SARS-CoV-2核衣壳蛋白的生物信息学分析、纯化及多克隆抗体制备

目的分析新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核衣壳(N)蛋白的生物学性质、纯化及多克隆抗体制备。 方法NCBI检索感染人的冠状病毒N蛋白氨基酸序列,采用Clustal Omega软件对其进行序列比对。利用SOPMA软件预测SARS-CoV-2 N蛋白的二级结构；应用Pondr和IUPred软件预测SARS-CoV-2 N蛋白的固有无序结构域；运用MoRFchib软件预测SARS-CoV-2 N蛋白的分子识别特征序列；利用IEDB网络分析其B细胞表位。纯化的N蛋白免疫BALB/c小鼠,分离小鼠血清,制备多克隆抗体；ELISA法测定血清中多克隆抗体滴度；MTT法检测N蛋白刺激小鼠脾细胞增殖情况。 结果SARS-CoV-2 N蛋白与SARS-CoV N蛋白的同源性高于97%。N蛋白二级结构的无规卷曲占55.13%,α螺旋占21.24%,β折叠占16.71%,β转角占6.92%。N蛋白含有大量固有无序样结构,具有4个分子识别特征序列和11个线性B细胞表位。全长为51.5 kDa N蛋白可诱导BALB/c小鼠分泌高滴度抗体,并能导致淋巴细胞增殖。 结论SARS-CoV-2 N蛋白含有大量固有无序结构域并获得了高滴度多克隆抗体。     

miRNA对妊娠疾病胎盘滋养层细胞功能调控的研究进展

胎盘是胎儿和母体之间进行物质交换的器官,胎盘发育不良可导致一系列妊娠疾病。胎盘正常生长发育与滋养层细胞的多种生物学过程密切相关。本文综述了微小RNA在妊娠疾病中对胎盘滋养层细胞功能的调控。     

5,4′-二-正辛烷氧基-7-二氟甲基金雀异黄素抑制人乳腺癌细胞生长

目的:观察金雀异黄素(genistein,GEN)衍生物即5,4′-二-正辛烷氧基-7-二氟甲基金雀异黄素(5,4′-Di-n-octox-yl-7-gem-difluoromethylene-genistein,DodFMG)抑制人乳腺癌MCF-7细胞生长作用。方法:体外培养人乳腺癌MCF-7细胞和人乳腺HBL-100细胞,MTT法测定细胞活性;集落形成法检测细胞的平皿集落形成能力。结果:DodFMG对MCF-7细胞活性有明显的抑制作用,呈剂量依赖性,IC50值为11μmol/L;对HBL-100细胞的抑制作用较弱,IC50值为65μmol/L,其对MCF-7细胞的细胞毒选择指数为5.9(65/11)。DodFMG以浓度依赖方式抑制MCF-7细胞集落形成。结论:DodFMG是一种具有相对选择性的新型抗乳腺癌活性新化学实体。     

儿童外周血不同类型白细胞柯萨奇-腺病毒受体的表达

目的研究柯萨奇-腺病毒受体（CAR）在儿童外周血不同类型白细胞中的表达。方法采用全血免疫荧光流式细胞术检测南华大学附属第一医院儿科2005年1-6月不同年龄组体检正常儿童外周血淋巴细胞、多形核细胞及单核细胞3种白细胞的平均荧光强度（MFI）和阳性细胞百分率（PPC）。结果流式细胞检测表明,同年龄组内多形核细胞及单核细胞MFI和（或）PPC比较无显著性差异（P〉0.05）,但2类细胞MFI和（或）PPC均显著高于淋巴细胞（Pa〈0.01）;不同年龄组淋巴细胞、多形核细胞及单核细胞3种白细胞的MFI和（或）PPC比较有显著性差异（Pa〈0.01）,其中以0-1岁组表达最高,2-3岁组次之,4-7岁组较低,8-15岁组表达最低。结论儿童外周血白细胞CAR表达以多形核细胞及单核细胞为主,流式细胞术是检测白细胞CAR表达的有效方法之一。     

全自动血细胞分析仪XE-5000检测中单核细胞假性增高原因分析

目的分析全自动血细胞分析仪XE-5000检测外周静脉血白细胞分类单核细胞假性增高的原因。方法选择单核细胞分类增高的标本,运用日本生产的SysmexXE-5000全自动血细胞分析仪对外周静脉血白细胞进行细胞分类,并与手工涂片显微镜镜检分类结果进行对比,并分析总结原因。结果外周血如出现核左移、异型淋巴、原始细胞等均可以引起全自动血细胞分析仪单核细胞分类计数假性增高,并且比例越高,影响越大。结论对于全自动血液分析仪检测单核细胞分类比例增高的标本都必须要进行人工涂片镜检复查。     

