探讨鉴别诊断肺癌与肺感染患者的生物标志物

目的:探讨肺癌与肺感染患者之间生化成分含量以及蛋白组学变化,用于筛选诊断恶性胸腔积液的生物标志物。方法:(1)分别测定肺癌和肺感染患者血清和胸腔积液总蛋白、白蛋白、甘油三酯等10项生化成分含量,进一步比较两组之间各项指标的胸腔积液与血清的比值。(2)基质辅助激光电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析TTR蛋白化学修饰。结果:(1)肺癌患者血清中CHO、ApoA-1、TTR蛋白含量明显高于肺感染患者;而肺感染患者胸腔积液中ADA的活性高于肺癌患者。(2)计算个体胸腔积液与血清生化成分含量比值,肺癌患者TTR蛋白比例显著高于肺感染患者,ADA减低,与血清变化趋势相同,但更加明显。(3)肺癌患者及肺感染患者血清TTR蛋白均出现3种修饰类型,而肺癌患者胸腔积液中cysgly-TTR明显增高。结论:联合分析胸腔积液与血清TTR蛋白的比值和化学修饰,可能有助于鉴别诊断肺癌与肺感染。     

基于Faster R-CNN及增强CT图像自动检测肝血管瘤

目的 基于快速区域卷积神经网络（Faster R-CNN）构建肝血管瘤自动检测系统,观察其检出增强CT图像中的肝血管瘤的效能。方法 收集经腹部增强CT诊断的128例肝血管瘤患者、共2 304幅增强CT图像,按8∶2比例将其分为训练集（n=102）和测试集（n=26）,分别含1 836幅及468幅增强CT图像。利用Faster R-CNN、针对增强CT图像构建自动检测肝血管瘤系统,基于迁移学习方案,采用Resnet50预训练分类网络作为提取特征模块的基础骨架,以区域提议网络提取训练集增强CT图像特征,以边界框分类回归模块输出预测边框的精确位置坐标和类别的概率分数。训练过程中绘制Loss曲线,评估模型对训练集的训练效果及其稳定性;采用随机梯度下降法作为优化器对参数进行调整,以提升模型性能。通过平均精度均值（mAP）评估系统检出测试集增强CT图像中的肝血管瘤的效能。结果 训练集训练过程损失函数Loss曲线中,自动检测系统呈快速下降趋势,提示模型学习能力良好,预测性能稳定。mAP曲线显示,迭代次数epoch为40~80时,系统对测试集468幅增强CT图像检出肝血管瘤的mAP为0.962~0.973,波动小,提示模型已收敛,自动检测效果良好。结论 基于Faster R-CNN的增强CT图像自动检测系统可有效检出肝血管瘤。     

重楼皂苷Ⅱ联合喜树碱对肺癌H460、H446细胞凋亡及信号通路的影响

[目的]观察重楼皂苷Ⅱ（PSⅡ）联合化疗药物喜树碱（CPT）对肺癌细胞的作用及机制。[方法]采用噻唑蓝（MTT）法检测PSⅡ联合CPT对非小细胞肺癌（NSCLC）细胞（H460）以及小细胞肺癌（SCLC）细胞（H446）的抑瘤效果。平板克隆法观察PSⅡ联合CPT作用于肺癌细胞后的细胞克隆形成率;流式细胞仪检测细胞凋亡情况。蛋白免疫印迹法（Western blot）检测PSⅡ联合CPT对肺癌细胞蛋白激酶B（AKT）、细胞外信号调节酶（ERK）、p38 MAPK的磷酸化活性及抗凋亡蛋白B淋巴细胞瘤（Bcl）-2、Bcl-XL的表达。[结果]MTT实验结果显示PSⅡ联合CPT对肺癌细胞有细胞毒活性并呈现剂量依赖性,且在细胞克隆实验中观察到两者具有很强的协同作用;两者联合增加了H460、H446细胞的晚期凋亡率,且显著增加了H446的早期凋亡率（70.10±3.44）%。Western blot结果显示,PSⅡ联合CPT作用于H460细胞,能明显上调p38 MAPK和ERK的磷酸化蛋白表达,对AKT磷酸化无明显作用,并下调了Bcl-2和Bcl-XL蛋白的表达。PSⅡ联合CPT作用于H446细胞,上调了AKT、p38 MAPK和ERK的磷酸化蛋白表达,并下调了Bcl-2蛋白的表达,对Bcl-XL无明显作用。[结论]PSⅡ可以作为CPT的增敏剂用于肺癌的治疗,为PSⅡ用于肺癌的治疗提供了依据。     

多重荧光定量PCR检测婴幼儿腹泻病毒感染及其临床应用

目的:建立一种能同时检测婴幼儿腹泻粪便中常见病毒的多重荧光定量 PCR技术。方法:根据GenBank上几种病毒基因组保守序列设计引物序列,建立多重荧光定量PCR方法,对所建立的多重荧光定量PCR方法的特异性、灵敏性及重复性进行验证;并以所建立的方法对150例婴幼儿病毒性腹泻患者粪便标本进行检测。结果:所建立的多重荧光定量PCR检测方法具有很好的特异性,灵敏性检测可达102拷贝/mL,检测不同病毒核酸浓度各自的检测 Ct 值标准差均较小,变异系数均低于1.0%,具有较好的重复性;检测150 份粪便标本,多重荧光定量 PCR 的检出率为36%,胶体金方法检出率为38.67%,两者比较差别无统计学意义（χ2= 6.91,P > 0.05）。多重荧光定量 PCR方法中轮状病毒、腺病毒、诺如病毒、星状病毒的检出率分别为12.67%、6.00%、13.33%和4.00%,测序结果与已知病毒株基因都具有高度同源性。结论:所建立的多重荧光定量PCR方法快速、特异、灵敏,可以作为临床病原诊断的一个重要工具且适用于流行病学调查研究。     

