免疫固定电泳技术在多发性骨髓瘤31例中的诊断价值

目的:探讨免疫固定电泳技术在多发性骨髓瘤诊断中的价值.方法:速率散射比浊法定量检测IgG、I-gA、IgM及κ、λ轻链,免疫固定电泳采用全自动电泳仪及扫描仪进行.结果:31例MM经血清免疫固定电泳分型显示IgG型19例(61.3％),其中IgG κ型5例(16.1％),IgGλ型14例(45.2％);IgA型3例(9....     

MSCs联合雷帕霉素对异基因鼠脾淋巴细胞的免疫调节作用

目的探讨体外骨髓间充质干细胞（MSCs）联合雷帕霉素对BALB/c鼠T、B淋巴细胞的免疫调节作用及可能机制。方法从5～6周龄BALB/c鼠骨髓中分离培养MSCs并鉴定其纯度。用EZ SepTM Mouse 1X分离异体BALB/c鼠脾脏淋巴细胞,分别在刀豆蛋白A（ConA）、脂多糖（LPS）刺激下,用MSCs和/或雷帕霉素处理,MTT法检测淋巴细胞的增殖,流式细胞术检测T、B淋巴细胞CD69、CD28和CD86的表达和T淋巴细胞凋亡情况,Real time PCR测定T淋巴细胞IL 10 mRNA、IFN γ mRNA的表达水平。结果MSCs明显抑制T、B淋巴细胞增殖,联合雷帕霉素组抑制作用更加显著（P＜0.01）。MSCs可抑制T淋巴细胞的凋亡,联合雷帕霉素组较单独MSCs组抑制作用更加明显(P＜0.01)。MSCs联合雷帕霉素具有协同促进IFN γ mRNA表达和协同抑制IL 10 mRNA表达的作用。单独MSCs或MSCs联合雷帕霉素对T、B淋巴细胞CD69、CD28和CD86的表达无显著影响。结论MSCs联合雷帕霉素对BALB/c鼠T、B淋巴细胞有免疫负调节作用,可能与协同抑制淋巴细胞增殖、T淋巴细胞凋亡和干预IFN γ mRNA、IL 10 mRNA表达有关。     

流式细胞术检测表达FoxP3的CD4+CD25+调节性T细胞

目的 探讨转录因子FoxP3在外周血CD4 CD25 调节性T细胞(Treg)内的表达特性.方法 取正常人外周血单个核细胞(PBMC),经固定/透膜处理进行细胞内染色,用流式细胞术(FCM)检测T细胞内FoxP3.以抗人CD3/CD28诱导T细胞活化,再用定量PCR及FCM术分别检测FoxP3 mRNA及蛋白质表达水平.结果 FoxP3主要表达于CD4 T细胞,尤其是CD25高表达的CD4 T细胞,达97%左右;中等程度表达CD25的细胞中也含有少量FoxP3阳性细胞.T细胞活化后,表达FoxP3的CD4 CD25 T细胞比例显著增高,FCM检测结果与定量PCR结果一致.结论 FoxP3不仅参与维持Treg细胞的功能,也与T细胞的活化有关.FCM检测细胞核内表达的FoxP3分子为研究Treg细胞提供了一种快速、简便的方法.     

幽门螺杆菌VacA重组蛋白对SGC7901胃癌细胞的作用

目的:研究幽门螺杆菌空泡毒素(VacA)编码基因在大肠杆菌中的表达产物对SGC7901胃癌细胞的作用.方法:常规培养pET32a-vacA-E.coliBL21(DE3)工程菌株,IPTG诱导重组蛋白表达,产物纯化后作用于胃癌细胞,倒置显微镜及电镜等检测细胞生长情况.结果:重组蛋白作用于胃癌细胞后,倒置显微镜下观察,细胞生长受抑制,其细胞空泡毒作用减弱甚至消失,电镜下可见10%-20%左右细胞呈现轻度空泡变,仅少数细胞空泡变明显,细胞表面微绒毛消失,少量细胞体积减小,并出现了早期核着边固缩等凋亡改变.结论:重组VacA蛋白对胃癌细胞的生长具有抑制作用,空泡毒作用减弱.     

