小檗碱对HeLa细胞凋亡及其凋亡相关蛋白表达的影响

目的 研究小檗碱对人宫颈癌HeLa细胞株增殖及凋亡的影响及其发生机制.方法 采用MTT法观察小檗碱对HeLa细胞增殖的影响,DNA ladder、流式细胞仪等方法进行细胞凋亡检测,用Western blotting方法检测凋亡过程中相关蛋白Bel-2和Bax表达的变化.结果 小檗碱在体外试验中能明显抑制HeLa细胞的增殖,在一定的时间、剂量范围内呈时间-剂量依赖关系.20、40 mg/L小檗碱作用48 h后,细胞DNA片段分析可看到凋亡时降解形成的梯带,流式细胞仪检测到了细胞凋亡峰,各组的凋亡率分别是(16.7±2.8)%、(29.6±4.4)%,与对照组(1.9±0.6)%和5 mg/L小檗碱组(2.3±0.8)%相比差异显著(P＜0.01).在凋亡过程中,Bax蛋白表达明显增高,而Bcl-2蛋白表达下凋.结论 小檗碱体外能抑制HeLa细胞增殖并诱导其发生凋亡,其机制可能与Bax蛋白表达明显增高,而Bcl-2蛋白表达下调有关.     

血管紧张素(1～7)在心血管中的作用

血管紧张素(1～7)的G蛋白耦联受体Mas的发现对其有了更进一步的认识。心血管系统是血管紧张素(1～7)生成和作用的重要部位。血管紧张素(1～7)具有扩张血管、降压、抑制细胞增殖和抗凝血等效应,能拮抗血管紧张素Ⅱ等物质的生物活性。血管紧张素Ⅰ和血管紧张素Ⅱ经过特异的肽链内切酶变为血管紧张素(1～7)。在此,就血管紧张素(1～7)的形成及在心血管中的作用予以综述。     

小檗碱对HeLa细胞黏附和移动作用的体外实验研究

目的研究小檗碱体外对HeLa细胞黏附和移动的作用及机制。方法5、20、40mg／L小檗碱作用于HeLa细胞，黏附实验检测细胞黏附率，划痕损伤实验检测迁移率，流式细胞术测定MMP2、TIMP2的表达。结果HeLa细胞黏附率、迁移率明显降低，随药物浓度增大作用增强，小檗碱处理组MMP2阳性表达细胞减少，TIMP2阳性表达细胞增多，MMP2／TIMP2比值下降。结论小檗碱体外能抑制HeLa细胞黏附与转移，其机制可能与直接抑制细胞迁移运动及抑制细胞MMP2蛋白表达，促进TIMP2蛋白表达有关。     

某医院门诊 急诊抗感染药物使用情况分析

<正>为进一步了解抗感染药物使用情况,逐步规范临床合理用药,我们对2008年6月至11月我院门诊、急诊处方抗感染药物使用情况进行了回顾性分析,为临床合理用药提供参考。     

青蒿琥酯通过抑制ERK1/2蛋白活化负性调控HSC-T6细胞cyclin D1的表达和AP-1活性

目的: 通过观察青蒿琥酯(artesunate,Art)对肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)细胞外信号调节蛋白激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase 1/2,ERK1/2)、激活蛋白1(activator protein 1,AP-1)和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的影响,探讨Art抗肝纤维化的分子机制。方法: 用血小板源性生长因子BB(platelet-derived growth factor BB, PDGF-BB)诱导HSC-T6细胞的增殖。实验分为对照组、PDGF-BB组、PDGF-BB+Art组(Art终浓度6.25 mg/L、25 mg/L、50 mg/L)和PDGF-BB+ERK抑制剂PD98059组。ELISA法测定细胞上清液中Ⅰ型胶原的含量,RT-PCR检测各组ERK1/2和cyclin D1 mRNA水平变化,Western blotting法检测各组p-ERK1/2和cyclin D1蛋白表达水平,凝胶电泳迁移率实验(EMSA)检测AP-1的活性。结果: (1)PDGF-BB 可明显促进HSC-T6细胞的增殖,PDGF-BB+Art各剂量组和PDGF-BB+PD98059均可抑制HSC-T6细胞上清液中Ⅰ型胶原的含量(P<0.05,P<0.01)。(2)PDGF-BB+Art组(50 mg/L)ERK1/2 mRNA的表达低于PDGF-BB组(P<0.05),其中PDGF-BB+PD98059组ERK1/2 mRNA的表达最低(P<0.01);PDGF-BB+Art组(25 mg/L、50 mg/L)和PDGF-BB+PD98059组cyclin D1 mRNA的表达明显低于PDGF-BB组(P<0.05,P<0.01)。(3)p-ERK1/2、cyclin D1蛋白表达水平在PDGF-BB组最高,而PDGF-BB+Art各剂量组和PDGF-BB+PD98059组降低(P<0.05,P<0.01)。(4)Art可使AP-1与DNA结合活性下降。结论: Art可抑制HSC-T6细胞增殖,其机制可能与其抑制ERK1/2蛋白活化从而降低AP-1的活性和下调cyclin D1的表达有关。     

