白血病细胞早幼粒细胞白血病(PML)蛋白存在形式的检测和临床意义北大核心CSCD

目的研究早幼粒细胞白血病(PML)蛋白在急性早幼粒细胞白血病(APL)不同阶段存在形式,探讨全反式维甲酸(ATRA)、砷剂、化疗药物对PML蛋白存在形式的影响。方法收集42例APL的骨髓细胞和白血病NB4、MR2细胞,采用1μmol/L三氧化二砷(As_2O_3)、1μmol/L四硫化四砷(As_4S_4)、1μmol/L ATRA、10 mg/L阿糖胞苷、1 mg/L高三尖杉酯碱处理,采用间接免疫荧光法,检测处理前后细胞PML荧光信号变化。结果 APL初发病例87.5%表现为小荧光信号(细胞核内密布满天星般荧光亮点,多于30个/细胞),完全缓解病例91.67%表现为大荧光信号(细胞核内有较大的荧光亮点,少于30个/细胞),复发病例中83.33%表现为小荧光信号;与未加药组相比,ARTA组、As_2O_3组、As_4S_4组能使初发患者APL细胞的PML蛋白表达由小荧光信号转变为大荧光信号,阿糖胞苷组、高三尖杉酯碱组则无明显影响;ARTA能使NB4细胞PML蛋白表达由小荧光信号转变为大荧光信号,而不能改变MR2细胞PML蛋白表达的小荧光信号,As2O3和As4S4能使NB4、MR2细胞PML蛋白表达由小荧光信号转变为大荧光信号。结论检测APL细胞PML蛋白存在形式对APL预后判断及合理药物选择具有实际应用价值。     

白血病细胞中NF-κB调控MDR1基因、P糖蛋白及逆转耐药的研究

本研究探讨NF-κB调控的血液肿瘤细胞抗凋亡机制中是否有mdr1的参与,并通过对NF-κB的抑制希望获得血液肿瘤的耐药逆转,为难治性白血病的治疗探索一条新的道路。取不同终浓度的NF-κB抑制剂PDTC作用的,或者同一浓度作用不同时间后的K562/A02细胞,分别用免疫组织化学加计算机图像分析仪方法半定量检测每1份样本中NF-κB的活性和P-gp的表达,以及用反转录多聚酶链反应方法半定量检测每2份样本中mdr1的活性,通过统计学来分析mdr1、P-gp的表达是否与NF-κB的活化有关。结果表明:随着NF-κB抑制剂PDTC作用浓度的不断升高、作用时间的不断延长,K562/A02细胞NF-κB/p65的表达不断降低,P-gp和mdr1mRNA的表达也逐渐降低,而且三因子之间均有显著相关性。结论:通过对K562/A02细胞高表达的NF-κB的抑制可降低该细胞的mdr1mRNA和P-gp的表达,从而提高血液肿瘤细胞的放化疗敏感性。     

hOCT1基因多态性与伊马替尼治疗慢性粒细胞白血病疗效关系的研究

CT1基因P283L、R287G和M408V位点的多态性与CML患者伊马替尼继发耐药无相关性.     

异基因造血干细胞移植中回输造血干细胞的量和回输时受者白细胞数与疾病预后关系分析

本研究旨在探讨异基因造血干细胞移植中造血干细胞的回输量和回输时受者白细胞数与疾病预后关系。回顾性分析西安交通大学医学院第一附属医院血液科收治的37例异基因造血干细胞移植患者的临床资料,按照回输时受者白细胞数分为粒细胞缺乏组和非粒细胞缺乏组,比较两组患者移植后造血重建、移植物抗宿主病（GVHD）、移植后复发及死亡的发生情况;按照回输的单个核细胞数（MNC）及CD34阳性细胞数的中位数,将患者分为高剂量组和低剂量组,比较不同剂量组患者移植后造血重建、GVHD、移植后复发及死亡的发生情况。结果表明,回输时受者为非粒细胞缺乏者造血重建快于粒细胞缺乏者;高剂量MNC组造血重建快于低剂量MNC组;CD34阳性细胞计数高剂量组与低剂量组之间造血重建无统计学显著差异。高剂量MNC组和非粒细胞缺乏组GVHD发生率高（P〈0．05）。不同回输造血干细胞量及回输时白细胞数组间复发及死亡率间无统计学显著差异。结论：异基因造血干细胞移植中MNC计数和回输时受者白细胞数与造血重建相关;高剂量MNC组和非粒细胞缺乏组GVHD发生率高：回输造血干细胞的量与回输时受者白细胞数与疾病的复发及死亡无显著关系。     

TLR4与小鼠半相合造血干细胞移植后急性GVHD关系的实验研究

目的:探讨Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)对半相合造血干细胞移植(HSCT)小鼠急性移植物抗宿主病(acute graft-versus-host disease,a-GVHD)的影响及其可能机制?方法:建立小鼠半相合HSCT模型,随机分为分为实验1组(n=12):每只小鼠按20 μg/kg输注TLR4激动剂-脂多糖(LPS);实验2组(n=12):每只小鼠按20 μg/kg 输注TLR4单克隆抗体;对照组(n=12):其中6只小鼠按20 μg/kg 输注灭菌生理盐水,另6只半相合HSCT 移植后不作任何处理?观察各组小鼠的a-GVHD临床表现及生存时间,检测小鼠血清中白细胞介素-1β(IL-1β)?肿瘤坏死因子-α(TNF-α)变化情况,并于移植后14 d对小鼠肝脏进行病理分析?结果:与对照组相比较,实验2组的GVHD严重程度?生存率以及病理改变均明显轻于对照组(P < 0.05),而实验1组的上述改变则明显较对照组为重?结论:针对TLR4的抑制剂对半相合HSCT小鼠的a-GVHD具有一定的预防作用?     

