二氧化锆梯度复合羟基磷灰石生物材料对大鼠成骨细胞体外活性的影响

目的探讨二氧化锆（ZrO2）梯度复合羟基磷灰石（HAP）生物陶瓷材料体外对原代大鼠成骨细胞活性的影响。方法以纯ZrO2材料为对照，测量两种材料的表面粗糙度，并用扫描电镜、X射线衍射仪对复合材料进行分析；体外将新生SD大鼠颅骨分离培养的成骨细胞直接于两种材料上培养；用对硝基酚磷酸盐法测定成骨细胞碱性磷酸酶（ALP）活性；酶联免疫（ELISA）法检测成骨细胞分泌白细胞介素（IL）-6和转化生长因子（TGF）-β的水平；RT—PCR法检测成骨细胞TGF—β的mRNA水平；扫描电镜观察成骨细胞与两种材料的体外复合情况；用复合材料的浸提液进行细胞毒性实验，计算相对增殖率（relative proliferationrate，RGR）及毒性分级。结果梯度复合材料的表面粗糙度明显高于对照材料（P〈0．01）；梯度复合材料组成骨细胞不同时间点的ALP活性显著高于对照组；培养2～4d，两组细胞IL-6和TGF-β的分泌水平差异也有统计学意义（P〈0．05，0．01）；两组在TGF—β mRNA水平差异也有统计学意义（P〈0．01）；14d后，梯度复合材料表面的成骨细胞骨化明显。四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测，阴性对照组与材料组的毒性级分别为0级和Ⅰ级，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论ZrO2梯度复合HAP生物材料明显促进体外培养的大鼠成骨细胞增殖和分化，具有较好的生物相容性。     

骨水泥股骨柄和非骨水泥臼杯在首次全髋关节置换术中的应用

目的 随访一组采用同一类型骨水泥型股骨假体和非骨水泥型髋臼假体组合在首次人工全髋关节置换术中的应用，并探讨该种混合型假体对于全身健康情况和骨质质量一般较差的老年患者的适用情况。方法 共有75例患者84髋得到临床和影像学随访，平均年龄为67．9岁。其中老龄股骨颈骨折患者41例41髋，平均年龄72．1岁。随访时间为4．1年。随访内容包括患者的健康状况、手术方法、术后恢复情况以及对于骨形态、骨水泥固定质量和假体稳定性的判断。结果 2例股骨假体发生无菌性松动，臼杯则未见骨溶解或松动征象。未出现骨水泥相关的术中或术后死亡，各类全身性疾病在围手术期无加重表现。41例股骨颈骨折患者术后Harris评分为81.1分。股骨近端骨形态A型17髋（20％），B型47髋（56％），C型20髋（24％）。骨水泥固定质量分别为A级31髋（37％），B级40髋（48％），C级13髋（15％）。结论 混合型人工关节置换术的短期随访结果良好；混合型人工关节的术后即时稳定性有利于老年患者的康复；在手术中必须应用现代骨水泥技术。     

系统性红斑狼疮患者血清HGF与MMP-9的检测及与疾病活动性的关系

目的:探讨血清肝细胞增殖因子(HGF)及基质金属蛋白酶9(MMP-9)的水平与系统性红斑狼疮(SLE)疾病活动程度的关系和意义.方法:采用双抗体夹心ELISA法检测SLE患者(36例)血清HGF及MMP-9水平.结果:①与正常人(30例)相比,患者血清HGF水平明显升高(P<0.001),而血清MMP-9水平明显降低(P<0.001);经糖皮质激素治疗后血清HGF浓度下降(P<0.05),血清MMP-9浓度升高(P<0.05);②活动期患者(24例)血清HGF水平高于非活动期(P<0.05),血清MMP-9水平低于非活动期(P<0.05);③血清HGF水平肾损组(16例)明显高于非肾损组(P<0.001),而血清MMP-9水平则低于非肾损组 (P<0.05);④血清HGF水平关节炎组(23例)明显高于非关节炎组(P<0.01),而血清MMP-9水平两组之间无显著性差异(P>0.05);⑤如果以血清HGF水平作为SLE的诊断指标,则ROC曲线下面积为0.707,灵敏度为66.7%;如果以血清MMP-9水平作为SLE的诊断指标,则ROC曲线下面积为0.984,灵敏度为97.2%;如果同时检测血清HGF水平及MMP-9水平,灵敏度为66.7%(24/36).结论:HGF及MMP-9可能参与SLE的发病机制,血清HGF及MMP-9水平可作为反映疾病活动程度、肾脏损害以及疾病进展与改善的指标,且血清MMP-9水平诊断准确性更高.     