SPIFE全自动电泳仪测定血清蛋白电泳及其在肾脏疾病中的应用

目的：评价SPIFE电泳仪测定血清蛋白电泳的性能及其在肾脏疾病中的诊断价值。方法：用混合血清进行批内、批间重复性测定，用健康体检标本做室内正常参考值，对临床确诊的128例各类肾脏疾病患者进行REP高压快速蛋白电泳，并对各区带进行扫描，测出各区带百分含量，与正常对照组(80例)相比较，探讨两者血清蛋白各组分百分含量之间的差异性。结果：混合血清蛋白电泳的批内和批间重复性较好，并且各区带百分含量与文献报道基本一致。在各种肾脏疾病中，各区带百分含量与对照组相比较都有不同程度的变化，某些组分与正常组比较两者存在明显的差异性。结论：SPIFE电泳仪采用高自动化的电泳和染色技术，应用优质琼脂糖凝胶试验盒，操作简便、图谱清晰、分辨率高、重复性好、结果准确。该电泳法对肾脏疾病具有一定的临床诊断价值。     

免疫透射浊度法测定血清前白蛋白方法学探讨

目的 对免疫透射浊度法测定血清前白蛋白(PA)进行方法学评价。方法采用免疫透射浊度法在岛津CL-7300全自动生化分析仪上测定血清PA。结果血清PA的检出限为20～670mg／L，平均批内和批间变异系数分别为2．57%，3．79％；回收率为(97．5～103．8)％。该法(X)与免疫散射浊度法(y)有良好的相关性，相关系数，r=0．983，相关方程Y=5．528 0．974X。血清甘油三酯(TG)浓度3．5mmol／L以下，血红蛋白(Hb)浓度5g／L以下，胆红素浓度400μmol／L以下对测定基本无干扰。结论此法测定血清前白蛋白操作简单，线性范围宽，重复性好，准确性高，适用于全自动分析仪在常规实验室测定。     

胎球蛋白A/脂联素比值在2型糖尿病合并代谢综合征中的价值

目的探讨胎球蛋白A(AHSG)/脂联素(APN)比值与2型糖尿病(T2DM)合并代谢综合征(MS)的相关性。方法选取新诊断的T2DM患者130例,根据有无合并MS将患者分为单纯T2DM组(61例)和T2DM合并MS组(69例),另选取体检健康者60名作为正常对照组。收集所有对象的一般资料,同时检测空腹血糖、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、C反应蛋白(CRP)、空腹胰岛素(FINS)、AHSG及APN水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMAIR)和AHSG/APN比值。采用Spearman秩相关分析评估各项目之间的相关性。采用Logistic回归分析评估T2DM合并MS的危险因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价各项目辅助诊断T2DM合并MS的价值。结果正常对照组、单纯T2DM组、T2DM合并MS组AHSG及AHSG/APN比值均依次升高,APN依次降低,各组间比较差异均有统计学意义(P0.05)。Spearman秩相关分析显示,AHSG与腰围、空腹血糖、TG、LDL-C、HOMA-IR、CRP及AHSG/APN比值均呈正相关(P0.01),与APN呈负相关(P0.01);APN与腰围、体质量指数(BMI)、收缩压、舒张压、TC、AHSG及AHSG/APN比值均呈负相关(P0.05、P0.01),与HDL-C呈正相关(P0.05);AHSG/APN比值与年龄无相关性(P0.05),与其他项目均相关(P0.05、P0.01)。Logistic回归分析结果显示,校正相关混杂因素后,仅AHSG/APN比值为MS发生的危险因素[比值比(OR)=1.051,95%可信区间(CI)为1.015～1.088,P0.01],APN为保护因素(OR=0.758,95%CI为0.566～0.978,P=0.047)。ROC曲线分析显示,AHSG、APN和AHSG/APN比值辅助诊断MS的曲线下面积(AUC)分别为0.692、0.730、0.806,AHSG/APN比值的诊断效能优于AHSG和APN。结论 AHSG/APN比值能更好地反映T2DM患者的代谢紊乱状态及MS的发生风险,对T2DM合并MS有较好的辅助诊断价值。     

血气分析仪快速测定血钾

目的对血气分析仪快速测定血钾进行应用与评价。方法在ROCHE OMNIC血气分析仪上测定血钾,并同时在VITROS-250干式生化分析仪上检测。结果血钾检测限为0.5～18mmol/L;高、中、低浓度的批内CV分别为4.6%,3.7%和4.2%,批间CV分别为4.7%,3.8%和5.0%;回收率为95.5%～104.8%;与VITROS-250干式生化分析仪(X)相关系数r=0.995,相关方程Y=1.011X-0.08;胆红素浓度340μmol/L以下,三酰甘油浓度8.8mmol/L以下,对该法测定基本无干扰,而肝素有明显的负干扰,溶血有显著的正干扰。结论此法测定血钾简便、快速、准确可靠,适用于急诊检测。