神经生长因子在小鼠病毒性心肌炎心肌中表达的意义

目的探讨病毒性心肌炎(VMC)发病过程中,心肌组织神经生长因子(NGF)表达的动态变化及发病机制中作用。方法70只4周龄雄性BALB/C小鼠腹腔接种0.1ml的CVB3建立VMC模型,10只同周龄同品系小鼠腹腔接种Eagle’s液作为对照组。VMC组于接种后3、7、15、30d,对照组于30d处死,采用RT-PCR、免疫组化检测心肌NGF mRNA及蛋白表达,并对NGF表达水平与心肌病变积分进行相关性分析。结果VMC组3~30d各时点心肌NGF mRNA及蛋白表达水平均明显增高,以7d时为最高,与对照组比较,差异均有显著性(P<0.05或0.01),而且NGF蛋白表达水平与心肌病变积分呈显著正相关(r=0.90,P<0.05)。结论NGF过度表达可能在病毒性心肌炎的发病机制中起重要作用。     

苦瓜蛋白对柯萨奇B3病毒性心肌炎小鼠半胱天冬酶3活性及凋亡的抑制作用

为研究苦瓜蛋白对凋亡的关键酶半胱天冬酶 3及凋亡的调节作用 ,用已经建立起来的方法从苦瓜果肉中提取苦瓜蛋白。将BALB/C小鼠分为 4组 :病毒对照组、正常对照组、药物对照组和药物治疗组 ,分别在第 0天、第 3天、第 7天和第 14天各处死 5只小鼠 ,第 2 1天全部处死动物 ,心肌组织半胱天冬酶 3活性测定按照CAL BIOCHEM公司的试剂说明书进行 ,并稍加改正 ,凋亡鉴定按照Oncogene公司的TdT DNA裂解片断末端原位标记试剂说明书进行。结果发现 ,①病毒对照组第 7天开始出现半胱天冬酶 3活性 (0 .6 3± 0 .2 1pmol/min ,n =5 ) ,第 14天的活性 (10 .9± 1.5pmol/min ,n =5 )显著高于第 7天 ,第 2 1天的活性 (12 .6± 1.3pmol/min ,n =5 )又高于第 14天。②药物治疗组 ,只有一个第 2 1天的标本有半胱天冬酶 3活性 (0 .4 1pmol/min) ,其它两组均未检测到此酶的活性。③DNA裂解片断末端原位标记法发现 ,病毒对照组在第 7天心肌中有少数细胞凋亡 ,第 14天、第 2 1天凋亡细胞明显增多 ,在非病变区域可发现单个凋亡的心肌细胞。治疗组未发现凋亡细胞 ,其它两组也未发现凋亡细胞。结果提示 ,CVB3病毒性心肌炎中发现有明显的凋亡现象 ,凋亡和半胱天冬酶 3发现于第 7天 ,且随着时间增加而逐渐加重(增强 ) ;苦瓜蛋白可显     

柯萨奇-腺病毒受体在小鼠心肌组织中的表达

目的 :观察柯萨奇 腺病毒受体 (CAR)在不同年龄、性别小鼠心肌组织中的表达情况。方法 :采用免疫组化和Western Blotting技术 ,半定量分析胚胎期 18d ,生后 1d ,4、8、12周雄性小鼠及 4周雌性小鼠心肌组织中的CAR含量。结果 :免疫组化半定量分析示胚胎期 18dCAR表达最高 ,生后 1d(新生鼠 )及 4周龄 (幼年鼠 )表达量依次降低 ,8周龄 (成年鼠 )基本不表达 (P <0 .0 5 ) ,12周龄 (老年鼠 )低表达 ,与 8周龄比较 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 1) ,并且 ,4周龄雄性小鼠和雌性小鼠相比 ,CAR表达量雄性高于雌性 (P <0 .0 1) ,Western Blot ting结果示CAR表达变化趋势与免疫组化结果相一致。 结论 :小鼠心肌组织中CAR的表达具有明显的时序性 ,而且性别对CAR的表达有影响。     

端粒、端粒酶和端粒酶逆转录酶与扩张型心肌病

扩张型心肌病(cardiomyopathy,DCM)是一种以左心室或双心室扩张和心肌收缩功能减退为主要特征的原因不明的心肌疾病.     

病毒性心肌炎患儿血清巨噬细胞移动抑制因子及白介素-2的表达及意义

目的:探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、白介素-2(IL-2)在病毒性心肌炎(VM)发病中的意义。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定27例急性期和18例恢复期VM患儿血清MIF、IL-2水平,并与30例健康儿童做对照。结果:VM急性期血清MIF、IL-2水平明显高于恢复期和对照组(P<0.01),并与磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB)呈正相关(P<0.05);VM恢复期MIF、IL-2水平与对照组比较,差异无显著性(P>0.05),MIF、IL-2与CK-MB无相关性(P>0.05)。结论:MIF、IL-2参与VM发病过程,检测血清MIF、IL-2水平有助于VM诊断、判断病情及预后,并为临床治疗开辟新途径。     

