下呼吸道多药耐药鲍曼不动杆菌定植与感染诊断方法评价

目的：评价下呼吸道多药耐药鲍曼不动杆菌（MRAB）定植与感染实验室诊断方法的临床价值。方法选取本院 ICU患者62例,均为气管插管吸取的痰标本直接涂片革兰染色镜检检出革兰阴性杆菌且经细菌培养和药敏试验确认为 MRAB的患者。依据综合分析原则,将62例患者分为感染组（38例）和定植组（24例）,采用痰标本直接涂片、定量培养和直接涂片联合定量培养3种方法进行检测,比较各种方法对 MRAB感染的诊断效能。结果直接涂片诊断灵敏度为81．6％、特异度为79．2％、约登指数为0．61,定量培养诊断灵敏度为65．8％、特异度为70．8％、约登指数为0．37,直接涂片联合定量培养诊断灵敏度为89．5％、特异度为87．5％、约登指数为0．77。直接涂片联合定量培养对下呼吸道 MRAB感染的诊断效能优于直接涂片和定量培养（P＜0．05）。结论直接涂片联合定量培养是判断下呼吸道 MRAB定植或感染的可靠的实验室诊断方法,能为临床提供更好的判定依据。     

不同精密度评价方法的比较及在临床血糖测定中的应用

目的：以临床血糖项目测定为例进行精密度评价,比较3种精密度评价方法的差异。方法选择2个具有医学决定水平的人混合血清作为实验标本,采用Advia2400全自动生化分析仪测定血糖浓度,分别根据方差分析、《用户对精密度和正确度性能的验证试验》（EP15-A2）和《定量测量方法的精密度性能评价》（EP5-A2）文件要求进行精密度评价实验。计算并比较3种精密度评价方法的变异系数（CV ）。结果选择低值和高值2个不同浓度的实验标本,按方差分析 CV为0．80％、0．73％,按照EP15-A2计算的 CV为0．81％、0．72％;按照EP5-A2计算的CV分别为1．25％、1．09％,均小于国家标准3．00％。EP5-A2方案计算的室内精密度与方差分析、EP15-A2方案的结果比较,差异具有统计学意义（P＜0．05）。结论 EP5-A2方案计算的室内精密度大于方差分析和EP15-A2方案的结果,后两种方案在精密度的评价上无本质区别,实验室要进行更为严格的精密度评价需采用 EP5-A2方案。     

初诊甲状腺功能亢进患者的红细胞和血红蛋白分析

目的：探讨不同性别且未经治疗的甲状腺功能亢进（甲亢）患者的外周血红细胞参数和血红蛋白与健康人的差异比较。方法采集甲亢患者的外周血标本,用 EDTA-K2抗凝,采用 Sysmex XE-2100全自动血液分析仪进行外周血红细胞参数及血红蛋白分析,以体检健康者作为健康对照。结果与健康对照组比较,男、女性甲亢患者的红细胞及血红蛋白含量均升高,差异有统计学意义（P ＜0.05）。结论初诊甲状腺功能亢进者红细胞值和血红蛋白值高于健康人。     

儿童支气管哮喘患者外周血Th17百分数及FOXP3水平的变化及意义

目的探讨外周血Th17细胞百分数和叉头状转录因子P3(FOXP3)水平在儿童支气管哮喘患者中的变化及意义。方法选取支气管哮喘患儿(哮喘组)和健康儿童(对照组)各30例,采用流式细胞术检测外周血Th17细胞及CD4+CD25+调节性T细胞的百分数、实时荧光定量PCR检测外周血FOXP3mRNA的表达,ELISA法检测血浆中IL-17和IL-10的表达水平。结果哮喘组外周血Th17细胞百分数及血浆IL-17水平均高于对照组(P<0.05);哮喘组外周血FOXP3表达及血浆IL-10水平均低于对照组(P<0.05)。结论 Th17/FOXP3的失衡可能在儿童支气管哮喘的发病机制中起重要作用。     

幽门螺杆菌感染患者外周血Th17与Th22细胞的改变

目的探讨幽门螺杆菌(HP)感染患者外周血中Th17及Th22细胞的改变。方法收集HP感染者66例(HP感染组)及体检健康者30例(对照组),采用流式细胞术检测外周血中Th17与Th22细胞水平,同时采用ELISA法检测血清中IL-17与IL-22的表达水平。结果与对照组比较,HP感染组Th17、Th22、IL-17、IL-22水平均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。相关分析显示,HP感染患者的HP感染者活度值(DPM)与Th17、Th22、IL-17、IL-22水平均呈正相关(P<0.01)。结论HP感染患者体内存在Th17与Th22细胞的激活,同时引起相关免疫效应分子IL-17、IL-22的高表达,促进免疫损害的进展。     

miR-21抑制剂对多发性骨髓瘤细胞生长的影响

多发性骨髓瘤（Multiple myeloma,MM）是浆细胞异常增生的B细胞恶性克隆性疾病,以骨髓中异常浆细胞的过度增生、骨损害及免疫缺陷为特征,约占所有恶性血液病的10％。尽管近几年基于信号通路蛋白抑制剂的靶向药物治疗取得了明显进步,但其五年相关存活率仍然较低,仅为35％左右。因此,研究其发病机制对MM诊断、治疗、预后判断至关重要。     

