白芷提取物对绿原酸肠吸收的影响

目的考察白芷70%乙醇提取物对绿原酸肠吸收的影响。方法采用外翻肠囊法和在体单向肠灌流法,研究提取物、P-gp抑制剂(盐酸维拉帕米)、抗生素(诺氟沙星)对绿原酸肠吸收的影响。结果十二指肠中,绿原酸组和绿原酸-白芷提取物组的表观吸收系数(Papp)分别为(6.792±1.28)×10~(-6)cm/s和(11.605±2.03)×10~(-6)cm/s,而空肠中分别为(1.700±0.53)×10~(-6)cm/s和(7.194±1.93)×10~(-6)cm/s。绿原酸组的吸收速率常数(Ka)和Papp分别是(1.984±0.99)×10~(-4)/s和(15.62±4.42)×10~(-6)cm/s,绿原酸-白芷提取物组分别是(4.784±0.36)×10~(-4)/s和(37.33±2.18)×10~(-6)cm/s,绿原酸-盐酸维拉帕米组分别是(5.847±0.75)×10~(-4)/s和(44.64±5.64)×10~(-6)cm/s,绿原酸-诺氟沙星组分别是(9.673±0.81)×10~(-4)/s和(88.86±7.92)×10~(-6)cm/s。结论绿原酸最佳吸收部位为十二指肠和空肠,白芷对其肠道吸收显著促进作用,可能与抑制P-gp活性及调节肠道菌群有关。     

基于网络药理学探讨参莲方治疗动脉粥样硬化性心血管病的作用及机制

目的 采用网络药理学方法分析抗动脉粥样硬化中药参莲方治疗动脉粥样硬化性心血管病（ASCVD）的活性成分、作用靶点和分子通路，探索参莲方治疗ASCVD的可能性及作用机制，并为其组方配伍的合理性阐释提供依据。方法 借助SymMap数据库与中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）获取参莲方主要化学成分，SymMap和ETCM检索化合物靶点，通过DisGeNET和GEO数据库检索疾病靶点；化合物靶点与疾病靶点作交集得到参莲方作用于ASCVD的预测靶点。运用STRING数据库构建靶蛋白相互作用（PPI）网络图，导入Cytoscape3.6.0筛选参莲方作用于ASCVD的关键化合物和关键靶点，进而用David将富集到的关键靶点进行基因本体（GO）功能富集和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路分析。采用大鼠心肌缺血-再灌注模型作为ASCVD代表性疾病模型进行实验验证。结果 参莲方作用于ASCVD的候选化合物有59个，预测靶点67个，关键化合物有20个，关键靶点有29个。通过“药材-成分-靶标-通路”多维网络分析参莲方组方药物的共同靶点有12个，主要包括花生四烯酸合成前列腺素的限速酶环加氧酶2（PTGS2），雌激素受体1（ESR1），凋亡相关基因TP53等。GO分析结果显示，参莲方治疗ASCVD关键靶点的生物功能主要涉及细胞凋亡、一氧化氮的合成、雌二醇反应、血管生成、炎症反应等；KEGG通路主要富集到TNF信号通路、磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路、低氧诱导因子-1（HIF-1）信号通路、细胞凋亡等。其中，参莲方组方药物对凋亡的调控作用，可能既共同作用于TP53，又分别作用于细胞凋亡的不同信号通路，从而发挥协同作用。体内实验验证结果证实，参莲方对大鼠心肌缺血-再灌注损伤有明显的保护作用，能够显著减少心肌梗死面积，改善心肌组织病理学变化，对心肌线粒体损伤的减轻作用尤为明显。进一步分析发现，参莲方对线粒体凋亡通路活化相关蛋白表达有明显抑制作用。结论 抗动脉粥样硬化中药参莲方可有效干预ASCVD，影响心肌细胞线粒体凋亡是其保护心肌缺血-再灌注损伤的作用机制之一。     

