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61.
目的 :观察HSV1 tk/GCV基因治疗系统与 5 FU序贯应用 ,对卵巢上皮癌SKOV3细胞的体内杀伤效应。方法 :建立裸鼠卵巢癌皮下移植瘤模型 ,免疫组化检测移植瘤组织中表皮生长因子受体 (EGFR)的表达 ;于瘤周分别注射GE7 β gal、GE7 HSV1 tk复合物 ,用X gal及RT PCR检测两种基因的表达 ;取 2 4只荷瘤裸鼠随机分成空白对照组、5 FU组、GE7 HSV1 tk/GCV组及GE7 HSV1 tk/GCV/5 FU组进行实验 ,观察肿瘤体积及重量的变化 ,计算各组抑瘤率。结果 :移植瘤中有较高的EGFR表达 ,β gal基因及HSV1 tk基因经瘤周注射导入移植瘤后均有不同程度的表达 ,5 FU组、GE7 HSV1 tk/GCV组及GE7 HSV1 tk/GCV/5 FU组抑瘤率分别为 14 .6 %、39.4 %和 6 0 .5 % (P <0 .0 5 )。结论 :HSV1 tk/GCV和 5 FU序贯治疗能有效地抑制肿瘤生长 ,并能有效地抑制单纯使用HSV1 tk/GCV系统治疗后的远期反跳作用 ,提高卵巢癌基因治疗的远期疗效。 相似文献
62.
目的探讨肿瘤相关新基因pp4519在肺癌细胞系、人肺癌及癌旁组织中表达差异及其初步生物学功能.方法合成肿瘤相关新基因pp4519特异性多肽,免疫家兔制备兔源性多克隆抗体;从体外细胞集落形成试验,生长曲线,裸鼠体内成瘤试验,半定量RT-PCR,蛋白印迹,免疫细胞化学及免疫组化检测pp4519基因的表达差异,以及转染肺癌细胞系的细胞凋亡检测等方法研究pp4519基因对体内外细胞生长和生物学功能的影响.结果 SPC-A1肺癌细胞系的体外集落形成试验表明,pp4519基因转染组集落形成数明显少于空载体组(P<0.05);转染pp4519基因的肺癌细胞系的裸鼠体内成瘤试验结果表明该基因对SPC-A1细胞系的成瘤有明显抑制作用(P<0.01);瞬时转染细胞的流式细胞凋亡检测结果表明该基因具有促进SPC-A1细胞凋亡的作用;半定量RT-PCR,蛋白印迹检测结果表明肺癌及癌旁组织中pp4519 RNA和蛋白表达无明显差异(P>0.05),但免疫组化结果显示PP4519在人肺癌癌旁组织中的表达略高于肺癌.结论 pp4519是一个具有抑制肺癌细胞生长功能的新基因. 相似文献
63.
目的 探讨细胞经紫外处理后CRLP与DNA修复的相关性。方法 将插入反义CRLP的pcDNA3.1/V5-His质粒用脂质体介导法转染BEL7402肝癌细胞,G418筛选获得的细胞用15J/m^2的紫外作用,4h后用Annexin V-EGFP试剂处理细胞,荧光激活细胞分选法测定细胞凋亡比例。另外用RT-PCR和Northern杂交的方法检测了肿瘤细胞株和多组织中的CRLP的表达。结果 转染反义CRLP质粒的细胞株经紫外处理后,统计学处理表明凋亡比率显著高于对照;该基因在所检测的肿瘤细胞株和各类组织中均有表达。结论 CRLP基因的表达受到抑制以后可能通过影响细胞DNA修复能力降低细胞抗紫外杀伤的能力。 相似文献
64.
CPGL的基因结构及其与肝癌相关性的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 克隆carboxypeptidase of glutamate like(CPGL)全长cDNA,初步探讨它在肝癌发生发展中的作用。方法 通过5’-RACE方法和RT-PCR验证,确定(CPGL)全长序列,根据其全长与人类基因组的比较进而确定基因的染色体定位和其外显子、内含子;应用Western Blot方法检测CPGL在肝癌组织和癌旁组织中的表达;细胞克隆形成及生长曲线检测CPGL对肝癌细胞生长的影响。结果 CPGL全长2616bp,编码475个氨基酸的蛋白,染色体定位于18q22.3,蛋白产物定位于细胞质中,Western Blot结果发现CPGL在肝癌组织中的表达明显低于癌旁组织。将CPGL转染肝癌细胞系SMMC7721发现其具有抑制生长的作用。同源比较发现CPGL含有M20蛋白酶家族的保守功能域。结论 上述发现表明CPGL是具有潜在抑癌作用的基因。 相似文献
65.
尿沉淀细胞DNA的甲基化谱式分析和膀胱癌的诊断 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:寻找并评估通过对尿沉淀细胞DNA甲基化分析检出膀胱癌的基因组合。方法:甲基化特异性PCR(methylation specific polymerase chain reaction,MSP)。结果:对3株膀胱癌细胞系进行的20个基因启动子区域CpG岛甲基化状态分析发现,除BRCA1以外其他基因至少在细胞株的1个等位基因呈高甲基化状态。对40例膀胱癌组和3组非膀胱癌对照组的尿沉淀细胞DNA进行了6个基因甲基化状态分析发现,SALL3在膀胱癌组甲基化率为67.5%(27/40),MT1A为50.0%(20/40),HPP1为50.0%(20/40),MYOD1为37.5%(15/40),BRCA1为32.5%(13/40),TMS1为5.0%(2/40)。这6个基因在3个非膀胱癌对照组,即非肿瘤性泌尿生殖系统疾病患者23例、脑外科患者6例和正常人群7例均呈去甲基化状态,所以可以受试基因中任一个基因呈现高甲基化状态作为膀胱癌的指征,该法检出膀胱癌的敏感性为90.0%(36/40)。结论:对这5个基因在尿沉淀细胞DNA中甲基化状态的检测可望有效地检出膀胱癌。 相似文献
66.
