扩张型心肌病活检心肌中肠道病毒RNA和穿孔素、颗粒酶B的表达及其与心肌病变的相关性

目的     

扩张型心肌病活检心肌穿孔素表达及其与心肌病变的关系

目的　研究扩张型心肌病 (DCM)患者心内膜活检心肌中穿孔素 (PFP)表达水平及与心肌病变的关系。方法　 19例DCM患者均行心内膜心肌活检留取心肌 ,10例意外死亡之非心脏病人心肌作为正常对照。利用原位杂交方法检测心肌浸润细胞PFPmRNA表达水平并与苏木精和伊红(HE)染色心肌病理积分进行比较。结果　与正常对照心肌相比 ,DCM患者心肌中有炎性细胞浸润 ,每高倍镜视野大于 5个白细胞的浸润灶明显增多。 19例DCM中 ,15例可见PFPmRNA阳性的浸润细胞 ,每高倍镜视野平均 1 91± 0 72个细胞。而 10例正常对照中未见PFPmRNA阳性的细胞。PFPmRNA表达水平与心肌病理积分正相关 ,r =0 82 ,P <0 0 5。结论　PFPmRNA表达水平与心肌病变的程度密切相关 ,提示PFP介导的细胞毒作用可能为DCM中心肌损害的重要机制之一     

病毒性心肌炎心内膜心肌活检组织中多种病毒基因检测的初步探讨

目的　在病毒性心肌炎心内膜心肌活检组织中同时检测肠道病毒 (EVs)、腺病毒(ADV)、人巨细胞病毒 (HCMV)、单纯疱疹病毒I型 (HSV 1)以及E B病毒 (EBV)的存在。方法　利用PCR技术检测 8例病毒性心肌炎患者心内膜心肌活检组织中多种病毒基因片段。结果　 6例病理学检查证实为心肌炎的标本中 ,3例肠道病毒RNA阳性 ,2例ADV阳性 ,其中 1例二者均阳性 ;2例病理学不支持心肌炎者中 ,1例EBV阳性。结论　病毒性心肌炎可能与EVs、ADV、EBV、HCMV等感染有关。     

实验性病毒性心肌炎病程中穿孔素表达水平的变化及其与心肌损害的关系

目的探讨病毒性心肌炎（ＶＭＣ）发病过程中，心肌炎症细胞中穿孔素（ＰＦＰ）表达水平的动态变化及其与心肌病变的关系。方法采用半定量ＲＴ－ＰＣＲ及免疫组化方法，检测小鼠ＶＭＣ各时期心肌炎症细胞的ＰＦＰｍＲＮＡ及其抗原表达水平，并检查心肌病理变化及半定量分析其程度，统计学分析ＰＦＰ表达水平的动态变化与心肌病变程度的演变的相关性。结果（１）感染后０～１０天，ＰＦＰｍＲＮＡ及抗原的表达水平逐渐升高，心肌病变以炎症细胞浸润及心肌坏死为主并逐渐加重，１０～１５天ＰＦＰ表达水平最高，上述心肌病变也最严重，２０天以后ＰＦＰ逐渐下降，心肌炎症细胞浸润及坏死逐渐减轻，代之以成纤维细胞增生、胶原纤维沉积及心肌纤维化等；（２）在小鼠心肌炎发病过程中，ＰＦＰ抗原表达水平的变化与心肌病变积分的变化呈显著正相关（ｒ＝０．９５，Ｐ＜０．０５）。结论ＰＦＰ介导的细胞毒作用可能是ＶＭＣ中心肌损害的主要机制之一。     

应用VP1蛋白的合成肽抗原检测心肌炎患者血清中柯萨奇B病毒IgM抗体

从柯萨奇B病毒(CVB)衣壳蛋白VPI的保守区选出一段13肽进行化学合成,经ELISA证买该段多肽是CVB的共同优势抗原表位.以多肽作包被抗原,建立了检测CVBIgM的间接ELISA法,对85例健康人、230例病毒性心肌炎、19例RF阳性血清、40例其它疾病患者进行了检测,阳性率分别为7.1%、41.3%、21.1%、10%.230例心肌炎中有106例用以病毒作包被抗原的间接ELISA进行了CVBIgM检测,阳性率49.1%.两者之间结果有良好的相关性(X~2=41.9,P0.05).提示,应用合成肽抗原检测CVBIgM抗体有较好的敏感性和特异性.