楮实子水提物对二乙基亚硝胺诱发小鼠肝细胞癌的抑制作用及PTEN/PI3K/Akt信号通路的影响

目的：基于同源性磷酸酶-张力蛋白(PTEN)/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路探讨楮实子水提物对二乙基亚硝胺(DEN)诱发小鼠肝细胞癌(HCC)的抑制作用。方法：采用腹腔注射DEN的方法构建原发性HCC小鼠模型，将HCC小鼠随机分为模型组、索拉非尼组(0.01 g·kg^-1·d^-1)、楮实子水提物低、中、高剂量组(0.9、1.8、3.6 g·kg^-1·d^-1)，每组10只；另取10只C57BL/6小鼠作为空白组，腹腔注射等体积生理盐水。在小鼠肝脏出现肝癌样白色结节后灌胃给予不同浓度的楮实子水提物；索拉非尼组给予索拉非尼灌胃；空白组和模型组小鼠给予生理盐水灌胃。生化分析仪检测小鼠血清碱性磷酸酶(ALP)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)及γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)活性；酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测肿瘤标志物甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)表达水平；苏木素-伊红(HE)染色及马松(Masson)染色观察肝细胞癌变程度及肝细胞损伤情况；...     

基于谱效关系的核桃楸皮治疗肝癌药效物质基础研究

目的 基于核桃楸皮不同极性部位HPLC指纹图谱与抗肝癌作用的谱效关系，筛选出核桃楸皮治疗肝癌的药效物质，揭示其治疗肝癌的药效物质基础。方法 采用HPLC法建立核桃楸皮不同极性部位的指纹图谱；采用CCK-8法开展核桃楸皮不同极性部位治疗肝癌的体外药效学研究；采用灰色关联度分析法及偏最小二乘回归分析法，将指纹图谱共有峰峰面积与药效学数据相关联，建立核桃楸皮不同极性部位治疗肝癌体外谱效关系，筛选出其治疗肝癌的药效物质，并进行体外药效验证。结果 不同极性部位指纹图谱中共24个共有峰，其中有8个峰与药效呈正相关且VIP值大于1，确认这8种成分为核桃楸皮治疗肝癌的药效物质。经对照品比对，指认出4号峰为丁香酸、9号峰为鞣花酸、10号峰为槲皮苷、16号峰为山柰酚。结论 本研究通过建立谱效关系筛选出了核桃楸皮治疗肝癌的药效物质，揭示了核桃楸皮治疗肝癌的药效物质基础。     

基于高通量测序技术对人参花及其易混淆品鉴定研究

目的 利用高通量测序技术对人参花及其易混淆品进行鉴定，并利用ITS2测序技术验证高通量测序技术对物种鉴定的准确性。方法 对人参花掺伪样品扩增产物进行高通量测序，使用cutadapt、PEAR、PRINSEQ、Usearch、RDP classifier、SINTAX软件获得分类单元(operational taxonomic unit，OTU)序列，舍弃菌类、unclassified等非绿色植物序列；为避免假阳性情况发生，删除序列数<100条或碱基数<200 bp的OTU序列。对人参花、西洋参花、三七花的ITS2扩增产物进行测序，利用MEGA 11.0对人参花、西洋参花、三七花的ITS2、OTU、GenBank上下载的碱基序列构建邻接法系统聚类树、遗传距离、种间信息位点及对ITS2、OTU碱基序列分别进行Blast分析来验证高通量测序技术对物种鉴定的准确性。通过构建ITS2及OTU碱基序列二级结构对人参花、西洋参花、三七花进行比对分析，根据物种间二级结构的不同对物种进行鉴定。结果 高通量测序共得到54 653条有效序列，人参花、三七花、西洋参花的序列号分别为OTU1、OTU2、OTU3及对应的有效序列分别为31 325，857，442条。通过对各物种的ITS2及OTU碱基序列进行Blast检索，均支持各个物种。人参花与西洋参花、三七花种间遗传距离分别为0.010，0.033，人参花与西洋参花、三七花分别有2，7个信息位点；邻接法系统聚类树显示各个物种均独立聚为一支，其中人参花与西洋参花聚为一大支与三七花并列。人参花与西洋参花二级结构一致，但与三七花在臂Ⅳ及臂Ⅳ与臂Ⅰ之间有A、B、C 3处不同。结论 基于高通量测序技术能够准确鉴定人参花、西洋参花、三七花，对掺伪样品亦具有较强的鉴别能力，为市售人参花样品鉴定提供一定思路。     

灰色关联分析中药蒲公英不同部位对RAW264.7细胞的抑制作用

目的 研究蒲公英不同部位化学成分的差异及其对RAW264.7细胞的抑制作用区别，探讨蒲公英不同部位的精准应用。方法 使用HPLC建立不同部位的液相图谱并进行成分指认，使用MTT法测定不同部位提取物对炎症细胞RAW 264.7增殖的抑制作用，使用灰色关联软件，将色谱峰的峰面积与抗炎药效相关联，计算每个成分的贡献率。结果 蒲公英根、茎、叶、花中的成分种类与含量均不同。在体外药效研究中，蒲公英花的效果最好，对炎症细胞RAW264.7的抑制率达到65.51%。蒲公英根、叶次之，蒲公英茎对炎症细胞的抑制作用不大。灰色关联分析结果显示，绿原酸、橙皮苷、香叶木素、木犀草素、异鼠李素对抑制炎症细胞增殖的贡献程度与其他成分相比存在较大差异。结论 蒲公英不同部位的体外药效存在差异，本实验明确了蒲公英的精准药用部位。     

刺五加与山楂水提物不同比例混合对小鼠抗抑郁作用的实验研究

目的 研究刺五加与山楂水提物不同比例混合对小鼠的抗抑郁作用.方法 测定不同比例混合的刺五加与山楂水提物对小鼠行为绝望、旷场实验以及脑内单胺氧化酶(MAO)的影响.此外,通过腹腔注射利血平建立小鼠抑郁症模型,测定不同比例混合的刺五加与山楂水提物对利血平效应的影响.结果 刺五加与山楂水提物采用2:1的比例混合可明显对抗小鼠行为绝望,增多小鼠旷场实验水平得分以及垂直次数,显著降低小鼠脑内单胺氧化酶活性.明显拮抗利血平效应引起的小鼠眼睑下垂及体温下降.结论 刺五加与山楂水提物采用2:1的比例混合对抑郁症有明确的治疗作用.