要用系统性疾病的观念重新认识癌症 总被引:5,自引:0,他引:5
自19世纪末Virchow将恶性肿瘤定义为局部组织细胞异常生长以来,癌症已被研究了一个多世纪。随着细胞生物学、分子生物学以及基因组学等基础研究的发展以及临床治疗方面的进步,对某些恶性肿瘤,如早期宫颈癌、乳腺癌、胃癌、结肠癌等已可达到根治;某些临床中期的癌症生存期也有显著提高。但是,许多恶性肿瘤的治疗迄今未根本解决。 相似文献
67.
XRCC 1 Arg399Gln基因多态性对铂类药物化疗胃癌患者预后的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:研究DNA修复酶X射线损伤交叉互补蛋白1(X-ray repair cross-complementary protein1,XRCCl)基因Arg399Gln多态性对接受铂类药物辅助化疗的胃癌患者预后的影响。方法:选取经病理学确诊的胃癌患者84例,采用含铂类药物的联合化疗方案进行辅助化疗。化疗前采集患者外周血,采用聚合酶链反应.连接酶检测反应(polymerase chain reaction-ligation detection reaction,PCR-LDR)技术检测XRCCl基因Arg399Gln的多态性。结果:84例胃癌患者中,49例(58.3%)携带XRCCl的399Axg/Arg基因型,30例(35.7%)携带Arg/Gln基因型,5例(6.0%)携带Gin/Gin基因型;截止到随访结束,分别有63.1%(53/84)和55.2%(43/84)的患者出现复发和死亡,其中携带Arg/Arg基因型的胃癌患者复发率和死亡率均显著低于携带Arg/Gln或Gln/Gln基因型患者(P〈0.05)。COX多因素分析显示,携带Arg/Arg基因型的患者具有较好的无复发生存期和总生存期预后(P〈0.05)。结论:XRCClArg399Gln基因多态性与术后胃癌患者接受铂类药物化疗后的预后有关,可以在一定程度上判断术后胃癌患者接受铂类药物化疗的预后情况。 相似文献
68.
目的:探讨SIOOA4蛋白在肝细胞癌、肝硬化、癌旁组织及正常肝组织中的表达及临床意义.方法:用组织芯片技术结合免疫组织化学法检测S100A4蛋白在肝癌相关组织中的表达差异,采用统计学方法分析其表达差异的临床意义.结果:免疫组织化学检测发现,S100A4蛋白在人原发性肝细胞癌、硬化肝组织、癌旁肝组织中表达较高,在正常肝组织中表达则很低,表达阳性率分别为70.2%、54.4%、41.7%和0.0%;统计学分析结果表明,S100A4蛋白表达影响肝癌患者的术后生存期,低表达患者的生存期比高表达患者延长.结论:S100A4蛋白在肝癌及相关组织中的表达率依次为,肝细胞癌>癌旁肝>肝硬化>正常肝,在非微血管侵袭肝癌患者中S100A4阳性表达可明显降低其术后生存率. 相似文献
69.
目的 新基因PP3105的克隆及其初步功能研究。方法 分离和克隆新基因PP3105的全长序列,在生物信息学分析的基础上,采用克隆形成、亚细胞定位、生长曲线等实验对该基因进行初步功能研究。结果 实验表明PP3105有两个不同的转录本,并表现出一定的组织特异性;染色体定位于4q22-24;蛋白定位于细胞膜和细胞浆中;克隆形成实验显示有明显的体外集落抑制作用;生长曲线实验表明PP3105在SMMC7721细胞中的表达对细胞增殖有抑制作用。结论 新基因PP3105可能是一个新的金属离子尤其是锌的转运蛋白,并且与肝癌细胞的生长、增殖相关。 相似文献
70.
肝癌相关基因HCAP1的定位克隆和初步功能研究 总被引:7,自引:0,他引:7
目的 克隆和筛选位于染色体 17p13.3缺失区内的肝癌相关基因。方法 采用定位克隆的策略 ,通过PAC筛库和RACE(rapidamplificationofcDNAends)方法克隆新基因 ;通过多组织膜片Northern杂交分析其组织表达谱 ,Southern杂交分析其在肝癌组织DNA水平上的变化 ,然后通过克隆集落形成实验与MTS法测定细胞生长速度 ,初步筛选其作为肿瘤相关基因的可能性。结果 克隆到一个基因HCAP1(HCC associatedprotein 1,先前又称HC5 6 ) ,GenBank登录号为AF177341。多组织膜片杂交显示该基因在多种组织中表达 ,其中胎盘、肝脏和肌肉中表达较高。Southern杂交结果显示HCAP1基因在肝癌组织中存在缺失 ,比例为 2 5 .3% ;克隆集落形成实验与生长抑制率测定实验初步表明该基因能抑制肝癌细胞株Hep3B细胞的生长 ,抑制率为 31.8%。结论 HCAP1可能与肝癌的发生发展相关 ,是一个新的肝癌相关基因的侯选者。 相似文献