环氧氯丙烷对组织工程心脏瓣膜构建中MMP-9表达的影响

目的探讨环氧氯丙烷对组织工程心脏瓣膜构建中基质金属蛋白酶-9(Matrix metalloproteinase-9;MMP-9)表达的影响。方法采用去垢剂和胰蛋白酶消化制备脱细胞猪主动脉瓣膜支架,用3%环氧氯丙烷处理48h的去细胞支架材料作为实验组;用0.2%戊二醛处理48h的去细胞支架材料作为对照组。将培养的人骨髓基质干细胞(human bone marrow mesenchy-mal stem cells;hBMSCs)种植于脱细胞支架上构建组织工程心脏瓣膜(tissue engineered heart valves;TEHV),分别行石蜡包埋切片HE染色和扫描电镜观察TEHV的组织结构,免疫组化检测MMP-9表达的阳性率。结果hBMSCs在实验组脱细胞瓣膜表面生长良好,MMP-9的表达比对照组降低。结论环氧氯丙烷处理的脱细胞猪主动脉瓣膜支架,可以抑制hBMSCs的MMP-9表达,对防止组织工程心脏瓣膜钙化的形成有一定作用。     

特异性siRNA抑制宫颈癌细胞中HPV16 E7基因的表达

目的:用真核表达siRNA干扰技术特异性抑制宫颈癌细胞CaSKi中HPV16 E7癌基因的表达.方法:运用DNA重组技术构建表达特异性siRNA的 pGenesil-1/E7(PS7)重组质粒,用脂质体分别将重组质粒转染宫颈癌细胞系CaSKi细胞内,通过半定量RT-PCR 实验检测CaSKi/PS7细胞中E7 mRNA水平的变化;再用western blotting检测 CaSKi/PS7细胞中E7蛋白、磷酸化pRb 和去磷酸化Rb的表达;用免疫细胞化学法检测细胞中ki-67、NF-κB 、bcl-2和p16的表达.结果:成功构建了真核细胞表达的、特异性siRNA的PSN 和PS7重组质粒.在RNA干扰24、48和72小时后 CaSKi/PS7细胞中E7 mRNA分别下降了21.05%、 51.80%和49.10%;RNA干扰后的CaSKi/PS7细胞中E7蛋白的表达逐渐减低,而且磷酸化pRb表达降低和去磷酸化Rb 的表达升高;与CaSKi/PSN细胞相比,CaSKi/PS7细胞中的ki-67、NF-κB 和bcl-2表达降低,而p16的表达增加.结论:本研究成功构建了真核细胞体内表达特异性siRNA重组体,有效地抑制了宫颈癌细胞CaSKi中HPV16 E7基因的表达,为RNA干扰应用于研究宫颈癌发病分子机制提供了新的资料和方法.     

下胫腓联合分离固定数字化导向模板的设计及其初步临床应用

目的 利用数字化三维重建与逆向工程技术设计、制备下胫腓联合损伤固定数字化导向模板,并在临床初步应用.方法 自2006年1月~2009年1月,选择5例不合并腓骨骨折的下胫腓联合分离患者,进行双踝关节连续CT扫描,将原始数据导入Mimics软件,三维重建下胫腓联合模型,以STL格式保存,导入Imageware10.0软件,定位三维参考平面,利用RE原理、以AO内固定原则为基础设计下胫腓联合固定螺钉的最佳进钉钉道,提取腓骨的表面解剖学形态及钉道模型,建立与其解剖学形态一致的数字化虚拟模板.通过激光RP技术生产出实物模板.手术时首先复位下下胫腓联合,将模板准确贴于患侧腓骨远端外侧,利用模板上预先制备的导向孔进行定位和置人螺钉.结果 建立了下胫腓联合数字化模型以及制作个体化导航模板的方法,制备出的导向模板具有较好的匹配性,适用于下胫腓联合的固定,在临床初步应用中显示了良好的效果.结论 采用数字化三维重建及逆向工程技术制备的固定导向模板下胫腓联合分离的固定提供了一种新的方法,具有一定的临床应用价值.