不同浓度的外源NO对刺五加种子激素及酶含量变化的影响

目的:研究外源NO对刺五加种子解除休眠及萌发过程中内源激素及酶的变化规律,为打破刺五加种子休眠和人工栽培提供依据。方法:考察不同浓度(1,5,10,20 mmol·L~(-1))的外源NO供体硝普钠(SNP)处理刺五加种子,而后进行变温层积处理。采用高效液相色谱法检测出在不同层积时间(0,30,50,80,100,130 d)的内源激素赤霉素(GA3),脱落酸(ABA),吲哚乙酸(IAA),吲哚丁酸(IBA)及水杨酸(SA)含量变化。采用酶标仪全程监测体内酶[过氧化氢酶(CAT),超氧化物歧化酶(SOD),过氧化物酶(POD),丙二醛(MDA)]水平的变化。结果:在刺五加种子萌发过程中,GA3,IAA,IBA和SA的含量逐渐增大,脱落酸的含量逐渐减小。POD和MDA水平显著下降,CAT和SOD的酶活力显著上升。外源NO可以提高刺五加种子萌发率,缩短种子萌发时间,20 mmol·L~(-1)SNP促进种子萌发效果最为明显,10 mmol·L~(-1)SNP促进种子萌发效果最弱,呈"V"型变化。结论:SNP促进刺五加种子萌发可能通过提高种子萌发过程中的激素和酶的含量,以提高种子内源NO含量而实现。     

基于MAPKs和NF-κB信号通路的麻黄-桂枝药对抗炎作用机制研究

目的:考察麻黄-桂枝药对对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞炎症反应的影响及其分子机制。方法:体外培养RAW264.7细胞,CCK8法确定麻黄-桂枝作用的最适浓度,设定正常对照组、模型对照组(LPS组)、实验组(25、50、100、200μg/mL的麻黄-桂枝+LPS组),实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)检测iNOS、COX-2、TNF-α、IL-6 mRNA的表达,Western blot法检测MAPKs和NF-κB通路中关键蛋白的表达水平。结果:麻黄-桂枝作用的最适浓度为25μg/mL～200μg/mL。与正常对照组比较,模型对照组NO、PGE_2、TNF-α、IL-6含量显著升高,iNOS、COX-2、TNF-α、IL-6 mRNA表达水平显著上调(P<0.01);与模型对照组比较,麻黄-桂枝100μg/mL～200μg/mL组iNOS、COX-2、TNF-α、IL-6 mRNA表达水平显著下降(P<0.05或P<0.01)。LPS致炎后,与正常对照组比较,模型对照组30 min P-p65、P-IκB-α、P-p38、P-ERK、P-JNK蛋白表达水平显著升高(P<0.01);与模型对照组比较,麻黄-桂枝各组30 min P-p65、P-IκB-α、P-JNK蛋白表达显著降低、P-ERK显著升高(P<0.01)、P-p38无显著差异,12 h后P-p38和P-ERK表达明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:麻黄-桂枝可能通过对炎症细胞因子和促炎介质的调控来减轻炎症反应;并通过调控NF-κB信号通路中p65、IκB-α以及MAPKs信号通路中p38、ERK、JNK蛋白的磷酸化来发挥抗炎作用。     

坤泰胶囊联合激素替代治疗用于卵巢早衰疗效及安全性的系统评价

目的:基于荟萃分析(Meta分析)方法,系统评价坤泰胶囊联合激素替代治疗(hormone replacement therapy,HRT)用于卵巢早衰的疗效及安全性。方法:检索中国期刊全文数据库、维普数据库、万方数据库、中国生物医学文献数据库和PubMed数据库,检索时限为建库至2018年12月31日,收集坤泰胶囊联合HRT用于卵巢早衰的随机对照临床研究文献(研究组患者使用坤泰胶囊联合HRT;对照组患者单纯使用HRT),采用“偏倚风险评估工具”进行质量评价,运用RevMan 5.3软件对患者治疗前后的卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和雌二醇(E2)水平,症状积分,总有效率和不良反应发生情况进行Meta分析。结果:最终纳入15篇文献,涉及1343例患者。Meta分析结果显示,与单纯使用HRT比较,坤泰胶囊联合HRT能明显降低卵巢早衰患者的FSH水平(MD=-7.13,95%CI=-8.08^-6.19,P<0.00001)、LH水平(MD=-5.43,95%CI=-6.99^-3.88,P<0.00001),明显提高E2水平(SMD=1.14,95%CI=0.73~1.54,P<0.00001),明显降低症状积分(MD=-4.42,95%CI=-5.55^-3.28,P<0.00001),明显提高治疗总有效率(OR=3.53,95%CI=2.53~4.94,P<0.00001)和安全性(OR=0.56,95%CI=0.31~1.01,P=0.05),差异均有统计学意义。结论:坤泰胶囊联合HRT有明显优势,能在一定程度上改善卵巢早衰患者的临床症状,减少不良反应,提高安全性,可以作为较好的辅助搭配治疗。     