构建雄黄诱导维甲酸耐药急性早幼粒细胞白血病NB4-R1细胞凋亡的蛋白质双向电泳图谱

目的 构建雄黄（四硫化四砷, tetra-arsenic tetra-sulfide, As4S4）诱导急性早幼粒细胞白?。ˋPL)维甲酸耐药细胞株NB4-R1细胞凋亡前后的差异蛋白质组表达谱。     

腹水中exosomes的分离和鉴定

目的:从卵巢癌患者腹水中分离exosomes,鉴定其来源及分子表型。方法:用多步离心和超滤等方法从腹水中分离exosomes,分别用免疫电镜和Westernblot检测Hsc73、MHCⅠ类和MHCⅡ类分子的表达。腹水中分离的卵巢癌细胞为阳性对照。结果:从卵巢癌患者腹水中分离的exosomes,其形态为圆形或椭圆形小囊泡,直径约30~90nm;经免疫电镜检测,exosomes有Hsc73和MHCⅠ类分子的金颗粒附着,而MHCⅡ类分子为阴性表达。经Westernblot证实,exosomes表达Hsc73和MHCⅠ类分子,但MHCⅡ类分子表达阴性。结论:经过多步离心、超滤等方法从卵巢癌患者腹水中分离的exosomes来源于卵巢癌细胞,为卵巢癌免疫治疗奠定了基础。     

三氧化二砷对血管内皮细胞增殖和周期的影响

目的:观察As2O3对血管内皮细胞增殖、凋亡和细胞周期的干扰,探讨As2O3对血管内皮细胞生长的直接影响。方法:血管内皮细胞EVC-304体外培养,As2O3干预。采用MTT测定细胞活性,流式细胞仪测定细胞周期、细胞凋亡。结果:ECV-304细胞经过As2O3干预,其存活率明显降低,并且呈剂量依赖性。As2O3干预后,进入S期的细胞减少,细胞周期被阻在G1期,细胞可能在G1期进入凋亡。As2O3诱导早期凋亡是对照组的2.88～5.1倍,并且呈剂量依赖性;其晚期凋亡是对照组的1.17～1.67倍。结论:As2O3可直接干扰血管内皮细胞的细胞周期,阻滞细胞在G1期,并诱导细胞凋亡,进而抑制血管内皮细胞的增殖。     

骨髓活检在多发性骨髓瘤诊断中的价值

目的:探讨骨髓活检在多发性骨髓瘤(MM)诊断中的价值.方法:同步观察多发性骨髓瘤26例患者骨髓涂片和活检塑料包埋切片.观察骨髓增生程度、浆细胞增殖模式及浸润程度.结果:MM患者骨髓造血组织在切片中的增生度明显高于涂片,两者差异有统计学意义(P<0.05).MM切片中浆细胞以簇片-间质型、结节-间质型、结节型及塞实型浸润为主,以结节出现为阳性诊断标准,其敏感性25例(96.1%) 明显高于涂片中浆细胞>15%的指标(76.9%).结论:骨髓活检能准确反映骨髓组织的增生程度、浆细胞浸润情况及增殖模式,对MM的诊断有重要价值.     

自体骨髓混合HLA半相合异基因骨髓移植治疗急性白血病

 目的 观察自体骨髓混合HLA半相合异基因骨髓移植治疗急性白血病的疗效及移植相关并发症。方法 对7例急性白血病患者先实施经液体培养（与IL-2共孵育,1 000 U／ml骨髓血）和微波照射法体外净化的自体骨髓移植,2 ~ 5 d后输注一定量HLA半相合同胞兄妹的异基因骨髓。结果 中性粒细胞和血小板恢复的平均时间为+27 d和+29 d,3例发生Ⅲ~ Ⅳ度急性移植物抗宿主病（aGVHD）并死亡,其中1例并发肝静脉闭塞症。另外4例发生Ⅱ度aGVHD,HLA基因检测和（或）性染色体分析均呈混合嵌合现象并持续半年左右,这4例长期无病存活时间分别117,106,101,85个月,5年无病生存4例。结论 混合骨髓移植具有疗效好、复发率低、患者可获长期生存及相对安全可行等特点,但仍有必要进一步优化同／异基因骨髓细胞的比例及植入时机,并采取一定程度的移植物抗宿主病（GVHD）预防措施。