U83836E对大鼠离体心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨第2代拉扎碱（U83836E）对大鼠离体心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法 用Langendofff灌注系统,建立大鼠离体全心缺血再灌注损伤模型。观察不同时间注射U83836E对复灌后心脏舒缩功能、心肌乳酸脱氢酶（LDH）、肌钙蛋白（cTnT）及热休克蛋白70（HSP70）的影响。结果 U83836E可改善大鼠离体心脏缺血再灌注后的功能,与模型组比较,左心室收缩压（LVSP）升高（P<0.01）,左心室舒张末压（LVEDP）降低（P<0.05）,左心室压力最大上升和下降速率（±dp/dt_max）加快（P<0.01）;冠脉流出液中的乳酸脱氢酶和肌钙蛋白含量减少（P<0.01）,并可诱导心肌组织产生热休克蛋白70（P<0.01）。结论 U83836E对大鼠离体心肌缺血再灌注损伤具有保护作用。     

细胞色素氧化酶P4501A2与恶性肿瘤发病的关系

细胞色素氧化酶P4 50在肿瘤的发病和治疗中起着不容忽视的作用。其中CYP1A2引起人们更多的关注 ,它除对某些药物代谢外 ,还在一些外源性的前致癌物激活过程中起着重要的作用。由于CYP1A2受环境因素及遗传因素的影响 ,不同个体之间其含量及活性相差较大。这种差异使人们注意到某些肿瘤的发病与不同地区的人群和不同的个体之间存在着易患性有关。从而提醒人们通过改变生活方式来降低肿瘤的发病率。     

中药“胃康复Ⅲ号”的药效实验研究

胃溃疡是临床上常见的一种消化系统疾病，多年来国内外主要应用抗酸药物治疗，收到了一定的疗效，但大部分西药都有不同程度的副作用。近年来，我国中西医结合工作者充分挖掘祖国医药宝库，根据辨证施治的理论，将中草药用于溃疡病的治疗，在促进溃疡早期愈合的同时也减少了不良反应的发生，取得了令人鼓舞的疗效。“胃康复Ⅲ号”是由黄芪、砂仁、没药等多味中组成，经临床试用证明本方对溃疡病有治疗作用。为进一步证实其疗效，我们对“胃康复Ⅲ号”进行了药效实验研究。１　材料及方法１．１　材料　①药品：胃康复Ⅲ号由山西长治市中医院…     

肺微血管内皮细胞原代培养方法的建立

目的建立大鼠肺微血管内皮细胞原代培养方法,观察细胞生长状态并鉴定细胞性质。方法 4~5周龄大鼠随机分成3组,无菌状态下剥除胸膜,将肺组织边缘剪成1 mm3的大小,贴入一次性培养瓶,分别用含肝素钠的DMEM完全培养液、RPMI1640完全培养液以及含原代内皮细胞培养特制添加剂的完全培养液培养,在倒置显微镜下观察细胞生长和形态,免疫荧光组织化学染色观察细胞CD31的表达。结果与2组对照组相比,采用含原代内皮细胞培养特制添加剂的完全培养液培养,获得的肺微血管内皮细胞数量多,纯度高。内皮细胞于24 h迁移出肺组织块,14 d左右汇合,呈多角形,以铺路石样镶嵌状排列生长。传代细胞呈长梭形,生长迅速,具有自发形成血管的倾向。细胞为CD31免疫反应阳性,证实其为内皮细胞。结论采用组织块贴壁法,选择原代内皮细胞培养特制添加剂以及优化分离过程,可以获得高纯度原代大鼠肺微血管内皮细胞。