Abstract：

Objective To design and prepare a new digitalized navigation template for fixation of inferior tibiofibular joint using three-dimensional reconstruction and reverse engineering techniques.Methods Five patients with inferior tibiofibular joint rupture without fibula fracture underwent three-dimensional CT scanning of the lower limbs.The image data were transferred into Mimics software,and after reconstruction of the three-dimensional models of inferior tibiofibular joint rupture and saving in stl format,the three-dimensional models were imported into Imageware10.0 software to determine the three-dimensional plane of reference.The location of the optimal pedicle channel was defined using reverse engineering and AO internal fixation principle.The template was designed according to the anatomic features of the fibular surface,and the optimal pedicle channel and the template were overlapped as the navigational template,which was manufactured by rapid prototyping.The inferior tibiofibular joint was reduced and the template was placed distally on the external fibula,and the location for screw insertion was defined by the navigation template.Results and Conclusion The digitalized model of the inferior tibiofibular joint was established.The navigation template manufactured offered good compatibility and was applied successfully for fixation of the inferior tibiofibular joint.This approach provides a new means for fixation of ruptured inferior tibiofibularjoint using the reverse engineering and digitized 3-dimensional reconstruction techniques.     

犬牙周膜干细胞体外分离培养和鉴定的实验研究

目的体外分离培养犬牙周膜干细胞,并对其进行生物学鉴定。方法采用有限稀释法进行犬牙周膜细胞克隆筛选,获得单细胞克隆来源细胞,检测其克隆形成率,并采用免疫组织化学染色、碱性磷酸酶染色、苏木精-伊红染色以及生长因子分化诱导等方法观察其生物学特性。结果1）克隆化分离培养的犬牙周膜干细胞呈集落状生长,增殖快,克隆形成率为0.95％。2）苏木精-伊红染色见细胞呈成纤维样,体积小、核大,有较多的双核细胞。3）碱性磷酸酶染色阳性。4）细胞表型组化鉴定波形丝蛋白、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原阳性,间充质干细胞表面标志STRO-1染色阳性,角蛋白染色阴性。5）在含β-磷酸甘油钠、维生素C、地塞米松的矿化液中,细胞被诱导分化为成骨细胞,碱性磷酸酶活性增强,Ⅲ型胶原染色阴性,能形成矿化结节,细胞表达成骨细胞特异的骨涎蛋白,在含β-羟基乙醇的培养液中,被诱导分化为神经细胞样细胞。结论克隆化分离培养的犬牙周膜干细胞具有很强的克隆形成能力,具有间充质干细胞表型和多向分化潜能。     

肿瘤坏死因子在胆囊癌及结石组织中的表达

摘要:目的:研究从胆囊粘膜典型增生到胆囊癌的发展过程中肿瘤坏死因子( TNF) 的表达,进一步探讨它们在胆囊癌发生、发展中的意义。方法:用原位杂交及免疫组织化学方法检测胆囊结石引起的粘膜典型增生、非典型增生及胆囊癌的TNFmRNA、TNF 蛋白的表达。结果: ①TNFmRNA 在胆囊粘膜典型增生、非典型增生及胆囊癌组织上皮细胞或癌细胞和单个核细胞(MNC) 的阳性表达率及表达细胞数目均逐级增高。②在胆囊癌组织中,癌细胞及MNC 表达TNFmRNA 的细胞表达数目随肿瘤进展而增多(P < 0. 01) 。③TNF 蛋白与TNFmRNA 表达区域相似,阳性表达率较高。④癌细胞和MNC 的TNFmRNA及蛋白表达均呈正直线相关。结论: TNF 参与了胆囊结石致癌的发病过程,并与胆囊癌的进展有关。     

延安市居民口腔卫生观念及行为现状调查和发展对策

了解延安市居民的口腔卫生观念和行为,以据此制定健康教育策略。方法在延安市属１２县、１区、１矿对４５４０名居民进行问卷调查。结果各人群和刷牙率最高在９０％以上。４９％的被调查认为刷牙的目的是预防龋齿和牙周病,４４．５％用含氟牙膏。仅２．７４％－１１．２３％认为有必要定期接受口腔检查。结论口腔健康教育的重点人群应是儿童及老人。建立及加强三级保健网是农村地区改进口腔卫生的基础。学校健康教育课和“爱牙日     