帕瑞昔布钠对无痛人工流产术后子宫收缩痛的影响

目的观察帕瑞昔布钠对无痛人工流产术后子宫收缩痛的镇痛效果及不良反应。方法80例自愿接受无痛人工流产术的早孕妇女随机分成帕瑞昔布钠组(帕瑞昔布钠+舒芬太尼+异丙酚)及舒芬太尼组（舒芬太尼+异丙酚）,常规监测生命体征并记录各指标值,记录麻醉起效时间、患者苏醒时间、定向力恢复时间、手术时间及异丙酚总用药量,并记录患者苏醒即刻、定向力恢复即刻、定向力恢复后30 min及离院时的子宫收缩痛VAS评分。结果帕瑞昔布钠组与舒芬太尼组比较,苏醒时间缩短,异丙酚总用量下降（P＜0.05）。患者术后各时点子宫收缩痛VAS评分帕瑞昔布钠组低于舒芬太尼组（P＜0.05）。结论无痛人工流产术前20 min静脉注射40 mg帕瑞昔布钠能减少异丙酚的用药量,对术后子宫收缩痛起到良好的镇痛效应。     

“三主”视角下《妇产科护理学》的课程思政教学实践

目的 探讨“三主”视角下《妇产科护理学》“课程思政”的教学实践及效果。方法 围绕教师队伍主力军、课程建设主战场、课堂教学主渠道3方面,采取强化教师思政育人意识与能力,完善课程思政系统、构建“LOVE”和“HEART”2大思政模块、丰富课堂教学方法等措施,在2019级护理本科生中进行《妇产科护理学》“课程思政”教学改革。结果 学生和督导评价中,教师德育能力均分超过上一年度,且获得了一些奖项;学生课堂互动参与度好、线上学习积极、期中考试和期末考试平均分超过80分,思政素养得分超过90分者占比超过80%。结论 “三主”视角下“课程思政”教学可提升教师思政育人能力,激发学生课程学习投入、提升学习效果和思政素养。     

动脉粥样硬化中巨噬细胞表型调控的研究进展

巨噬细胞是体内的一种吞噬细胞,与动脉粥样硬化病变的发生发展密切相关。研究表明,巨噬细胞的不同表型对动脉粥样硬化的进展发挥着不同作用。此外,减少促炎巨噬细胞亚群的局部增殖以及诱导巨噬细胞向抗炎表型转化是未来动脉粥样硬化治疗的关键。本文就巨噬细胞表型、表型调控相关信号通路及针对巨噬细胞表型调控的相关治疗途径展开综述,以期为动脉粥样硬化的防治提供新的靶点和途径。     

组织芯片分析PRSS2蛋白在胃癌组织中的表达与意义

目的 采用组织芯片分析PRSS2蛋白在胃癌组织中表达与意义,为获取胃癌诊断相关的蛋白分子提供实验资料。 方法 首先收集8例胃癌手术切除标本,包括正常胃粘膜、癌旁组织与胃癌组织,选用Western-blotting方法检测PRSS2蛋白在正常胃粘膜、癌旁组织与胃癌组织中的表达;其次运用免疫组织化学染色方法观察组织芯片（包括正常胃粘膜、癌旁和胃癌组织）中PRSS2蛋白在胃癌组织中的表达,分析其临床意义。 结果 胃癌组织中PRSS2蛋白表达较正常胃粘膜和癌旁组织明显升高,癌旁组织中的表达较正常胃粘膜组织升高;正常胃粘膜、癌旁和胃癌组织中PRSS2蛋白的阳性表达率分别为14.29%（5/34）、26.92%（7/26）和77.78%（63/81）,在胃癌组织中高分化、中分化和低分化腺癌的阳性表达率分别为60.00%（3/5）、70.59%（12/17）和81.36%（48/59）;PRSS2蛋白的阳性表达与胃癌组织的分化程度也呈现负相关。 结论 PRSS2蛋白在胃癌组织中表达较正常胃粘膜和癌旁组织高,癌旁组织中的表达较正常胃粘膜组织高,该蛋白表达与胃癌组织的发生和分化程度有关。     

梅毒螺旋体Gpd-IL-2融合基因原核表达重组体的构建、表达及免疫活性的初步研究

目的 以梅毒螺旋体(Tp)外膜蛋白基因Gpd及细胞因子佐剂IL-2为目的基因,融合构建原核表达干组体pET28a/Gpd-IL-2,表达鉴定并进行免疫活性的初步分析,为进一步开展Tp疫苗动物实验打下基础. 方法 定向克隆构建原核表达重组体pET28a/Gpd-IL-2进行诱导表达;Ni索和层析纯化重组融合蛋白后,Western blot 检测其免疫反应性;免疫新西兰兔评价重组蛋白的免疫原性. 结果 成功构建原核表达重组体pET28a/Gpd-IL-2,表达鉴定及纯化获得相对分子量约为60 kDa的融合蛋白;Western blot检测其能与梅毒阳性血清发生特异性结合,说明两融合基因之间的表达相互没受到太大影响;纯化的Gpd-IL-2重组蛋白免疫新西兰兔能诱导其产生特异性免疫应答,ELISA检测免疫血清中特异性抗体滴度在1∶6400以上. 结论 Gpd-IL-2融合基因重组蛋白具有良好的免疫活性,这为进一步开展Tp疫苗动物实验条件的优化打下一定的基础.