干细胞因子对大鼠骨髓间充质干细胞增殖与分化的影响

目的　探讨干细胞因子 (StemCellFactor ,SCF)促进骨髓间充质干细胞 (MSCs)增殖及促进其向心肌细胞分化的作用。方法　SCF对MSCs预处理 ,流式细胞术测定第 4代MSCs的细胞周期 ,DAPI -MSCs在体外模拟的心肌微环境下培养。用数码显微摄像及免疫荧光技术分别记录和检测心肌特异性肌节肌球蛋白重链 (MHCα/β)、肌钙蛋白T(TroponinT ,TnT)的表达 ,分析MSCs向心肌细胞分化的百分率。结果　实验组的G0 /G1期细胞百分率均显著低于对照组 (P <0 0 1) ,S期、G2 /M期细胞百分率及PI值均显著高于对照组 (P <0 0 1)。在共培养的第 2、3、4、5d ,SCF组表达MHC的DAPI -MSCs阳性百分率分别为 (1 96± 0 3 3 ) %、(4 76±0 3 2 ) %、(5 15± 0 42 ) %、(8 5 2± 0 45 ) % ,显著高于对照组的 (0 5 2± 0 2 1) %、(1 2 5± 0 47) %、(1 75± 0 2 8) %、(3 64± 0 3 2 ) % (P<0 0 1) ;在共培养的第 3、4、5d表达TnT的DAPI -MSCs阳性百分率分别为 (1 10± 0 15 ) %、(2 64± 0 18) %、(5 43± 0 2 4) %均显著高于对照组的 0、(1 2 7± 0 13 ) %、(1 3 2± 0 2 5 ) % (P <0 0 1)。结论　SCF对MSCs具有促增殖、促分化的作用。     

特发性黄斑裂孔玻璃体切除术后白内障超声乳化术

目的：评价特发性黄斑裂孔玻璃体切除术后并发性白内障的超声乳化人工晶体植入术的临床疗效。方法：回顾性分析对32例(32眼)特发性黄斑裂孔玻璃体切除术后并发性白内障患者采用白内障超声乳化人工晶体植入术：21例(21眼)行巩膜隧道切口超声乳化术，11例(11眼)行透明角膜切口超声乳化术，观察术中、术后并发症及患眼视力、黄斑变化情况。结果：术后三月，所有患眼视力均有不同程度的提高，最佳矫正视力0．01～0．1共4眼，0．1～0．3共11眼，0．3～1．0共17眼，术后早期并发症为角膜水肿2眼，术后远期并发症为后发性白内障6眼，需Nd：YAG激光治疗，黄斑裂孔重新裂开1眼。结论：对于特发性黄斑裂孔玻璃体切除术后并发性白内障，超声乳化人工晶体植入术操作安全、临床效果好、术后并发症轻微，是目前最为理想的治疗方法。     

儿童玻璃体切除术后无晶状体眼的二期人工晶体植入术

目的评价儿童玻璃体切除术后无晶状体眼二期人工晶体植入术的视力效果、手术技巧及其安全性.方法对32例儿童眼内炎玻璃体切除术后的无晶状体眼行人工晶状体植入术.采用颞下方平坦部巩膜灌注,行后房型人工晶体睫状沟缝线固定术,术后随访6～24月.结果所有患者均达到或超过术前最佳矫正视力,术后裸眼视力＜0.1者2眼,0.1～0.2者8眼,0.2～04者16眼,＞05者4眼.无严重远期并发症.结论儿童眼内炎玻璃体切除术后二期人工晶体睫状沟缝线固定术,手术效果可靠,术后并发症少,是矫正儿童无晶状体眼的理想手术方法.     

