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目的建立测定大鼠肝微粒体孵育液中海兔素含量的高效液相色谱法(HPLC),研究海兔素在大鼠肝微粒体中代谢的酶动力学以及CYP3A特异性抑制剂酮康唑对其代谢反应的影响。方法考察不同孵育时间、肝微粒体蛋白浓度、海兔素浓度对代谢反应的影响,并采用双倒数作图法计算海兔素的酶促反应动力学参数;观察不同浓度酮康唑(0.5,2,5,10,20,40 mg/L)对海兔素体外代谢的影响。结果海兔素的标准曲线线性范围为0.5~100 mg/L,线性关系良好,日内、日间精密度均小于3.18%,提取回收率在96.19%~97.83%,室温24 h和﹣20℃冷冻一周稳定性良好;海兔素在大鼠肝微粒体中代谢的最佳温孵时间为30 min、最佳蛋白浓度为1 mg/ml,并确定了酶动力学参数,Km为19.72 mg/L、Vmax为0.35 mg/(min·g)Protein、CLint为17.75 ml/(min·g)Protein;CYP3A的特异性抑制剂酮康唑能够明显抑制海兔素的体外代谢。结论该检测方法简单、快速、专属性和灵敏度高,适用于海兔素在大鼠肝微粒体中的酶促反应动力学研究,并推测CYP3A可能参与海兔素的体外代谢。 相似文献
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Li DT Li FY Wang J Liu JH Yan N Cheng YM Hu AH Jiang HY Shi FL Zhang MZ Li J Wei LB Jiang RQ 《中西医结合学报》2011,9(12):1326-1332
目的:建立骨质疏松症常见中医证候诊断规范。方法:应用文献整理、临床调查、专家研讨等方法,建立骨质疏松症常见中医证候诊断规范草案,将诊断规范的辨证结果与专家经验辨证进行对照验证,根据临床验证结果对诊断规范进行反复修订,逐步完善。结果:初步建立了骨质疏松症常见中医证候诊断规范,包括定性与定位证候诊断两个部分。定性诊断包括精亏、气虚、阴虚、阳虚、血瘀,共5种定性证候;定位证候诊断其病在骨,其脏在肾,涉及肝、肺、脾(胃)、心。确立了各证候诊断的特异性症状与非特异性症状,并设定了满足诊断的条件。临床验证结果显示:用该诊断规范辨证的结果与专家辨证结果对照,定性诊断符合率为80.56%,定位诊断符合率为85.56%。结论:骨质疏松症中医常见证候诊断规范基本符合中医临床实际,值得在临床上进一步推广应用。 相似文献
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