实验小鼠肠道正常菌群

在动物肠道中栖息的细菌，构成了肠道正常菌群。实验动物的质量与肠道菌群的状态有着十分密切的联系，肠道菌群平衡状态在维持动物机体的生理状态、正常功能，以及抵抗外袭菌方面起着重要的作用。小鼠肠道中，每克肠内容物含有上亿个菌体，可分为10～15个属，上百个种。肠道正常菌群的主要菌属有双歧杆菌、拟杆菌(类杆菌)、肠球菌、乳杆菌、梭杆菌、真杆菌。不同品系的小鼠之间，各种菌的数量有所不同。本文简要介绍了近年来对小鼠肠道正常菌群的研究进展。     

烟碱对脑单胺类受体功能及基因表达的调节作用

目的研究烟碱对多巴胺受体、肾上腺素受体、5-羟色胺受体功能及基因表达的影响.方法 (1)昆明种小鼠给予生理盐水或烟碱(2mg/kg, i.p., 3/日, 10天).第11日分别腹腔注射烟碱(2mg/kg), 阿扑吗啡(3mg/kg),可乐定(1mg/kg), 8-OH-DPAT(1mg/kg),记录给药前、后自主活动各15min;(2)SD大鼠注射生理盐水或烟碱(1.2mg/kg, 2/日,SC,14天),第15天取脑作基因芯片,分析单胺类受体mRNA表达的改变.结果反复给予烟碱可诱导小鼠对烟碱降低自主活动的作用产生耐受,在对烟碱产生耐受的小鼠上,多巴胺受体激动剂阿扑吗啡增加自主活动的作用增强; α2-肾上腺素受体和5-HT1A受体激动剂可乐定和8-OH-DPAT抑制自发活动的作用减弱.在大鼠上, 反复给予烟碱可增加脑多巴胺D1 受体mRNA表达,降低多巴胺D3受体mRNA表达,不影响α2-肾上腺素受体、5-HT1A受体mRNA的表达.结论反复给予烟碱诱导烟碱耐受,脑N受体功能失敏时, 单胺类受体及其亚型功能或/和受体mRNA表达发生变化.     

A型肉毒毒素多表位串联体的设计、表达、纯化及鉴定

目的:设计、表达两个A型肉毒毒素多表位串联体.方法:从文献报道的A型肉毒毒素(botulinum neurotoxin type A,BoNT/A)的表位及生物信息学方法预测得到的B细胞表位中遴选表位,并加入适当的辅助性元件,设计多表位串联体A、B.对其基因进行优化后,经重叠PCR方法合成串联体A、B的全长基因.分别插入原核表达载体pQE-30,再转化E.coli M15[pREP4]感受态细胞中进行诱导表达,以金属螯合亲和层析法纯化重组蛋白,并进行鉴定.结果与结论:成功设计并构建了两个多表位串联体A、B,并在E.coli中以包涵体形式获得高效表达.Ni-NTA法纯化后分别获得纯度大于92.2%、99%的重组串联体A、B蛋白,并经透析复性法复性.Western印迹和间接ELISA显示纯化、复性后的重组蛋白与抗天然BoNT/A马血清有特异性结合反应.     

大鼠脊髓损伤修复差异表达cDNA文库的构建

目的　 运用改良消减杂交技术构建大鼠脊髓损伤修复过程中出现的差异表达基因文库 ,为寻找在脊髓损伤后的修复过程中起关键作用的分子提供帮助。方法　在经典消减杂交的基础上引进SMART反转录、长距离PCR、磁性分离系统、离心柱色谱等方法建立改良消减杂交技术 ,通过两轮消减杂交构建差异表达基因的cDNA消减文库 ,并对文库中的差异基因进行批量克隆与生物信息学分析。结果　 将两轮消减杂交后的差异表达基因转化大肠杆菌JM10 9以建立差异表达基因文库 ,库容量大小为 2× 10 3。从文库中随机挑取 90个克隆进行酶切鉴定与测序分析 ,得到 4 0个差异基因序列 ,其中 32个已知序列 ,8个新序列。 结论　 通过改良消减杂交成功建立了脊髓损伤修复过程中出现的差异表达基因文库 ,为筛选在大鼠脊髓损伤修复过程中起关键作用的基因 ,进一步探讨脊髓损伤修复的分子机制奠定了基础     

