神经干细胞移植对大鼠脊髓损伤后胶质细胞源性神经营养因子与生长相关蛋白43基因表达的影响

目的研究海马源性神经干细胞(neuralstemcells,NSCs)移植对大鼠脊髓损伤(spinalcordinjury,SCI)后胶质细胞源性神经营养因子(glialcellline-derivedneurotrophicfactor,GDNF)及生长相关蛋白43(growth associatedprotein43,GAP-43)基因表达的影响,探讨NSCs移植修复大鼠脊髓损伤的机制。方法新生一日龄Wistar大鼠6只,提取海马区NSCs,进行培养及鉴定。Wistar成年大鼠以改良Allen打击装置制成SCI模型。将Wistar大鼠60只分为3组:A组NSCs移植(n=24)、B组单纯损伤DMEM填充(n=24)、C组正常对照组(n=12)。于术后第1、3及7天应用RT-PCR法观察,各组大鼠脊髓区GDNF和GAP-43基因表达的变化。结果移植术后第1天,A组GDNF mRNA的表达量较B组平均增加23.3%;第3天,较B组平均增加26.8%;第7天,较B组平均增加32.7%。移植术后第1天,A组GAP-43mRNA的表达量较B组平均增加19.5%;第3天,较B组平均增加21.6%;第7天,较B组平均增加23.1%。A组较B组明显增强了GDNFmRNA和GAP-43mRNA的表达,组间差异均具有统计学意义(P<0.05)。C组各时间点GDNF及GAP-43mRNA的表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论NSCs移植后改变脊髓损伤区局部的微环境,上调GDNFmRNA,促进GAP-43mRNA的表达,是修复脊髓损伤的机制之一。     

转染血管内皮细胞生长因子骨髓间充质干细胞与牛松质骨支架复合组织工程骨的血管形成

背景：小块组织工程骨植入动物体内后,早期依靠组织液的渗透可获得营养,但大块组织工程骨的营养仅靠组织液的渗透是远远不够的,必须通过血管再生来获得。目的：观察转染血管内皮细胞生长因子表达载体骨髓间充质干细胞复合组织工程骨植入动物体内后的血管形成能力。方法：制作日本大耳白兔双侧尺骨中段骨缺损模型,左侧尺骨缺损植入转染血管内皮细胞生长因子表达载体的自体骨髓间充质干细胞复合脱钙脱脂去蛋白的牛松质骨支架组织工程骨为实验组,右侧尺骨缺损植入自体骨髓间充质干细胞复合脱钙脱脂去蛋白的牛松质骨支架组织工程骨为对照组。术后12周行X射线摄片观察、大体标本观察、苏木精-伊红染色和Masson染色组织切片观察、MiFas图像分析系统定量分析。结果与结论：实验组与对照组尺骨缺损处均有连续骨痂形成;组织切片经苏木精-伊红染色、Masson三色法染色及MiFas图像分析系统定量分析可见实验组和对照组均有大量的新生骨,但实验组新生血管明显多于对照组（P〈0.01）,且血管较粗大,而且与新生骨接近。说明将转染血管内皮细胞生长因子表达载体的骨髓间充质干细胞复合在组织工程骨上植入动物体内可明显促进新生血管的形成。     

