抑癌基因ST7L对卵巢癌细胞增殖、细胞周期和裸鼠移植瘤的影响

目的:研究ST7L基因对人类卵巢癌细胞系OVCAR3和SKOV3细胞生长增殖、周期和体内裸鼠成瘤模型的影响。 方法:PCR扩增ST7L过表达质粒（pcDNA3/ST7L）,生物合成ST7L的敲降质粒（pSilencer/ST7L）;利用脂质体转染技术在卵巢癌细胞中过表达或者敲降ST7L基因,用荧光定量PCR、Western blot验证质粒的有效性;MTT、克隆形成实验、流式细胞术检测ST7L对OVCAR3和SKOV3细胞增殖能力、周期的影响;并通过裸鼠移植瘤实验研究ST7L在体内成瘤能力。结果:过表达和敲降ST7L质粒是有效的;过表达ST7L后抑制了卵巢癌细胞生长,抑制了细胞G1/S期的转化;过表达ST7L在体内能够有效抑制裸鼠的成瘤能力。 结论: ST7L抑制OVCAR3和SKOV3细胞的增殖能力,抑制细胞周期进程,抑制体内裸鼠成瘤能力。     

间接包被ELISA法检测血清游离β-HCG

目的 研制生物素-亲合素间接包被ELISA法定量检测血清游离β-HCG试剂盒。 方法 用生物素化牛血清清蛋白和链霉亲合素包被微孔反应板,生物素化抗游离β-HCG抗体和酶标记抗游离β-HCG抗体检测游离β-HCG,评价试剂盒相关技术参数。 结果 本试剂盒具有较好的稳定性,灵敏度0.1 ng/ml,回收率95.9％~102.5％,批内CV 7.5％~11.1％,批间CV12.5%~18.1%,与FSH、TSH、LH和α-HCG的交叉反应率均<0.1％,检测范围0.1~500 ng/ml,与美国DRG公司试剂盒的相关系数r2=0.789 2,P<0.05。 结论 本方法研制的试剂盒灵敏度高,特异性好,操作方法简便,适于临床常规应用。     

流式微载体技术检测类风湿因子方法的研究

目的 建立基于流式微载体技术(flow cytometric microcarrier assay,FCMA)的血清类风湿因子(RF)的检测方法.方法 分别用FCMA和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测89例类风湿性关节炎(RA)患者、52例非RA的自身免疫性疾病患者和60例健康对照血清标本中IgM-RF和IgA-RF.结果 FCMA所测IgM-RF的组内和组间CV分别为3.1%±1.7%和5.6%±2.2%,显著(P＜0.05)低于ELISA组(6.7%±3.6%和11%±3.9%).IgA-RF亦是如此.以健康体检者为对照,FCMA IgM-RF和IgA-RF敏感度为80.9%和77.5%,特异度均为98.3%.以非RA的自身免疫性疾病患者为对照,FCMA IgM-RF和IgA-RF的敏感度为80.9%和77.5%,特异度为80.7%和82.7%.FCMA结果显著(P＜0.05)高于ELISA结果.结论 结果提示测定血清RF,FCMA比ELISA有更好的灵敏度、特异度和稳定性,建议临床推广和应用.     

肠外致病性大肠埃希菌毒力与耐药的相关性分析

Objective :To investigate the association of extra-intestinal pathogenic E.coli (ExPEC) clinical isolates and resistance. Methods:A total of 187 ExPEC clinical isolates were investigated. Multiplex PCR and the minimum inhibitory concentrations (MICs) of antimicrobials were performed to detect the virulence factors and resistance among the 187 E. coli strains isolates. The comparisons of proportions between groups were carried out by using χ² test and Logistic regression. Results:The virulence factor genes kpsMT II, papC, PapEF, papG allele II (Internal), papA, cnf1, sfa/focDE, K5 and rfc had higher detection rates in non-urinary tract group than urinary tract group. The antimicrobial drugs CIP, LVX and TZP had higher resistance rates in urinary tract group than non-urinary tract group. Logistic regression analysis showed 9 kinds of virulence factor genes detected were independent protective factors for resistance of ExPEC, and one was independent risk factors for resistance of ExPEC. And another one had the two functions. Conclusion:Due to the different microenvironment and the selection pressure of antibiotics, the detection rate of virulence factor genes and the resistance rate of ExPEC are different, and the two are closely related.     