凝血指标检测与急性冠状动脉综合征患者Gensini及GRACE评分的关系研究

目的探讨急性冠状动脉综合征（ACS）患者血浆凝血指标（D-二聚体（D-D）、凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）及纤维蛋白原（FIB））含量变化及与Gensini和GRACE评分的关系。方法检测并比较55例ACS患者和34例健康对照者血浆D-D、PT、APTT及FIB含量。结果ACS组血浆凝血指标（D-D、PT、APTT及FIB）含量分别为0.16±0.19mg/L、11.9±1.91s、30.4±6.25s、2.41±0.96g/L,对照组含量分别为0.07±0.08mg/L、11.9±0.91s、27.5±3.36s、2.36±0.73g/L。D-D在ACS不稳定型心绞痛（UA）、非ST段抬高型心肌梗死（NSTEMI）和ST段抬高型心肌梗死（STEMI）三个亚组中的含量分别为0.10±0.07、0.08±0.10、0.25±0.28mg/L;ROC曲线下面积D-D检测为0.64,Gensini评分检测为0.99,GRACE评分检测为1.00。D-D在GRACE评分低风险组、高风险组和极高风险组中的含量分别为0.13±0.18、0.18±0.25、0.18±0.14mg/L;D-D在Gensini评分中危组、高危组和极高危组中的含量分别为0.10±0.05、0.09±0.09、0.23±0.28mg/L,D-D含量与Gensini极高危组评分成正相关（r=0.911,P〈0.05）。结论ACS患者尤其STEMI患者四个凝血指标仅D-D显著升高;较Gensini和GRACE评分,D-D能粗略反映ACS患者冠状动脉严重程度,可指导临床治疗。     

胰腺癌CFPAC1细胞增殖诱导配体基因shRNA慢病毒表达载体的构建

目的 构建针对人胰腺癌细胞株CFPAC1增殖诱导配体(a proliferation-inducing ligand,APRIL)基因的shRNA慢病毒表达载体.方法 应用基因工程技术,筛选出针对APRIL基因的RNAi靶序列,与pGCL-GFP载体连接,构建慢病毒表达载体LV-shAPRIL;将连接产物转化到DHSα感受态细胞,经PCR筛选阳性克隆、测序鉴定.再用LV-shAPRIL、pHelper 1.0、pHelper 2.0共转染293T细胞,包装产生慢病毒颗粒.重组慢病毒感染CFPAC1细胞,实时定量PCR和Western blotting检测CFPAC1细胞APRIL mRNA和蛋白的表达.结果 PCR和测序结果与构建的慢病毒载体的预期结果一致,经包装产生的病毒滴度为5×107TU/ml.构建的慢病毒载体感染CFPAC1细胞后第4天、第4周和第8周,APRIL mRNA表达量较空载体慢病毒感染组分别下降了73%、70%和71%;APRIL蛋白表达量分别下降了66%、63%和62%(P＜0.05).而各时间段未感染慢病毒的细胞组与空载体组相比无明显差异(P＞0.05).结论 成功构建了APRIL基因的shRNA慢病毒表达载体LV-shAPRIL.     

FoxO1基因rs7324943G／Trs17592236C／T位点与2型糖尿病的相关性分析

目的：探讨2型糖尿病（T2DM ）患者 FoxO1基因的单核苷酸多态性（SNPs）位点rs7324943 G/T、rs17592236 C/T在无锡地区人群中的分布频率,及其与T2DM的相关性。方法采用 TaqMan探针基因分型技术结合琼脂糖凝胶电泳技术,检测148例T2DM患者（T2DM组）和100例健康者（对照组）FoxO1基因两个SNP位点的基因型及等位基因频率分布,同时采用RT-PCR法和实时荧光定量PCR（FQ-PCR）法检测所有研究对象外周血单核细胞（PBMC）中 FoxO1 mRNA表达水平。结果T2DM组和对照组在 FoxO1基因两个位点 rs7324943 G/T、rs17592236 C/T的等位基因频率与基因型频率上差异均有统计学意义（P＜0．05）,存在以上任一位点改变的 T2DM 患者 FoxO1基因mRNA表达水平明显高于未出现改变的 T2DM 组及对照组。结论 FoxO1基因的两个位点rs7324943 G/T、rs17592236 C/T与无锡地区T2DM的发病风险有关。     

14项临床化学检验指标分析前不确定度评定

目的以14项临床生化指标为例,探讨评定分析前不确定度的方法。方法招募25名志愿者,各采集左右手臂共7管血,按照设定的参照方法及常规检验所用方法处理标本血清,于同一批内将结果配对计算分析。结果 LDH对每个因素都最敏感,分析前相对不确定度为12.01%;其次为AST、Glu,大于6.00%;Urea、TC分别为1.05%、1.61%;ALT、ALP、GGT、Cr、UA、TG、HDL-C、LDL-C、CK为2.5%~5.0%。AST、ALP、Urea、Cr、TC、TG因采血手臂不同带来的不确定度大;ALT、LDH、GGT、Glu由凝血时间不同带来的不确定度较大;LDL-C受运输方式的影响较大;UA、HDL-C、CK受真空管类型不同影响较大。结论通过计算各分析前不确定度,说明采取相应对策从源头上减小不确定度值的必要性;其计算方式有望应用于其他指标与因素。