三七通过miR-4732-5p/PCSK9/LDLR途径降低血脂异常痰瘀互结证LDL-C的研究

目的：探讨三七通过miR-4732-5p/PCSK9/LDLR途径降低低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),为中药三七治疗血脂异常的作用机制研究提供临床参考和研究思路。方法：采用前瞻性小样本自身对照临床试验设计方案，纳入31例2021年2月—2021年12月就诊于中国中医科学院广安门医院符合高脂血症(痰瘀互结证)诊断标准的受试者，给予中药三七粉连续治疗3周。比较受试者治疗前后LDL-C、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)及高密度脂蛋白(HDL-C)血脂指标及安全性指标的变化，同时收集受试者治疗前后血浆样本，检测PCSK9表达水平，收集外周血单核细胞(PBMC)样本，检测hsa-miR-4732-5p、hsa-PCSK9 mRNA及hsa-LDLR mRNA指标。结果：1例受试者脱落，其余30例受试者经过三七干预3周后，LDL-C、TC、TG与治疗前相比均降低，HDL-C与治疗前相比升高(P<0.05),安全性指标无明显差异(P>0.05),血浆PCSK9含量下降，PBMC hsa-PCSK9 mRNA表达下调，hsa-miR-4732-5p、hsa-LDLR mRNA表达上调。...     

茵陈蒿的化学成分及其药理活性研究

目的 研究传统中药材茵陈蒿的化学成分，以期从中发现具有药理活性的先导化合物。方法 利用大孔吸附树脂、硅胶、ODS等柱色谱与半制备型高效液相色谱相结合对茵陈蒿中的化合物进行分离纯化，并结合化合物的理化性质与核磁共振波谱数据对分离得到的化合物进行结构鉴定。此外，采用MTT法和ELISA法对分离得到的化合物进行了抗肝癌以及抗HBV活性测试。结果 从采自山西的茵陈蒿的乙醇提取物中分离出10个单体化合物，活性测试结果表明上述化合物未显示抗肝癌以及抗HBV活性。结论 化合物1和2为新化合物，化合物1,3,4为烯炔类化合物，化合物2和10为脂肪酸类化合物，化合物5-9为萜类化合物。     

CRF01＿AE/CRF07＿BC重组毒株近似全长基因组序列和系统进化分析

目的 鉴定我国深圳地区人类免疫缺陷病毒-Ⅰ型(HIV-1)新型二代毒株(CRF01＿AE/CRF07＿BC),了解重组毒株的流行特征及新型重组模式。方法 对深圳市2011-2016年新确诊的未接受抗逆转录病毒治疗的HIV-1感染者血浆样本进行近似全长基因组扩增和测序，选取第一代重组毒株作为母本的第二代独特重组毒株作为研究对象；获得的近似全长基因组序列使用Quality Control工具进行质量检测和基因型初步分析，基于近似全长序列使用最大似然法构建系统进化树；随后使用jpHMM和RIP工具进行重组断点分析，并构建Neighbor-Joining系统进化树验证重组断点，并对来自不同母本的重组片段进行同源性分析。结果 从我国深圳地区HIV-1感染者中发现了两种新型二代独特重组毒株(CRF01＿AE/CRF07＿BC):LS13810和LS4017并获得其近似全长基因组序列；其中LS13810近似全长基因组以CRF01＿AE为骨架，分别在病毒的pol和tat区插入两个来自于CRF07＿BC的片段；而LS4017近似全长基因组的5′半分子来源于CRF07＿BC,而3′半分子主要来源于CRF0...     

三七根中茄腐镰刀菌的实时荧光定量PCR检测

目的建立一种准确、快速地检测三七Panax notoginseng根腐病病原真菌茄腐镰刀菌Fusarium solani的实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法。方法基于茄腐镰刀菌的氨基己二酸还原酶(Lys2)基因设计了qRT-PCR的特异性引物对Fs-QF和Fs-QR,制备了该基因的重组质粒标准品,建立了茄腐镰刀菌的SYBR Green I荧光定量PCR检测方法和实时荧光环介导恒温扩增技术(LAMP)体系。从三七种植区采集到15个具有根腐病、黑斑病典型症状的三七病株及三七种植土壤样品,并提取了这些样品的总DNA,运用建立的检测方法进行检测。结果建立的qRT-PCR检测方法和实时荧光环介导恒温扩增技术特异性强,能快速检测到携带茄腐镰刀菌的三七根腐病病株。此外,该方法灵敏度高,检测模板质量浓度可低至0.2 pg/μL。结论建立的方法能明确三七种植土壤以及三七病株中茄腐镰刀菌数量的动态变化。可以为三七土壤处理、根腐病的早期诊断和动态监测以及为带病三七种子、种苗的快速分子检测提供技术支持。     

Diterpenoids of Tripterygium wilfordii decrease inflammatory response of macrophage by inhibiting multiple signaling pathways北大核心CSCD

Aim To study the anti-inflammatory activ¬ity of diterpenes from Tripterygium wilfordii on lipopo- lysaccharide ( LPS)-induced macrophage and its mech¬anism. Methods MTT assay was used to detect the cytotoxicity of compounds. The Griess method was used to detect the NO on LPS-induced RAW264. 7 cells. ELISA was applied to determine the contents of inter- leukin 6 (IL-6) , tumor necrosis factor a ( TNF-a ) , interleukin lp (IL-lfj) and interleukin 18 (IL-18) in cell culture supernatant. Western blot was used to de¬tect IkBcx, .INK, ERK, p38, STAT3 and their phos-phorylation in LPS-induced RAW264.7, as well as the effect on COX-2, iNOS, NLRP3, caspase-1 , cleaved- caspase-1. Flow cytometry was employed to detect the effects of compounds on the phagocytosis of RAW 264. 7 cells. Results Hypoglicin II (1) and ent-pimara-8 (14) , 15-diene-19-ol (6) , two diterpenoid compounds from Tripterygium wilfordii could effectively inhibit the expression of inflammatory mediators ( COX-2 and iN- OS) and inflammatory cytokines (IL-6, IL-lp, IL- 18) in LPS-induced RAW264. 7 cells. Further re¬search found that the phosphorylation of IkBcx , JNK, ERK, P38, STAT3 and NLRP3 was all inhibited; however, there was no significant effect on the expres¬sion of IkBcx, JNK, ERK, P38 and STAT3. At the same time, they also inhibited the phagocytosis of mac-rophages. Conclusions The anti-inflammatory mecha¬nism of Tripterygium wilfordii diterpenoids 1 and 6 might be through inhibiting the production of NLRP3 inflammatory bodies, inflammatory mediators (COX-2 and iNOS) and inflammatory cytokines (IL-6, IL-lp and IL-18) , which is closely related to inhibiting the activation of MAPK, NF-kB and STAT3 pathway. © 2023 Publication Centre of Anhui Medical University. All rights reserved.