苦瓜素对小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎caspase 3作用的研究

目的观察苦瓜素对病毒性心肌炎心肌组织caspase 3活性、基因转录及相应蛋白质表达的影响,探索苦瓜素治疗病毒性心肌炎的机制。方法实验小鼠随机分为苦瓜素治疗组、生理盐水对照组及正常对照组和正常小鼠苦瓜素处理组。苦瓜素剂量为25 mg.kg-1.d-1,1次/d,疗程7 d。第15天后取小鼠心肌进行caspase 3活性测定、HE染色心肌病理检查、心肌细胞凋亡检查、RT-PCR检测、caspase 3,mRNA转录水平,免疫组化与免疫印迹测定caspase 3蛋白表达。结果生理盐水对照组小鼠心肌组织caspase 3活性明显增高、mRNA转录水平与相应蛋白质表达水平亦显著增加;苦瓜素治疗组caspase 3活性明显抑制,caspase 3 mR-NA转录水平明显低于生理盐水对照组(0.012±0.008 vs 0.043±0.015,t=4.37,P<0.01),凋亡细胞明显减少。结论苦瓜素通过抑制caspase 3基因转录与蛋白质表达、抑制其活性,对Balb/c小鼠CVB3病毒性心肌炎具有明显的治疗作用。     

病毒性心肌炎小鼠不同时点胰岛素样生长因子-1及其相关蛋白的表达

目的探讨胰岛素样生长因子-1（IGF-1）及其相关蛋白在病毒性心肌炎病程中的作用。方法取Balb／C小鼠60只，随机分为病毒实验组40只，腹腔感染CVB3病毒，分别于实验d3、7、15、30采血、取心肌组织；空白对组（未感染CVB3病毒小鼠）20只。用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测其血浆IGF-1的表达，用免疫组织化学法和逆转录酶多聚链反应（RT-PCR）技术检测其心肌组织IGF-1及相关蛋白的表达。结果病毒性心肌炎小鼠血浆IGF-1及相关蛋白表达均较空白对照组高，且在感染病毒后表达渐增高，15d达最高峰，30d表达降低，但仍维持一较高水平，与对照组比较仍有显著差异（F=19．53 P〈0.05），其在心肌组织中的表达与血浆中的表达变化规律一致。结论IGF-1及其相关蛋白可能参与小鼠CVB3病毒性心肌炎的病理生理过程。     

细胞因子紊乱与支气管哮喘

细胞因子主要是由免疫细胞所产生、具有广泛生物活性的小分子蛋白质.近年研究发现多种细胞因子参与支气管哮喘(哮喘)炎症调控,如细胞白细胞介素、生长因子、趋化因子等在诱发、维持和加重哮喘的变应性炎症反应中起着重要作用.该文就白细胞介素、生长因子、趋化因子与哮喘的关系及其在哮喘治疗中的前景作一综述.     

衡阳地区医院产超广谱β－内酰胺酶肠杆菌科流行率及耐药性变迁分析

目的：探讨衡阳地区医院产超广谱β－内酰胺酶肠杆菌科流行率及耐药的性变化趋势,为指导临床合理使用抗菌药物提供理论依据。方法：回顾性分析衡阳市5所地区医院2009年～2011年分离的肠杆菌科细菌资料,记录并统计产超广谱β－内酰胺酶（ESBLs）肠杆菌的分离率及耐药性。产ESBLs肠杆菌的检测采用NCCLS（1999）推荐的筛选和确证试验,药敏实验采用K－B法。结果：临床分离的3200株肠杆菌科细菌中共检出产ESBLs肠杆菌科细菌896株,总检出率28.00％,产ES-BLs肠杆菌科细菌的分离率由2009年的22.76％上升为2011年的31.28％;大肠埃希菌是主要的产ESBLs肠杆菌科,从中分离出产ESBLs菌589株,检出率32.74％（589／1798）;大肠埃希菌产ESBLs菌对8种常用抗生素的敏感率由高到低依次为：亚胺培南＞哌拉西林／他唑巴坦＞莫西沙星＞复方新诺明＞环丙沙星＞庆大霉素＞头孢噻肟＞头孢曲松。结论：产ESBLs细菌检出率呈逐年上升趋势,应高度重视ESBLs检测,阶段性地分析产ESBLs细菌发生率和耐药性的变迁,及时为临床提供正确合理使用抗菌药物的理论依据。     

小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎心脏炎症细胞因子基因和蛋白表达及黄芪甲甙干预研究

目的 探讨黄芪甲甙对小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎心脏炎症细胞因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6和白细胞介素10 mRNA表达和蛋白质产生的影响.方法 Balb/c小鼠50只随机分为5组,空白对照组,腹腔无菌注射不含病毒的Eagle's培养基0.1 mL,在腹腔注射病毒培养基30 min后,以生理盐水0.1 mL灌胃,共7 d;病毒性心肌炎对照组,小鼠每只腹腔注射0.1 mL内含1×105TCID50柯萨奇B3病毒的Eagle's培养基,在腹腔注射含病毒的Earle's培养基30 min后,以生理盐水0.1 mL灌胃,共7 d;黄芪甲甙低、中、高剂量干预组,在腹腔注射病毒30 min后,用黄芪甲甙剂量分别为0.07、0.2和0.6 ms/(kg·d)0.1 mL灌胃,共7 d.14 d后处死全部小鼠并取其心脏.心脏组织一半用于逆转录聚合酶链反应法测定心脏细胞因子mRNA表达.另一半用Western blot测定细胞因子蛋白质生成量.结果 空白对照组上述细胞因子均无明显表达,心肌炎对照组肿瘤坏死因子α,白细胞介素1β,白细胞介素6和白细胞介素10 mRNA和蛋白产生均显著高于空白对照组;同心肌炎对照组比较,高剂量黄芪甲甙组的肿瘤坏死因子α,白细胞介素1β.白细胞介素6 mRNA和蛋白生成均显著下降,而白细胞介素10mRNA和蛋白明显升高.结论 黄芪甲甙明显降低小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎心脏的致炎症细胞因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β和白细胞介素6,而升高炎症保护因子白细胞介素10.