肺泡蛋白沉积症患者高氧液肺灌洗术的效果

对3例患者双侧肺行肺灌洗术,先行左肺灌洗术,1周后再行右肺灌洗术。每侧肺分别用高氧液和乳酸林格氏液交替灌洗,当脉搏血氧饱和度(SpO_2)高于92%时进行肺灌洗术,高氧液和乳酸林格氏液各灌洗10次,取其平均值。测定乳酸林格氏液和高氧液的氧分压；记录灌洗前即刻、灌洗10、20、30、40、50、60、70、80s时SpO_2及平均动脉压(MAP)、中心静脉压(CVP)、心率(HR)和呼吸末二氧化碳分压(P_(ET)CO_2)。左肺灌洗术后1周PaO_2为(72.3±2.1)mm Hg；右肺灌洗术后3d PaO_2为(83.5±4.8)mm Hg。所有患者均顺利出院。高氧液的氧分压[(780±4)mm Hg]高于乳酸林格氏液[(171±6)mm Hg]。与乳酸林格氏液比较,高氧液灌洗10～80s时SpO_2时升高(P＜0.05),MAP、CVP、HR、P_(ET)CO_2差异无统计学意义(P＞0.05)。在氧供方面PAP患者高氧液肺灌洗术的效果优于乳酸林格氏液。     

天然细胞生长调控因子对大鼠坐骨神经损伤后再生和修复的神经电生理研究

目的观察局部应用天然细胞生长调控因子(NCGCF)对周围神经再生的神经电生理功能的影响,探讨其可能的作用机理.方法选用200～230g健康雌性大鼠65只,随机分为对照组和实验组,造成坐骨神经钳夹损伤模型,随后连续7天局部注射NCGCF.术后第14、21、28、42天对坐骨神经进行电生理功能指标观察,包括神经传导速度(NCV)、动作电位(AP)峰值等.结果两组间坐骨神经伤后NCV比较,第14、21和28天组间有非常显著差异(P＜0.01),第42天有显著差异(P＞0.05),实验组优于对照组.两组间坐骨神经伤后AP峰值比较,第14、21和28天比较组间有显著差异(P＜0.05),实验组优于对照组,第42天无显著差异(P＞0.05). 结论NCGCF能促进大鼠受损坐骨神经电生理功能的早期恢复,具体机理需进一步研究.     

舟山渔民杭州市民金华农民三组人群血清脂蛋白（a）测定与分析

测定舟山渔民３２８名、杭州市民２９０名以及金华农民３３８名血清脂蛋白（ａ）的含量。结果表明舟山渔民血清脂蛋白（ａ）的平均值为１２．７±１４．４ｍｇ／ｄｌ，低于杭州市民组的血清脂蛋白（ａ）平均值１４．２±１３．６ｍｇ／ｄｌ和金华农民组的血清脂蛋白（ａ）的平均值１４．６±１６．１ｍｇ／ｄｌ，具有显著性差异（Ｐ＜０．０１）；而血清脂蛋白（ａ）的平均值在杭州市民组与金华农民组之间却无统计学上的差异（Ｐ＞０．０５）。作者认为：舟山渔民组血清Ｌｐ（ａ）含量较杭州市民组及金华农民组为低，可能与舟山渔民多食富含Ｎ－３多不饱和脂肪酸的海鱼有关；而血清Ｌｐ（ａ）含量的下降，减少了Ｌｐ（ａ）强烈致动脉粥样硬化作用，这可能与舟山渔民冠心病的发病率和死亡率较其它地方为低有关     