TNF-α/calreticulin dual signaling induced NLRP3 inflammasome activation associated with HuR nucleocytoplasmic shuttling in rheumatoid arthritis

Inflammation Research - The present study was undertaken to validate whether TNF-α and calreticulin (CRT) serve as dual signaling to activate nucleotide-binding oligomerization domain-,...     

化瘀逐痰方治疗痰瘀互结高脂血症临床观察

目的　观察化瘀逐痰方的降脂疗效。方法　 98例高脂血症患者 ,随机分组 ,治疗组50例 ,对照组 48例 ,分别口服化瘀逐痰方 1 0 0 ml,每日 2次 ,藻酸双酯钠 ( 0 .1 g/片 ) 2 0 0 mg,每日 3次 ,疗程皆为 8周。结果　化瘀逐痰方治疗后 ,血清胆固醇 ( TC)、甘油三酯 ( TG)明显降低 ,治疗前后有显著性差异 ( P <0 .0 1 ) ,藻酸双酯钠治疗后 TC、TG亦显著降低 ( P <0 .0 1 ) ,但 2组比较 ,TC、TG的降低有显著性差异 ( P <0 .0 1 ) ,化瘀逐痰方组优于藻酸双酯钠组。结论　化瘀逐痰方能有效降低血中 TC、TG,疗效可靠     

肠道微生态研究技术在代谢综合征中的应用

哺乳动物肠道内定居着数量庞大且组分复杂的微生物群,它们共同构成了肠道微生物组。近年来,人们逐渐认识到肠道微生物与一些疾病的发生和发展密切相关,如代谢性疾病、炎症性肠病、肿瘤、免疫系统以及神经系统疾病等,使得肠道微生物成为研究的热点。迅猛发展的微生物研究技术为我们提供了高效有力的技术平台,推动了对肠道微生态的系统认知,也为疾病的诊断及治疗开辟了新思路。本文旨在总结与分析目前常用微生态研究技术的最新进展及其局限性,为进一步的肠道微生物组研究提供参考,并简要介绍肠道微生态与代谢综合征的相关研究成果。     

己糖对杜兴肌肉萎缩症核酸药物Pip5e-PMO跳读活性研究

目的:在杜兴肌肉萎缩症模型上探究己糖混合物对核酸药物Pip5e-PMO介导的外显子跳读活性的促进作用。方法:选择成年mdx小鼠为测试动物模型,通过局部肌肉和系统尾静脉注射,比较Pip5e-PMO与己糖和生理盐水联用的作用效果,利用免疫荧光（IHC）和蛋白印迹法（Western blot）检测dystrophin阳性肌纤维的数量和分布及dystrophin蛋白的表达水平;利用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测外显子跳读。结果:在局部肌肉给药试验中,己糖能够促进Pip5e-PMO诱导dystrophin蛋白表达水平（P<0.05）。在系统试验中,对己糖和生理盐水组比较发现:按15 mg/kg的剂量单次系统尾静脉注射Pip5e-PMO,骨骼肌中dystrophin蛋白表达恢复至正常水平的50%;在心脏中,也检测到明显的dystrophin恢复表达和外显子跳读。但两组无显著性差别（P>0.05）。结论: Pip5e-PMO可诱导有效的外显子跳读和dystrophin蛋白表达,但己糖对其促进效果有限。     

系统性老年性淀粉样变患者血清转甲状腺素蛋白出现三种修饰基团减少

目的:探讨转甲状腺素（TTR）蛋白代谢修饰与淀粉样变形成的分子机制。方法:本研究首先利用ProteomeLabPF-2D系统依据蛋白质等电点分选各个pH值范围蛋白质,然后利用抗人TTR抗体,点免疫印迹实现鉴定TTR蛋白存在于被收集的范围。利用硫黄素T（ThT）试剂,测定各个收集部分溶液中淀粉样变的含量,进一步利用飞行质谱的表面增强激光解吸/电离时间（SELDI-TOF-MS）分析各个部分TTR蛋白的修饰类型。结果:系统性老年性淀粉样变（SSA）患者和健康志愿者血清pH范围分别为 8.1～8.0,4.0～4.6及6.8～5.8范围时出现高丰度蛋白。并且SSA患者pH6.8~5.8范围淀粉样变含量明显高于对照组（P＜0.05）,其中SSA组与健康组相比,血TTR 蛋白N端氨基酸修饰基团包括磷酰基（Phosphoryl）、羟基（Hydroxyl）、葡萄糖胺（O-GlcNac）基团修饰阴性。结论:SSA患者血TTR 蛋白N端氨基酸修饰基团Phosphoryl、Hydroxyl、O-GlcNac的减少可能与淀粉样蛋白的形成有关。