胶质细胞源性神经营养因子在小鼠生精恢复过程中的表达和意义

目的:分析并探讨胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)在小鼠恢复生精过程中的表达变化,及其与精原干细胞增殖与分化的关系。方法:间隔24 d 2次腹腔注射白消安建立小鼠生精恢复过程的动物模型。根据第二次给药后的不同时间随机分为1、2、3、4、6、8、10周共7组(8只/组),8只正常小鼠作对照组,分别于相应时点取材,进行光镜和电镜的研究。采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同时间GDNF mRNA的表达变化;并采用原位杂交技术检测GDNFmRNA表达定位。结果:2次给药后第1-2周,GDNF mRNA的表达明显增强,在第2周达到高峰;在给药后第3-4周明显下降,并在第4周达到低谷;随后几周内表达又逐渐增强,于第10周恢复到正常水平。原位杂交显示,GDNF由sertoli细胞表达。结论:在小鼠生精恢复过程中,GDNF的高水平表达促进精原干细胞自我更新,对于维持生精上皮干细胞数量的稳定具有十分重要的意义。     

干扰素γ基因内含子1+874位点多态性与乙型肝炎病毒感染关系的研究

目的 研究干扰素γ（IFN-γ）基因内含子1＋874位点多态性与乙型肝炎病毒（HBV）感染、转归的关系,探讨慢性HBV感染的遗传易感因素.方法 采用序列特异性引物-聚合酶链反应（PCR-SSP）技术检测231例慢性HBV携带患者、165例自限性HBV感染者和135名正常对照者IFN-γ基因内含子1＋874位点T/A单核苷酸多态性.结果 慢性HBV感染组IFN-γ基因＋874位点AA基因型频率（TT、TA、AA频率分别为9.1%、12.1%、78.8%）高于正常对照组（TT、TA、AA频率分别为12.6%、23.0%、64.4%）（x2=9.60,P=0.008）;而自限性HBV感染组（TT、TA、AA频率分别为13.9%、23.7%、62.4%）和对照组之间差异无显著性（x2=0.16,P=0.92）.结论 IFN-γ基因内含子1＋874位点多态性与慢性HBV感染有关,该位点多态性可能在决定个体HBV感染遗传易感性方面有一定意义.     

小鼠单疱病毒角膜炎行羊膜移植MMPs及TIMPs表达的变化

目的:探讨羊膜移植对BalB/c小鼠感染单纯疱疹病毒-1(HSV-1)后基质金属蛋白酶-2,-8,-9及组织金属蛋白酶抑制剂TIMP-1,TIMP-2表达变化及其在单疱病毒角膜炎(HSK)病程中所起的作用。方法:将40只小鼠随机分为实验组和对照组,将5μl(105PFU)HSV-1感染小鼠单侧右眼角膜,建立单疱病毒角膜炎的动物模型。对实验组小鼠右眼角膜行羊膜移植术。分别在HSV-1感染后的第2,7,14 d处死小鼠,用免疫组化方法对小鼠感染HSV-1后MMP-2、MMP-9、MMP-8、TIMP-1、TIMP-2的表达变化进行研究,探讨它们在单疱病毒性角膜炎发展过程中所起的作用。结果:在对照组,角膜中MMP-2、MMP-8、MMP-9及TIMP-1、TIMP-2在第2天出现表达且表达主要位于浅表基质层及上皮下的炎性细胞中。感染后第14天可见坏死性角膜炎及角膜溃疡形成,同时角膜基质和浸润的炎性细胞中尤其溃疡处,可见MMP-2、MMP-9及TIMP-1、TIMP-2表达显著增加。溃疡区域有大量MMP-8阳性染色的中性粒细胞。实验组各时间点MMP-2,-9,-8活性均低于对照组,TIMPS表达高于对照组。结论:行羊膜移植可抑制角膜细胞和浸润的炎性细胞分泌产生MMPs,促进TIMPS表达,可能对上皮性角膜炎与溃疡形成过程起重要的抑制作用。     