倒刺线环扎固定技术对前交叉韧带保残重建的疗效影响

目的探讨前交叉韧带保残重建术中采用倒刺线环扎固定的可行性以及对疗效的影响。方法2014 年 2 月—2016 年 1 月将 96 例（96 膝）符合选择标准的前交叉韧带损伤患者纳入研究，随机分为两组，每组 48 例。两组均采用自体肌腱行前交叉韧带保留残端重建术，其中试验组采用倒刺线环扎固定残端，对照组采用传统缝线固定残端。两组患者年龄、性别、损伤侧别、受伤至手术时间以及术前膝关节稳定性（KT-1000 检测）及国际膝关节文献委员会（IKDC）评分、Lyshlom 评分等一般资料比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。比较两组术后膝关节稳定性、膝关节功能（IKDC 及 Lyshlom 评分）、本体感觉情况（被动角度重复试验）以及 Cyclops 病变发生情况。 结果两组术后切口均Ⅰ期愈合。对照组 44 例患者获随访，随访时间 26～47 个月，平均 36.6 个月；试验组 45 例患者获随访，随访时间 26～48 个月，平均 35.6 个月。末次随访时，两组 IKDC 评分、Lysholm 评分、KT-1000 检测与术前比较，差异均有统计学意义（P<0.05）；两组间比较差异均无统计学意义（P>0.05）。术后 1、2 年试验组及对照组本体感觉比较，以及每组内术后1年和2年间比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。随访期间 MRI 复查显示，术后 6 个月、1 年及 2 年时试验组 Cyclops 病变发生率分别为 0、4.44%（2/45）、4.44%（2/45），对照组分别为 13.6%（6/44）、13.6%（6/44）、20.5%（9/44）；术后 6 个月及 2 年两组间发生率比较差异有统计学意义（P=0.012；P=0.022），术后 1 年时两组间比较差异无统计学意义（P=0.157）。 结论前交叉韧带保残重建术中采用倒刺线环扎固定残端能够降低术后 Cyclops 病变的发生率，但是对术后膝关节功能恢复无明显优势。     

转染血管内皮细胞生长因子骨髓间充质干细胞与牛松质骨支架复合组织工程骨的血管形成

背景:小块组织工程骨植入动物体内后,早期依靠组织液的渗透可获得营养,但大块组织工程骨的营养仅靠组织液的渗透是远远不够的,必须通过血管再生来获得。目的:观察转染血管内皮细胞生长因子表达载体骨髓间充质干细胞复合组织工程骨植入动物体内后的血管形成能力。方法:制作日本大耳白兔双侧尺骨中段骨缺损模型,左侧尺骨缺损植入转染血管内皮细胞生长因子表达载体的自体骨髓间充质干细胞复合脱钙脱脂去蛋白的牛松质骨支架组织工程骨为实验组,右侧尺骨缺损植入自体骨髓间充质干细胞复合脱钙脱脂去蛋白的牛松质骨支架组织工程骨为对照组。术后12周行X射线摄片观察、大体标本观察、苏木精-伊红染色和Masson染色组织切片观察、MiFas图像分析系统定量分析。结果与结论:实验组与对照组尺骨缺损处均有连续骨痂形成;组织切片经苏木精-伊红染色、Masson三色法染色及MiFas图像分析系统定量分析可见实验组和对照组均有大量的新生骨,但实验组新生血管明显多于对照组(P<0.01),且血管较粗大,而且与新生骨接近。说明将转染血管内皮细胞生长因子表达载体的骨髓间充质干细胞复合在组织工程骨上植入动物体内可明显促进新生血管的形成。     

损伤脊髓组织液对大鼠骨髓基质细胞向神经细胞诱导分化的研究

目要：探讨成年大鼠骨髓基质细胞在损伤脊髓组织液中向神经细胞分化的可能性，为神经再生及脊髓损伤的治疗提供一种新方法。方法：从大鼠骨髓中分离培养骨髓基质细胞并传至第5代，将正常、伤后1d，伤后1周及伤后3周脊髓提取液加入细胞培养基中，观察细胞形态的变化，并采用免疫组织化学法检测诱导后的细胞表达NSE特异性标志物。结果：加入脊髓提取液诱导后24h，部分细胞的形态已发生改变，48h后大部分细胞不仅在形态上表现为神经元样特征，而目NSE等特异性抗体呈阳性表达。结论：损伤脊髓组织液能将骨髓基质细胞诱导成神经元样细胞。     

