异种肝移植手术前后移植肝差异表达基因的筛选及验证

目的探讨异种移植手术前后移植肝内差异表达基因的变化,并且进行筛选及验证。方法以α-1, 3-半乳糖苷转移酶基因敲除(GTKO)小型猪为供体、藏酋猴为受体,完成4例异种脾窝辅助性肝移植手术。于供肝修整时切取适量术前标本,于移植肝开放血流后48小时以肝穿刺活检获得术后标本。对手术前后的移植肝标本进行miRNAs和mRNAs的高通量芯片分析,筛选出关键的差异表达miRNAs和m RNAs,并进行实时定量PCR及Western Blot实验验证。结果与术前相比,有165个miRNAs在术后出现差异表达,其中上调分子112个,下调分子53个。筛选并验证mi-23b等12个出现显著差异表达的miRNAs,除miR-150和miR-126-3p外,其他miRNAs的表达变化情况与miRNAs芯片结果基本相符。与术前相比,有2 035个mRNAs在术后出现显著差异表达,其中922个表达上调、1 113个表达下调,筛选IGFBP6、CDK2AP1、TNFAIP6、FⅦ、NKG2D等5个生物学功能与肝脏移植密切相关的差异表达基因进行m RNA和蛋白水平验证。除NKG2D外,其他4个基因的蛋白水平表达变化与mRNA水平变化基本一致(均P <0.05),但CDK2AP1的蛋白变化幅度较小,差异无统计学差异(P=0.073)。结论异种肝移植术后移植肝的miRNAs和mRNAs表达出现较大变化,这些差异表达基因可能与免疫损伤及凝血功能障碍有关。     

两种注射用盐酸尼非卡兰在Beagle犬体内的药动学比较

目的 比较两种注射用盐酸尼非卡兰在Beagle犬体内的药动学特征.方法 采用随机、交叉、自身对照的试验设计,将18只Beagle犬分别先后单次静脉注射两种盐酸尼非卡兰3.125 mg·kg-1,用HPLC法测定其血药浓度,用WinNonLin 6.3软件计算药动学参数并进行比较.结果 分别先后单次静脉注射相同剂量的盐酸尼非卡兰供试和参比制剂3.125 mg·kg-1后,犬血浆中尼非卡兰的AUC0→t分别为118.01±15.74、116.39 +47.66 μg·mL-1 ·min,AUC0-∞分别为119.84±15.40、118.50±46.80 μg· mL-·min,Cmax分别为5.31±2.28、4.45±2.27 μg· mL-1,Tmax分别为1.67±1.63、1.00 min,t1/2分别为34.90±4.53、34.76±9.77 min.结论 两种注射用盐酸尼非卡兰在Beagle犬体内的药动学过程无显著差异.     

不同剂量右美托咪定对兔脊髓的神经毒性

目的观察不同剂量右美托咪定复合0.75%布比卡因硬膜外镇痛的神经毒性作用。方法选择硬膜外置管成功后的健康家兔25只,雌雄不拘,重2.0~3.0kg,随机均分为五组。对照组(C组):生理盐水1.5ml;B组:0.75%布比卡因1 ml+生理盐水0.5 ml;D1、D2、D3组0.75%布比卡因1ml+右美托咪定0.1、0.2、0.4μg/kg。硬膜外连续给药3d,继续观察至第7天处死家兔,作光镜和电镜检查。结果电镜下各组兔脊髓均未见破坏性病变。光镜下D2组有1只,D3组有2只兔的脊髓病变较严重,灰质和白质分界不清,脊髓灰质坏死,神经细胞减少。结论硬膜外给予右美托咪定对兔脊髓和脊神经存在剂量相关性损伤,但本研究剂量硬膜外注药后兔下肢运动功能可完全恢复。     

人工饲养三种猕猴属实验动物生理指标初步测定

目的:测定并比较人工饲养条件下三种猕猴属实验动物的生理指标,为实验动物研究与应用提供参考数据。方法:分组测量人工繁育的藏酋猴(Macaca thibetana)23(♂21,♀2)只,恒河猴(Macacus Rhesus)10(♂9,♀1)只,食蟹猴(Macacafascicularis)10(♂5,♀5)只,各自的体重、身长、腿长、臂长、尾长、胸围、腹围、呼吸频率等生理指标,使用SPSS17.0软件进行统计分析,比较各组间的差异。结果:三种猴随年龄增大,体重、胸围和腹围增大,尾长差异显著(P<0.001),藏酋猴性格平静,呼吸频率低于恒河猴和食蟹猴(P<0.001),其它几项测量无显著差异(P>0.05)。结论:灵长类猕猴属的同属动物生物学特性有极高一致性,也存在差异性。     

