drug release. Compared to DOX-NPs, the targeting nanoparticles possessed an excellent targeting ability against HeLa cells. In addition, the in vivo study demonstrated that targeting nanoparticles achieved a tumor inhibition rate over 70%, meanwhile prominently decreased the side effects of DOX and improve drug distribution in tumors. Our studies indicated that the DOX-PLGA-NPs modified with PDA and various functional ligands are promising nanocarriers for targeting tumor therapy.