正常肺及肺腺癌组织中细支气管肺泡干细胞相关指标的表达

目的检测人正常肺及肺腺癌组织中细支气管肺泡干细胞（BASC）相关指标,明确BASC是否在人肺组织中存在及其组织定位。方法采用组织免疫荧光方法将经过脱蜡、抗原修复好的组织切片通过5％脱脂奶粉溶液封闭检测,再通过先后加入一抗、二抗以及染核、封片等在荧光显微镜下观察,判定结果时可见合成蛋白复合物（SPC）和八聚体结合转录因子4（OCT4）阳性表达细胞呈绿色,Clara细胞分泌蛋白（CCSP）阳性表达细胞呈红色,而SPC／CCSP或CCSP／OCT4双阳性细胞呈黄色,细胞核呈蓝色。结果在人正常肺组织中可检测到SPC、CCSP及OCT4。免疫荧光检测显示,正常肺组织中均可检测到SPC、CCSP双阳性表达细胞,呈现BASC的表型特征,且均表达OCT4,定位于细支气管一肺泡导管连接处。在人肺腺癌组织中亦可检测到BASC样癌干细胞,在30例肺腺癌组织中26例同时检测出SPC及CCSP,属检测出BASC病例。18例同时检测出OCT4表达。结论人正常肺组织中可检测到BASC,且在肺腺癌组织中可检测到具有BASC表型特征的癌干细胞,提示人肺腺癌可能源自BASC的恶性转化。     

2002—2013年上海市唾液腺恶性肿瘤流行情况分析

目的:分析上海市2002—2013年唾液腺恶性肿瘤的人群发病状况,阐明疾病在本地区的流行病学特点。方法:根据上海市疾病预防控制中心提供的唾液腺恶性肿瘤病例资料,通过数据重新核实,采用SPSS 17.0软件包统计唾液腺恶性肿瘤的发病率、性别比、年龄分布状况、解剖部位占比以及病理分布情况;采用年均变化百分比、 χ²检验和Fisher精确检验,比较年度之间的变化情况。结果:2002—2013年,上海市共诊断唾液腺恶性肿瘤新发病例2 308例,发病粗率为13.93/100万,标率为8.54/100万,性别比为1.08∶1;中位首诊年龄为58岁。12年间,发病率变化平稳。唾液腺恶性肿瘤中,1/3来自小唾液腺,其中1/3来自腭腺;大唾液腺的发病比为12∶3∶1。黏液表皮样癌、腺样囊性癌和非特异性腺癌是最常见的3大病理类型。结论:目前上海市唾液腺恶性肿瘤的发病率较低,但不同部位、不同病理类型的好发人群差异较大,提示发病危险因素存在差异,值得关注。     

课题申请书撰写中要注意的几个方面

<正>医学院的教师、研究人员和附属医院的医师都面临着申请科研课题的问题。上海交通大学医学院每年都有大量的申请书递交到国家和上海市各级有关部门,而能够得到批准的申请只占其中一小部     

蛋白质部分水解配方奶粉对改善婴儿湿疹的作用观察

目的 探讨蛋白质部分水解配方(HA)奶粉对湿疹患儿的临床症状及免疫功能的影响.方法 将2006年4月-2008年8月就诊的符合人选条件的90例湿疹婴儿随机分为蛋白质部分水解配方奶粉组(HA组,n=60)和普通婴儿配方奶粉组(CMF组,n=30),两组均观察12周.除观察临床症状外,其中52例(HA组36例,CMF组16例)分别于观察日和第12周采集外周静脉血,检测相关实验室指标.结果 与CMF组相比,HA奶粉可改善湿疹的临床症状,明显升高Th1/Th2比值,应用HA奶粉前后差异有统计学意义(P<0.05).结论 HA奶粉可治疗婴儿湿疹,其作用机制可能与调节体内Th1/Th2的平衡有关.     

五行汤抗肿瘤及经钙离子介导的促肿瘤细胞凋亡作用

目的:明确五行汤的抗肿瘤作用并初步探讨其机制.方法:不同浓度五行汤处理培养肿瘤细胞, MTT检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率;琼脂糖凝胶电泳检测细胞DNA变化;电镜观察细胞形态变化;特异性荧光探针检测胞浆钙离子浓度变化.结果:五行汤对多种肿瘤细胞生长有较特异的抑制作用;五行汤处理后的SGC-7901细胞经流式细胞仪检测出现亚二倍体峰,并呈时间-浓度依赖性;琼脂糖凝胶电泳呈现的DNA Ladder;电镜显示五行汤处理后的SGC-7901细胞呈现凋亡特征;Fluo-3 AM染色荧光显微镜观察到胞浆钙离子浓度升高;胞内钙离子拮抗剂Bapta AM可以明显降低五行汤处理后SGC-7901细胞的凋亡率,且对细胞的保护作用呈浓度依赖性.结论:五行汤有较明确的抑制肿瘤细胞生长作用,可能通过钙离子介导的肿瘤细胞凋亡发挥作用.     