小白菊内酯抑制胎牛血清诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖及信号转导机理

目的　探讨小白菊内酯的抗动脉粥样硬化机理与IκBα ,环氧合酶 2 (COX 2 ) ,p2 1,p2 7蛋白表达的关系。方法　培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC) ,Western印迹杂交法检测IκBα ,COX 2 ,p2 1,p2 7蛋白表达 ,流式细胞仪检测VSMC周期情况 ,[3H ]TdR参入测定VSMC的DNA合成。结果小白菊内酯 (30 μmol·L- 1)以时间依赖关系上调IκBα ,p2 1,p2 7蛋白表达和以时间依赖关系抑制COX 2蛋白表达 ,10～ 30 μmol·L- 1以剂量依赖关系使VSMC周期中的G0 /G1期细胞比例明显增多 ,S期细胞比例显著减少 ,同时抑制VSMC的 [3H]TdR参入。结论　①小白菊内酯可能通过上调IκBα蛋白表达抑制核因子 κB活性 ,从而抑制COX 2蛋白表达 ,通过抑制COX 2蛋白表达来抑制VSMC增殖 ;②小白菊内酯可能通过上调调控G1 S周期转换的p2 1,p2 7蛋白来抑制VSMC增殖。     

骨髓间充质干细胞的分离培养和生物学性状

目的建立一种体外分离纯化和培养扩增人骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的方法,并探讨其生物学特性,为MSCs的进一步应用研究提供数据.方法抽取人骨髓后用Percoll分离液经密度梯度离心法分离得到单个核细胞,以105个细胞/cm2密度接种,培养液为含10%胎牛血清的L-DMEM.倒置相差显微镜及吉姆萨-瑞氏染色观察其形态,MTT法测其生长曲线、流式细胞仪检测细胞周期及表面标记物.结果培养的MSCs 12h后换液,有部分细胞贴壁生长,4～5d可见有集落形成,14～20d左右可达到80%～90%融合,倒置相差显微镜及吉姆萨-瑞氏染色可见细胞形态为梭形、多角形及纺锤状等,生长曲线图显示MSCs增殖活跃,流式细胞仪检测显示约有86%的细胞处于G0、G1期,表面标记物中CD14、CD34、VLA-1、CD45和HLA-DR阴性,而CD44、CD105和CD29阳性.结论成功地建立了一种分离培养人骨髓MSCs的方法,获得的细胞形态多样、增殖稳定.     

康威达消毒液杀菌效果及安全性评价

试验表明,康威达消毒液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌杀灭率均达100％;对枯草杆菌黑色变种芽胞杀灭率达99.89％。小鼠急性经口毒性LD_(50),雌雄两性均大于5g/kg体重,根据消毒剂急性毒性分级标准,属实际无毒类。豚鼠一次皮肤刺激试验,平均刺激指数为0,根据急性皮肤刺激强度评价标准,该样品属无刺激性。小鼠微核试验为阴性。     

灭活自体颅骨回植钛铆钉固定的临床应用

目的 总结灭活自体颅骨回植以钛铆钉固定进行颅骨修补术的临床应用经验。方法 2000年3月至2003年12月对21例急性颅脑损伤等去骨瓣减压或颅骨本身受肿瘤侵蚀的患者，行自体颅骨普通冰箱冰冻保存后煮沸消毒，早期回植或受肿瘤侵蚀的骨瓣灭活后一期回植，以钛铆钉固定，随访观察修复效果。结果 所有病例伤口均一期愈合，无并发症发生，随访6个月至2年半，X射线片及CT显示回植骨瓣边缘吸收未超出钛铆钉固定范围，头颅外观及牢度良好，肿瘤无复发。结论 灭活自体颅骨回植进行颅骨修补术，方法简单、实用，利用钛铆钉固定可有效防止因回植骨瓣边缘吸收而导致的牢度下降。