BMP-2和地塞米松对成人成骨细胞增殖和分化的影响

目的 观察不同浓度骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)和地塞米松(dexamathasone,DEX)对体外培养的人成骨细胞增殖、分化的影响。方法成人髂骨松质骨胰蛋白酶消化后获得成骨细胞进行培养,用倒置显微镜进行活体观察并做碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)、Ⅰ型及Ⅲ型胶原染色观察成骨细胞生物学特征。培养的细胞加入不同浓度BMP-2(1、10、100、1000ng／m1)和DEX(10^-8、10^-7、10^-6mol／L)作用48h后,用MTT法检测细胞增殖,同时测定细胞裂解液中ALP活性和OCN含量。结果 体外培养的成人成骨细胞可合成碱性磷酸酶、骨钙素、Ⅰ型胶原,并形成钙化结节、3个浓度的DEX在48h后均能刺激成骨细胞的增殖,增加成骨细胞ALP活性和OCN含量,4个浓度BMP-2在48h后对成骨细胞无增殖作用,但都能增加ALP活性和OCN含量。结论 地塞米松促进体外培养的成人成骨细胞增殖和分化;短期作用下,BMP-2对成骨细胞的增殖无明显作用,但可促进成骨细胞的分化。     

胱硫醚β合酶基因突变在脑梗死患者轻度血管性认知功能障碍中的相关性研究

目的研究同型半胱氨酸(homocystine,Hcy)代谢基因胱硫醚β合酶(cystathionineβsynthase,CBS)基因T833C突变在急性脑梗死后轻度血管性认知功能障碍(vascular cognitve impairment,VCI)中的价值研究。方法采用扩增阻滞突变体系法检测CBS T833C基因型,对急性脑梗死分别行入院时、14 d、30 d和90 d时蒙特利尔认知评估量表(Montreal Cognitive Assessment,Mo CA)和简易精神状态量表(Mini-Mental State Examination,MMSE)评分。结果 Logistic回归分析显示Hcy可能是轻度VCI的独立危险因素(OR为1.274;95%CI 1.027~1.264,P=0.018);空腹高同型半胱氨酸血症(Hhcy)组14 d、30 d和90 d MMSE和Mo CA评分分别低于Hcy水平正常组(P0.01或0.05);各基因型入院时MMSE和Mo CA评分无差别(P0.05),而入院14 d时,C/C型MMSE和Mo CA评分低于T/T型(P0.05),随访30 d和90 d时,C/C型MMSE和Mo CA评分趋势是低于C/T和T/T型(P0.01或0.05),C/T型低于T/T型(P0.01或0.05)。结论 CBS T833C基因突变可能是引起Hhcy,间接促进了脑梗死患者VCI事件的出现,可能是VCI的遗传易感因素。     

酶法血清乙醇测定试剂盒的初步评价及临床意义

目的：对血清乙醇测定试剂盒进行初步评价，以便临床应用。方法：在BTS-310半自动生化仪上测定乙醇试剂盒的线性，回收率，精密度。结果：线性范围0-60mmol/L，回收率95%-102%，精密度日内CV：1.7%。日间CV：4.2%，测定30例急诊患者，26例考虑为急性酒精中毒，结论：该方法准确，精密，简易，快速，可用于临床实验室测定乙醇。     

HbA1c对创伤后高血糖性质的鉴别价值

糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin)——HbA1c是红细胞内的血红蛋白与葡萄糖结合的产物,是反映6～8周血糖变化的稳定指标,是国际公认的监测糖尿病(diabetes mellitus,DM)的金标准。2010年美国糖尿病学会(ADA)更新的《糖尿病诊疗标准》中,首次正式将HbA1c作为DM的诊断标准之一[1]。为探讨HbA1c检测对创伤后高血糖的临床     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌IMP-1基因mRNA的表达及其与耐药性的关系

摘要:目的：从IMP-1型金属酶基因mRNA表达的角度,对铜绿假单胞菌产金属酶情况和细菌对亚胺培南耐药性之间的关系进行分析。 方法：选取前期课题实验中IMP-1基因阳性的耐亚胺培南铜绿假单胞菌12株,用微量肉汤稀释法检测其对亚胺培南的最小抑菌浓度（MIC）,用实时荧光定量RT-PCR法检测IMP-1基因的mRNA表达量,分析其表达量与细菌对亚胺培南MIC之间的关系。 结果：低MIC组和高MIC组的MIC范围分别为16~64 μg/mL和256~2 048 μg/mL;低MIC组的IMP-1基因mRNA相对表达量显著低于高MIC组（P＜0.05）。 结论：耐亚胺培南铜绿假单胞菌中IMP-1基因mRNA的表达水平与细菌对亚胺培南MIC值的高低有关。