膝关节后斜韧带缝合修补对膝关节旋转稳定性的影响

目的探讨膝关节内侧副韧带合并前交叉韧带损伤时，后斜韧带缝合修复与否对膝关节旋转稳定性的影响。方法回顾分析 2013 年 1 月—2015 年 12 月收治的符合选择标准的 50 例（50 膝）合并前交叉韧带损伤的 3 度膝关节内侧副韧带损伤患者临床资料。行前交叉韧带自体肌腱重建、内侧副韧带浅层及深层缝合修复后，其中 25 例同时缝合修复后斜韧带（缝合组），25 例不作手术处理（保守治疗组）。两组患者性别、年龄、病程及术前 KT-1000 测量、内侧关节间隙开口、国际膝关节文献委员会（IKDC）评分、疼痛视觉模拟评分（VAS）、膝关节活动度等一般资料比较，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。 结果术后两组患者切口均Ⅰ期愈合，无手术相关并发症发生。患者均获随访，缝合组随访时间 28～56 个月，平均 38.1 个月；保守治疗组为 26～55 个月，平均 29.1 个月。末次随访时，两组患者膝关节 IKDC 评分、VAS 评分、KT-1000 测量、内侧关节间隙开口以及膝关节活动度均较术前明显改善（P<0.05）；组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。Slocum 试验检查显示两组膝关节均无前内侧旋转不稳定。 结论对于合并前交叉韧带损伤的膝关节内侧副韧带损伤患者，采用前交叉韧带重建及内侧副韧带浅层及深层缝合后，后斜韧带修复与否对恢复膝关节内侧稳定性无明显影响。     

Two column classification of tibial plateau fractures; description,clinical application and reliability

PurposeIn this era of life highly comminuted and multi planar tibial plateau fractures involving the posterior corners are more commonly seen and addressed in the literature than before. Among these several types have not been described in the currently used classification systems. In fact simple classification systems ignore several fracture types and leniently grouped the fractures with different mechanism, morphology, treatment modalities and prognosis in same category. On the other hand, more extensive nature classifications with detailed subdivisions are difficult to remember for clinicians. The clinical reliability of these classifications is another problem. All these issues demand the potential need of a new classification. The aim of this study was to describe a quadrant specific two column classification of tibial plateau fractures and to analyse its inter-observer and intra-observer reliability, clinical assessment and application.Materials and methodsFrom January 2009 to December 2015, 44 patients with tibial plateau fractures were studied retrospectively. The antero-posterior (AP), lateral X-rays and computed tomography (CT) with axial transverse, sagittal, coronal and three dimensional (3D) reconstruction images were performed for all the patients. All of the fractures were categorized according to quadrant specific two column classification and the traditional Schatzker’s classification. The comparative analysis for inter-observer and intra-observer reliability of the new classification and the Schatzker’s classification was conducted by four observers.ResultsThree cases didn’t match any type in the Schatzker’s classification. While on the other hand, all cases were classified by two column classification. The mean kappa values for inter-observer reliability by using the Schatzker’s classification was 0.723 (range, 0.674-0.823), representing substantial agreement, whereas the mean kappa value was 0.939 (range: 0.897-0.974), representing almost perfect agreement according to two column classification. The mean kappa values for intra-observer reliability using the Schatzker’s classification and two column classification were 0.789 (range: 0.590-0.864) and 0.955 (range:0.923-0.948) showing substantial agreement and almost perfect agreement.ConclusionThe quadrant specific two column classification is anatomically oriented, CT based and clinically valid. The different fracture types according to anatomic location are represented alphanumerically so that treatment matched to specific fracture type (quadrant specific anatomic fixation) for optimal outcomes. Furthermore, it demonstrates higher inter-observer and intra-observer reliability. This classification can be adopted to strengthen the traditional Schatzker’s classification, particularly in the multi planar and posteriorly extended plateau fractures. It can be used as a reliable research tool. The database can be used to distinguish different fracture types, individual type incidences, specific treatment and also prognosis. Authors suggest a large multi-centre study.     

环氧酶-2在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中的表达及意义

目的探讨局灶性脑缺血再灌注损伤过程中环氧酶(COX)-2基因的表达及其意义。方法采用栓线法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型。随机分为8组:假手术组,缺血2h组,缺血再灌注3、6、12、24、48和72h组,每组10只。评定神经功能损伤,HE染色观察脑组织形态学改变。Northern blot、Western blot和免疫组化染色方法检测脑组织的mRNA和蛋白产物表达。结果神经功能缺损表现随缺血再灌注时间的延长而逐渐加重。缺血2h组可见COX-2的mRNA和蛋白产物表达明显增加,再灌注后表达逐渐增强,再灌注12～24hCOX-2的mRNA和蛋白产物表达达到高峰。结论COX-2基因在局灶性脑缺血再灌注损伤中的表达呈动态变化过程,COX-2可能与缺血再灌注后迟发性神经细胞死亡有关。