阻力指数比率对梗阻性积水肾功能的评估

目的:探讨多普勒超声肾内阻力指数比率在诊断单侧梗阻性肾积水及对积水肾功能的可复性评估的临床应用价值。方法:用多普勒超声检测53例单侧梗阻性肾积水患者主肾动脉、肾段动脉及叶间动脉的多普勒频谱,检测指标为收缩期最大峰值流速(Vmax)、舒张末最低流速(Vmin)、阻力指数(RI)和阻力指数比率(RIR),并且进行术前、术后3月和6月的动态观察,同时静脉尿路造影(IVU)对比,正常对照组36例。结果:53例单侧梗阻性肾积水患者中,中度肾积水和重度肾积水的RI及RIR均升高,但以RIR更为显著(P<0.01),轻度肾积水RIR升高(P<0.05)比RI(P>0.05)显著;梗阻解除术后动态观察RIR比RI恢复更为明显、迅速。结论:肾内阻力指数比率(RIR)为单侧梗阻性肾积水的诊断及积水肾功能的可复性评估提供了一种简便有效的方法。     

原发性视神经萎缩的视网膜电图明视负向反应研究

目的:研究原发性视神经萎缩的视网膜电图(ERG)明视负向反应(PhNR)变化特点,并进行PhNR与视网膜神经纤维层厚度(RNFLT)、视野平均缺损值(MD)、杯盘比(C/D)的相关性研究,探索PhNR在原发性视神经萎缩的诊断及视神经节细胞功能评价中的作用。方法:选取正常健康者20例20只眼和原发性视神经萎缩的患者18例20只眼。分别对两组进行ERG、视野、眼底照相和OCT检查,比较两组视网膜电图PhNR振幅,并将原发性视神经萎缩组的PhNR振幅分别与MD、C/D和RNFLT进行相关性分析。结果:原发性视神经萎缩组和对照组的ERG中暗视反应、最大反应、30Hz震荡电位的振幅差异无显著性意义,视神经萎缩组明视反应a波和b波振幅差异也没有显著性意义,但原发性视神经萎缩组的PhNR振幅比对照组明显下降(P<0.01),而且PhNR的振幅与视神经损伤情况如RNFLT(r=0.665)、MD(r=0.564)、杯盘比(r=0.686)等相关(均为P<0.01)。结论:原发性视神经萎缩眼视网膜电图PhNR振幅明显下降甚至消失,PhNR可用于原发性视神经萎缩的诊断和神经节细胞及其轴突功能的评价。     

小鼠隐睾模型制作方法的改进

目的:简化隐睾模型的制作方法,提高隐睾模型的质量。方法:60只68周龄昆明白小鼠随机分为实验组、模型对照组、正常对照组,每组20只。实验组,速眠新麻醉,常规消毒阴囊,将睾丸挤入腹腔,于阴囊根部连续性缝合结扎阴囊。模型对照组用经典的方法,切开腹壁,将睾丸脂肪垫靠近附睾处固定在腹壁,关闭腹腔。3组均饲养75d后,切取睾丸进行形态学和组织化学比较。结果:实验组无死亡,切取睾丸时腹腔内未见粘连,模型对照组死亡率10%,腹腔内均见粘连。两组睾丸形态、大小相似,均较对照组小;形态学比较,实验组与模型对照组相似,管腔内未见成熟精子,与正常对照组比较,细胞形态改变相似;3β羟类固醇脱氢酶(3βHSD)染色显示实验组与模型对照组酶含量无显著性差异(P>0.05),较对照组低(P<0.01)。结论:这种新的方法操作简单,没有粘连,模型质量较经典的方法好。     

幽门螺杆菌阳性十二指肠球部溃疡患者红细胞免疫功能的变化

目的:探讨幽门螺杆菌(Hp)阳性十二指肠球部溃疡患者红细胞免疫功能的变化。方法:47例Hp阳性十二指肠球部溃疡和32例健康体检者入选,前者以标准方案治疗7d,后者不予处理作为对照。治疗前后分别以流式细胞仪测定其血液红细胞上CR1的数量,以免疫粘附酵母菌花环法测定其活性。结果:与正常人相比,Hp阳性十二指球部溃疡红细胞C3b受体花环率、红细胞CR1数量降低(P<0.01),红细胞免疫复合物花环率增高(P<0.01)。结论:Hp的感染可能是导致十二指肠球部溃疡患者红细胞免疫功能低下的原因。