胰腺癌组织中p16基因缺失及其对p16蛋白表达的影响

目的 探讨胰腺癌组织中p16基因缺失状态及其对p16蛋白表达的影响。方法 采用聚合酶链反应技术分别检测经显微切割方法获取的p16蛋白免疫组化染色阳性和阴性的胰腺癌组织中p16基因纯合性缺失状态并将结果与p16蛋白表达之间的关系进行分析。结果 32例胰腺癌中分别有20例（62．5％）和21例（65．6％）表现为p16蛋白表达丢失和p16基因纯合性缺失，其中有5例发生于p16基因的第1外显子，12例缺失发生于第2外显子，1例发生于第3外显子，另有3例同时发生于第1和第2外显子。此外还发现无p16蛋白表达的胰腺癌组织发生p16基因纯合性缺失的比例（18／20，90．0％）高于有p16蛋白表达的胰腺癌（3／12，25．0％）；在无p16蛋白表达并伴有p16基因缺失的7例胰腺癌病人中仅有1例生存期超过5mo，而二者均无异常的3例胰腺癌的生存期均超过8mo。结论 胰腺癌组织中的p16基因纯合性缺失可以影响p16蛋白的表达，促使胰腺癌病人的预后更差。     

Tie2介导的基因导入系统转导p53基因对肺癌的抑制作用

目的：探讨Tie2介导的基因导入系统体内靶向转导p53基因治疗肺癌的效果。方法：应用双功能交联剂SMCC将Tie2配体寡肽GA3与PEI连接构建靶向Tie2的基因载体。体外试验将GA3-PEI/luciferase导入Tie2表达阳性的SPC-A1肺癌细胞与Tie2表达阴性的SMMC7721肝癌细胞中,24 h后检测luciferase活性。体内导入试验将GA3-PEI/β-gal复合物注射SPC-A1细胞裸鼠种植瘤周围皮下,同时设立PEI/β-gal组为对照;24 h后牺牲裸鼠,检测心、肝、脾、肺、肾和瘤体的β-gal表达。另外将另一批四周龄SPC-A1肺癌种植瘤裸鼠随机分为5组：（1）NS;（2）GA3;（3）p53;（4）PEI/p53;（5）GA3-PEI/p53;每组6只;皮下注射GA3-PEI/p53基因复合物,隔2天1次,并测量肿瘤长短径,计算瘤体积及抑瘤率。结果：GA3-PEI/luciferase组的luciferase活性在SPC-A1细胞中明显高于SMMC7721细胞（P〈0.05）。在种植瘤中可见较多蓝染细胞,心、肝、脾、肾组织中几乎不见篮染,肺支气管黏膜除外。与对照组比较,GA3-PEI/p53治疗组对肿瘤生长有明显抑制作用（P〈0.05）,其抑瘤率为61.29%。结论：GA3基因导入系统靶向转导p53基因,显著抑制肿瘤生长。     

EphA2在脑胶质瘤中的表达及意义

目的：探讨酪氨酸蛋白激酶受体EphA2在人脑胶质瘤中的表达及其与胶质瘤微血管生成之间的相关性。方法：用免疫组化方法检测66例人脑胶质瘤组织，2株成胶质细胞瘤细胞系（U251和U87）和10例正常脑组织中EphA2蛋白的表达情况。并用Western blot方法进一步验证高级别成胶质细胞瘤组织和正常脑组织中EphA2的表达情况。通过CD34免疫组化染色方法来计算胶质瘤组织中的微血管数（MVC），探讨EphA2的表达水平与胶质瘤的微血管生成之间可能存在的关系。结果：免疫组化结果表明：在所有检测的66例胶质瘤中，除3例低级别胶质瘤（Ⅰ～Ⅱ）未检测到EphA2表达外，其余均有不同程度的EphA2表达，阳性率为95．5％（63／66）；而10例正常脑组织中EphA2蛋白表达均为阴性，二者差异显著（P〈0．01）。并且高级别脑胶质瘤（Ⅲ～Ⅳ）中EphA2强阳性表达率为63％（29／46），明显高于低级别胶质瘤30％（6／20）的阳性表达率，二者差异显著（P〈0．01）。此外，肿瘤组织内微血管内皮细胞也有EphA2蛋白表达。Westernblot结果也进一步证实了成胶质细胞瘤组织和细胞系U251高表达EphA2蛋白，且U87表达水平明显低于U251，正常脑组织中检测不到EphA2蛋白条带。胶质瘤的微血管密度与EphA2蛋白表达水平有显著相关性（r=0．713，P〈0．01），EphA2表达强阳性的肿瘤区域有较高的微血管密度。结论：EphA2特异地表达于高级别胶质瘤中，而正常脑组织中则检测不到EphA2表达，提示EphA2有可能是恶性胶质瘤的一个新的标志物，或可作为分子治疗的靶点，并且EphA2可能参与胶质瘤的血管生成，在胶质瘤的发病和恶性进展中起重要作用。     

酪氨酸蛋白激酶受体EphA2及其配体EFNA1在23种肿瘤细胞系中的表达及其意义

背景与目的：酪氯酸蛋白激酶受体EphA2及其配体EFNA1可能在肿瘤的发生发展过程中起着重要的作用。本研究探讨EphA2／EFNA1在不同肿瘤细胞中的表达及其意义。方法：用RT-PCR方法，检测了23种人类肿瘤细胞系中EphA2／EFNA1在mRNA水平上的表达，、并用Western blot方法检测了EphA2蛋白在不同肿瘤细胞系中的表达水平。结果：RT—PCR结果显示．除白血病细胞K562和HL60，以及视网膜母细胞瘤RB几乎检测不到EphA2／EFNA1外．EphA2／EFNA1高表达于肝癌、肺癌、卵巢癌、官颈癌、前列腺癌、胃腺癌、脑胶质瘤、膀胱癌、成骨肉瘤及恶性黑色素瘤等20种细胞系中。Western blot结果显示，除K562外，EphA2蛋白在不同肿瘤细胞系中均有表达。结论：EphA2／EFNA1高表达于人类多种肿瘤细胞中，并且EFNA1的表达水平相对低于EphA2的表达、EphA2．／EFNA1可作为一个较为广潜的肿瘤标记，并有可能成为肿瘤治疗的靶点。