开喉剑喷雾剂(儿童型)幼龄大鼠重复给药13周毒性研究

目的 依据儿科用药非临床安全性评价技术指导原则要求,对开喉剑喷雾剂(儿童型)进行幼龄SD大鼠13周毒性实验研究,为儿童临床用药提供参考.方法 160只幼龄(15日龄,PND15)大鼠,采取裂窝分层设计分组法随机分为5组,设1个空白对照组(氯化钠注射液)、赋形剂组以及低、中、高剂量组(以生药计,1.75、3.51、7.01 g/ml).在哺乳期(PND15～21),每只仔鼠给予喷雾25μl/次;断乳后,每只仔鼠给予喷雾50μl/次;当大鼠体质量达到100、200、300、400 g级别时分别给予100、200、250、300μl/次,每天给药两次,前后间隔4 h,连续给药13周,恢复期4周;每组雌雄动物于给药结束、恢复期结束时分别各剖检10、6只.检测观察指标包括:一般观察、体质量、摄食量、行为学测试、尿液、血液学、血生化、脏器质量、脏器系数及组织病理学检查等.结果 开喉剑喷雾剂(儿童型)可轻度提高动物摄食量和体质量;一些组别部分指标如血液学网织红细胞计数(RET#)升高、血小板总数(PLT)降低等,血生化碱性磷酸酶(ALP)降低、总蛋白(TP)升高等,尿液(pH改变,比重增加)以及部分脏器质量及脏器系数出现异常;病理学检查结果显示,各组动物均出现不同程度的肺损伤;对性征发育、行为学、眼科、骨髓细胞形态学等指标未见明显毒性影响.结论 在该实验所确定的条件下,开喉剑喷雾剂(儿童型、10倍于临床浓度)未见其对幼龄动物的一般毒性以及对幼龄动物身体、反射发育的不良影响.     

广金钱草多糖指纹图谱的建立、含量测定及其对α-葡萄糖苷酶的抑制活性研究

目的:建立广金钱草多糖的指纹图谱,分析其单糖组成及含量,并考察广金钱草多糖对α-葡萄糖苷酶的体外抑制作用。方法:采用水提醇沉法提取广金钱草多糖,经三氟乙酸水解、1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生化后,采用高效液相色谱法(HPLC)建立指纹图谱(以葡萄糖峰为参照),并进行单糖组成及含量分析。含量测定色谱柱为Phenomenex Luna C18,流动相为乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(用氢氧化钠调节pH至6.8),梯度洗脱,流速为0.8 mL/min,检测波长为250 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。以阿卡波糖为对照,采用对硝基苯-α-D-葡萄糖吡喃苷法考察广金钱草多糖对α-葡萄糖苷酶的体外抑制活性。结果:18批药材样品的HPLC指纹图谱有9个共有峰,其中15批药材样品的相似度大于0.90;共指认甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖等7个共有峰。其中,鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖的含量分别为0.471～2.092、1.379～8.919、2.560～35.679、1.194～6.905、0.566～4.158 mg/g;以鼠李糖为基准,其余4种单糖的摩尔比分别为1.58～4.07、2.26～19.95、2.20～4.21、1.31～2.86。广金钱草多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制活性呈现随剂量升高而增强的趋势,其半数抑制浓度为0.70 mg/mL,低于阳性对照阿卡波糖(7.76 mg/mL)。结论:不同批次广金钱草的多糖组成均以葡萄糖为主,各单糖含量有所差异。广金钱草多糖对α-葡萄糖苷酶具有明显的体外抑制作用,且活性强于阿卡波糖。