肿瘤干细胞蛋白质组学研究进展

当前，恶性肿瘤的发病率已上升到我国疾病谱的第二位，而且随着环境污染的加剧、人口老龄化等因素的影响，还呈进一步升高的趋势，恶性肿瘤正严重危害着我国人民的身体健康和阻碍了我国社会、经济的发展。但目前人类对恶性肿瘤的研究尚未取得根本性突破，对于恶性肿瘤的本质是什么，如何有效控制它的发生发展等问题还处于探索之中。肿瘤干细胞（cancer stem cell，CSC）是在造血干细胞（hematopoietic stem cell，HSC）、白血病干细胞（1eukemic stem cell，LSC）概念的基础上总结延伸出来的，由Reya等…首次提出并初步阐述。这一概念试图从一个全新的角度诠释癌细胞的起源、癌组织的异质性、部分癌细胞的永生性和转移能力差异等肿瘤生物学行为，一经提出立即引起广大科研工作者的浓厚兴趣，近几年来在Nature等权威刊物上发表的关于CSC的文章明显增多。但CSC研究在日益引起人们重视和取得一些进展的同时也面临许多技术瓶颈和困难。肿瘤的蛋白质组学研究是肿瘤研究中极其重要的一方面，对于阐明肿瘤的发生发展机制，为其诊断、治疗、预后判断提供依据等方面都具有重要意义。因此，如何尽快运用蛋白质组学研究的技术方法剖析CSC，提高我们对肿瘤的认识，并最终提高人类对肿瘤的诊治水平，将是广大肿瘤相关科研工作者努力的方向之一，本文将从这些方面作一综述。     

亚致死量溴氰菊酯处理对淡色库蚊产卵与孵化的影响

<正> 近年来,用亚致死剂量的杀虫剂处理后对媒介昆虫吸血行为与产卵的研究得到重视。作者为了进一步了解亚致死剂量溴氰菊酯处理淡色库蚊(Cnlex pipiens pallens)后对其产卵与卵孵化等有无影响,于1989年—1990年在实验室进行了初步观察。     

WR-2721对γ线照射小鼠胃排空的防护作用

小鼠经γ线1200rad照射后胃排空受到明显抑制,如照前15min腹腔注射WR-2721 5mg或10mg对照后3天胃排空的抑制有明显改善。虽然WR-2721药物本身对胃排空具有一定的抑制作用,但经过24～48h后则可表现出对胃排空有一定程度的改善效应,这可能与该药减轻急性放射损伤的过程有关。     

新疆出血热病毒与流行性出血热病毒的生物学特性比较

本文通过免疫荧光(IF)和电镜(EM)技术对新疆出血热(XHF)及流行性出血热(EHF)病毒的生物学特性在Vero E_6及LLC-MK_2两株传代细胞上进行了比较。两种病毒感染两株细胞后免疫荧光染色有两种不同的荧光形态特征,两种病毒对细胞的敏感性明显不同,XHF病毒在LLC-MK_2细胞上感染后6～8天可出现明显的细胞病变,而EHF病毒感染此细胞后则不引起病变。电镜观察到两种病毒在LLC-MK_2细胞中都能形成与布尼病毒相似的形态特征。     

小鼠多向祖细胞的体外培养

本文介绍小鼠多向祖细胞(CFU-mix)的测定方法,培养体系包括IM-DM,2-ME,转铁蛋白-铁,牛血清白蛋白V,PWM-SCM及EPO。在36.5℃,7%CO_2,饱和湿度下培养10～14天。本文用实验数据表明培养体系中EPO量不能少于0.5U/皿,PWM-SCM占10%为宜,转铁蛋白则应加300μg,植入的骨髓细胞量与CFU-mix集落数有线性正比关系。