牛蒡子提取物中牛蒡苷和牛蒡苷元的含量测定研究

目的建立牛蒡子提取物中牛蒡苷及其苷元的含量测定方法.方法采用HPLC,以牛蒡甘、牛蒡苷元为含量测定指标,测定了牛蒡了提取物中牛蒡苷和牛蒡苷元的含量.色谱柱为Kromasil C18 100A(150mm×4.6mm,51μm).流动相甲醇-水(采川梯度洗脱的方式0～7min,35%～45%甲醇;7～9[Bin,45%～48%甲醇;9～15min,48%～53%甲醇;15～24min,53%～80%甲醇;24～30min,80%～100%甲醇);检测波长为280nm.结果牛蒡苷及牛蒡苷元的平均回收率分别为97.7%,96.9%.RSD分别为1.3%,0.9%(n=5);线性方程分别为Y=782.6X-64.11(r=0.999 8).y=1 220.217X-35.26(r=0.999 8).结论该方法快速准确,可同时测定牛蒡提取物中牛蒡苷和牛蒡苷元的含量,可用作牛蒡子提取物的质量控制方法.     

HPLC测定止泻保童颗粒中盐酸小檗碱的含量

目的:为控制止泻保童颗粒的质量,考察了高效液相色谱法测定止泻保童颗粒中盐酸小檗碱的含量。方法:色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,柱温25℃,以甲醇-磷酸三乙胺水溶液(30∶70)为流动相,检测波长为350nm。结果:盐酸小檗碱的加样回收率为97.1%,RSD=1.69%。结论:该法快速、简便、准确为制剂的质量控制提供了可行的分析方法。     

龙胆总裂环环烯醚萜苷质量标准研究

目的：建立总裂环环烯醚萜苷（龙胆）的质量标准.方法：采用TLC（薄层色谱）法对提取物中的龙胆进行了定性鉴别;用紫外分光光度法测定了有效部位总裂环环烯醚萜苷的含量;用高效液相色谱法测定了龙胆苦苷的含量.结果：在TLC图谱中可检出龙胆的特征斑点;龙胆苦苷在7.187～35.94μg/ml间线性关系良好,r=0.9992,平均回收率为96.8%,RSD=1.06%（紫外分光光度法）;龙胆苦苷在0.8488μg～4.244μg间线性关系良好,r=.9997,平均回收率为97.3%,RSD=0.7%（高效液相色谱法）.结论：所建立的方法可行、重现性好,能有效地控制提取物中龙胆总裂环环烯醚萜苷的质量.     

Homodimerization of UDP-glucuronosyltransferase 2B7 (UGT2B7) and identification of a putative dimerization domain by protein homology modeling

Although homodimerization of UGT1A proteins is well established, direct evidence for dimerization of UGT2B7, which is arguably the most important enzyme involved in human drug glucuronidation, is currently lacking. This study characterized UGT2B7 homodimerization by co-immunopreciptation and generated a UGT2B7 homology model that identified the dimerization domain. It was demonstrated that co-expressed, solubilized UGT2B7 proteins differentially tagged with hemagglutinin (UGT2B7-HA) and c-MYC (UGT2B7-cMYC) co-immunoprecipitated as active homodimers that catalyzed 4-methylumbelliferone glucuronidation. Substrate binding affinities (assessed as S₅₀ values) of the tagged and co-expressed tagged proteins were essentially identical to that of native UGT2B7. Co-association was not observed in a ‘mixed’ UGT2B7-HA and UGT2B7-cMYC protein preparation. Generation of a UGT2B7 homology model established from plant and human templates was achieved using SYBYLX1.2 with all residues energy minimized using the Tripos Force Field. The UGT2B7 model allowed elucidation of a putative protein dimerization domain within the B′–C loop of each UGT2B7 monomer. The eighteen amino acid dimerization domain is present in all UGT2B enzymes and comprises a proposed dimerization signature motif (FPPSYVPVVMS). Stabilization of the dimer interface is maintained by the formation of two salt bridges, aromatic π–π stacking interactions, two S-aromatic (face) interactions, and the presence of ‘proline brackets’. The homology model further provides important insights into structure–function relationships of this enzyme and the mechanism responsible for the atypical glucuronidation kinetics for substrates of UGT2B7 and other human UGT enzymes.     