尼莫地平注射液对线栓法致大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型脑组织形态学的影响研究

目的:研究尼莫地平注射液对线栓法致大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型脑组织形态学及尼氏小体的影响。方法:应用经典的线栓法阻塞大鼠大脑中动脉(MCAO),2 h后适当抽出线栓进行再灌注。脑缺血后第0、244、7 h时,经静脉给予尼莫地平注射液(1.0 mg.kg-1.d-1),并观察动物的神经行为学、脑梗死比率(TTC染色法)、脑组织形态学和尼氏小体数量。结果:尼莫地平注射液能够明显改善MCAO模型大鼠脑缺血24~48 h时的神经功能缺失体征,可使模型动物的脑梗死比率由18.32%降低至9.29%,能改善脑组织形态学病变和增加海马区神经元胞浆内的尼氏小体数目。结论:尼莫地平注射液对脑缺血急性期严重的脑组织形态学病变有改善作用,对神经细胞有保护作用,进而对脑梗死后的神经功能康复有促进作用。     

白术茯苓汤不同配比对脾虚型克罗恩病大鼠血清TNF-α和IL-10水平的影响

目的:考察白术茯苓汤不同配比对脾虚型克罗恩病(Crohn’s disease,CD)大鼠血清细胞因子的影响;初步探讨该方治疗脾虚CD的免疫学机理。方法:采用破气耗气加饥饱失常之复因脾虚造模法结合Morris方法复制脾虚型CD动物模型,白术茯苓汤不同配比灌胃给药,酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-10(IL-10)含量。结果:与空白组相比,模型组TNF-α升高、IL-10降低(P<0.05);与模型组比较,B5组(白术∶茯苓=12∶15)、B6组(白术∶茯苓=15∶12)、B7组(白术∶茯苓=18∶9)TNF-α降低(P﹤0.05);B6组(白术∶茯苓=15∶12)IL-10升高(P﹤0.05)。结论:白术茯苓汤不同配比对脾虚型CD的细胞因子影响有异;其中以B6组对脾虚型CD大鼠血清TNF-α、IL-10作用较为显著。     

藏酋猴类似人clock基因片段的克隆

目的：在藏酋猴中,寻找和克隆与人clock基因类似的基因。方法：提取藏酋猴外周血白细胞RNA,逆转录为全基因组eDNA,利用人clock基因保守序列设计相关引物,克隆,测序,进行生物信息学分析。结果：扩增得到1994bp的核酸序列。该序列与人,苏门答腊猩猩,绵羊,小鼠,褐家鼠,原鸡和蟾蜍clock基因核酸序列同源性分别为99％,98％,94％,90％,90％,82％和75％。结论：藏酋猴基因组中存在与人clock基因相似的基因,该基因可能为藏酋猴clock基因。     

基于TLR4/MyD88/NF-κB通路研究愈疡胶囊抗中耳炎的作用

目的构建肺炎链球菌诱导大鼠中耳炎(OM)模型,探讨愈疡胶囊延缓OM炎的作用与机制。方法体外抑菌实验测定愈疡胶囊对肺炎链球菌的最低抑菌质量浓度(MIC)与最低杀菌质量浓度(MBC)。将50只大鼠均分为模型组、阳性对照组(左氧氟沙星20 mg·kg~(-1))以及愈疡胶囊高、中、低剂量组(600,300,150 mg·kg~(-1)),每组10只。采用鼓室内注射菌液构建模型,灌胃给药,每日1次(20 mL·kg~(-1))。第7天和第14天观察鼓膜情况并收集眼眶静脉血,使用Elisa法检测血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、免疫球蛋白A(IgA)和免疫球蛋白G(IgG)的含量。第14天后处死大鼠,采集中耳鼓室,使用HE染色与扫描电镜观察鼓室黏膜,用Western Blot法检测鼓室Toll-样受体4(TLR4)、髓样分化蛋白-88(MyD88)和磷酸化核因子-κB(p-NF-κB)的含量。结果体外MIC与MBC分别为12.5,25.0 g·L~(-1);与模型组相比,愈疡胶囊高剂量组大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、IgA和IgG含量均降低,TLR4、MyD88与p-NF-κB蛋白含量均降低(P<0.05),鼓膜观察、HE染色与电镜观察均显示细菌感染情况减轻。结论愈疡胶囊对大鼠细菌感染OM具有抑菌抗炎作用,主要表现为减少炎症与免疫反应,其机制可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路相关。     

四川省居民口腔健康和知识行为现状调查

目的 了解2013年四川省居民口腔健康和知识行为现状.方法 采用文献复习、专家咨询、问卷调查等方法了解四川省居民口腔健康和知识于为现状,采用SPSS22.0软件对数据进行分析.结果 3个年龄组别的不同地区居民的最近3年口腔体检率、刷牙率、洁牙率、口腔就诊率和口腔保健知识认知率差异均有统计学意义(P＜0.05);不同性别上述指标差异无统计学意义(P＞0.05);随年龄增长,刷牙率降低、涂氟率降低,但口腔体检率、就诊率及最近1年口腔就诊需求率均升高.结论 4个调查区居民的口腔健康状况堪忧,老年人群口腔健康状况差,居民口腔保健知识认知还有待加强.