推广QT离散度在识别可能猝死的高血压并发心脏病中的应用

为了推广QT离散度在识别可能猝死的高血压并发心脏病中的应用,以便及时给予保护性治疗措施以降低严重性心律失常的危险性,降低猝死率,选择本院内科的原发性高血压病并发心脏病变的患者36例,其中男24例,女12例,年龄31～75(47.5±10.7)岁,均符合WHO高血压诊断标准和分期,并未经降压治疗或停服降压药2周。采用HP-PW型计算机心电综合诊断系统,同步记录体表常规12导联心电图。诊断标准为:QTd<50ms正常,50～65ms可疑,>65ms异常。将左室肥厚18例,心肌缺血10例和急性心梗8例分为3组,分别进行R-R,QTmax,QTmin,QTd,QTcd的测定,结果三组R-R,Q…     

冠状动脉疾病患者血清胱抑素C水平变化及意义

冠状动脉疾病（CAD）是严重威胁人类生命健康的疾病,它的主要病理组织学基础是冠状动脉粥样硬化,由于其病理变化进展缓慢,至今尚缺乏敏感而特异的实验室早期诊断指标。有研究表明组织蛋白酶和其抑制物胱氨酸蛋白酶抑制剂C（CysC）的表达失衡是动脉粥样硬化发生与发展的重要原因,提示CysC在血管损害中起重要作用。以往的研究多集中于CysC对肾功能的评价,近年来,CysC在心血管疾病发生、发展中的作用已引起了越来越多的重视。现对血清CysC水平进行初步研究,以探讨CysC在冠状动脉疾病中的变化以及可能的作用和意义。     

EB病毒在儿童腺样体肥大和扁桃体炎组织内的定量研究及意义

目的:探讨EB病毒在儿童慢性扁桃体炎、腺样体肥大中的流行病学特点及其在儿童腺样体肥大、慢性扁桃体炎疾病发病机制中的作用.方法:采用实时荧光定量PCR技术对52例慢性扁桃体炎、腺样体肥大患儿手术摘除的腺样体、扁桃体组织及血浆标本进行EB病毒定量检测.结果:患有慢性扁桃体炎和(或)腺样体肥大的儿童扁桃体、腺样体组织中EB病毒感染率为51.9%;其中男性患儿EB病毒感染率为50.0%,女性患儿为55.6%,两者差异无统计学意义(P＞0.05).扁桃体组织EB病毒感染率为40.4%,腺样体组织为48.9%,差异无统计学意义(P＞0.05).学龄组(7～14岁)患儿扁桃体和腺样体组织EB病毒感染率为65.5%,明显高于学龄前组(2～6岁)患儿的感染率(34.8%).比较轻、中、重度肥大的腺样体组织中EB病毒-DNA拷贝数发现:重度肥大组EB病毒-DNA拷贝数明显高于其他两组(P＜0.05).52例患儿血浆标本检测发现:EB病毒-DNA拷贝数均在正常范围内(＜1×10~3 copies/ml).结论:腺样体肥大组织与慢性扁桃体炎组织对EB病毒有相同的易感性,男、女性患儿的扁桃体和腺样体组织对EB病毒易感性基本相同,且随着患儿年龄的增长、病程的延长,EB病毒的感染率也会相应增高.腺样体的增生、肥大与EB病毒的感染有一定相关性.     

维生素D受体在手足口病患儿中的表达及其临床意义

目的:检测维生素D受体(VDR)在手足口病(HFMD)患儿中的表达水平,探索其在HFMD患儿诊治中的潜在价值。方法:选取西安交通大学第二附属医院和西安市儿童医院2017年5月至2019年5月收治住院的HFMD患儿共82例作为病例组,同时随机选取同期儿童保健科体检的健康儿童42例作为对照组,抽取两组儿童外周血,检测并比较...