论中药炮制的“四新八化”

中药炮制“四新八化”主要是：新工艺、新辅料、新设备、新理论；来源基地化、工艺规范化、标准国际化、原理清晰化、辅料多样化、规格一致化、产用智能化、流通网络化。本文从中药炮制现代化着手，重点阐述了中药炮制“四新八化”的提出背景、演变过程和科学内涵。     

芫花药材的HPLC指纹图谱及ESI-MS分析

目的:建立芫花药材的质量评价方法。方法:采用HPLC-DAD对21批芫花药材的指纹图谱进行比较研究,并用HPLC-ESI-MS技术对部分共有峰进行了初步归属。结果:建立了以16个共有峰为特征指纹信息的芫花药材的HPLC指纹图谱,并通过MS技术初步鉴定出其中10个共有峰所对应的可能化学成分,共有峰主要为黄酮苷及其苷元类成分。结论:该方法可为芫花药材指纹图谱和质量分析方法的建立提供参考。     

大孔吸附树脂分离纯化芫花黄酮苷元工艺研究

目的:研究考察大孔吸附树脂用于芫花中2种主要黄酮苷元-芹菜素和芫花素的分离纯化效果。方法:采用静态和动态吸附法,利用高效液相对芹菜素和芫花素进行定量分析,筛选最佳分离纯化工艺。结果:最佳工艺条件为AB-8树脂,上样液的质量浓度0.1 g.mL-1,吸附流速2 BV.h-1,上样体积5 BV。再以9 BV 95%乙醇洗脱,洗脱流速2 BV.h-1,体积9 BV。经树脂处理后2种黄酮苷元纯度均达到20%以上。结论:大孔树脂对芫花中芹菜素和芫花素具有较好分离纯化效果,优选工艺操作简单、稳定可行。`     

LC-MS-MS法检测附子水提液中新乌头碱、次乌头碱的含量

目的:建立检测附子水提液中新乌头碱、次乌头碱两种双酯型生物碱含量测定的LC-MS-MS方法。方法:应用液质联用技术,Agilent ZORBAX C18 SB(2.1 mm×100 mm 1.8μm)色谱柱系统,流动相:A水(0.05%FA),B乙腈;采用梯度洗脱方法,A-B(72∶28),0～2 min,28%～34%B;2～6 min,34%～35%B;6～10 min,35%～100%B;流速0.35 mL·min-1;柱温40℃,正离子模式,MRM,新乌头碱m/z 632.3～572.3,次乌头碱m/z 616.3～556.2。建立了附子水提液中新乌头碱和次乌头碱的含量测定方法并进行了方法学验证。结果:建立了同时检测附子水提液中新乌头碱、次乌头碱的含量测定的LC-MS-MS方法。结论:方法准确、简便、快速,可用于附子水提液的质量控制。     

棓丙酯对大鼠 小鼠肠平滑肌运动的影响

目的：观察不同浓度棓丙酯对大鼠离体小肠收缩活动及小鼠在体小肠推进运动的影响。方法：采用大鼠离体肠管和小鼠小肠推进运动实验,考察棓丙酯对肠平滑肌运动的影响。结果：棓丙酯在10~80μmol/L浓度范围内剂量依赖性抑制大鼠离体小肠平滑肌收缩（P〈0.05,P〈0.01）,拮抗乙酰胆碱及组胺引起的促进收缩作用（P〈0.01）,且相加阿托品、槲皮素引起的抑制收缩作用（P〈0.01）。棓丙酯高剂量组（200mg/kg）、中剂量组（100mg/kg）对小鼠在体小肠推进运动有明显的抑制作用（P〈0.05,P〈0.01）。结论：棓丙酯对大鼠、小鼠肠平滑肌运动具有明显抑制作用。