Presenilin1/Presenilin2双基因敲除小鼠中氧化损伤增加

目的观察3,6,9,12月龄presenilin1和presenilin2双敲除小鼠（dKO）脑组织氧化损伤情况,探讨氧化损伤与presenilins功能丧失所引起的阿尔茨海默病样症状之间的关系。方法酶联免疫反应（ELISA）检测dKO小鼠大脑皮层中Aβ42水平和尿液中8-羟基脱氧鸟苷（8-hydroxy-2-deoxyguanosine,8-OHdG）水平;硫代巴比妥酸法检测脂质过氧化水平,分光光度计测定DNPH法检测蛋白质损伤水平;试剂盒法检测超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性。结果与对照组相比,dKO小鼠大脑皮层中Aβ42水平显著降低。同时,除了在3月龄dKO小鼠大脑皮层中发现脂质过氧化水平有显著增加外,蛋白质损伤在各年龄段dKO小鼠中均没有明显变化。ELISA检测结果显示尿液中游离的8-OHdG水平在各年龄段的dKO小鼠中均显著降低。SOD和GSH-PX活性均无明显变化,只有9月龄dKO小鼠中的GSH-PX活性有显著增高。结论氧化损伤特别是DNA损伤参与dKO小鼠神经退行性症状的发生过程;由于dKO小鼠大脑皮层中没有Aβ42的沉积,推测造成氧化损伤的原因可能是由活化的小胶质细胞和星形胶质细胞所释放的免疫因子介导的。     

G-蛋白偶联受体的功能测定和高通量药物筛选

G 蛋白偶联受体家族是药物开发中最大的一类药物靶点 ,高通量药物筛选是开发药物早期阶段的最重要工具之一。根据G 蛋白偶联受体与配体结合及激发的信号通路 ,人们设计了各种可行的功能测试方法 ,用于G 蛋白偶联受体为药靶的高通量药物筛选 ,如 :微体积荧光数字图像测定技术 (Fluorometicmicrovolumeassaytechnology ,FMAT)、荧光偏振 (Fluoresencepolarization ,FP)、竞争性ELISA (Com petitiveenzyme linkedimmunosorbent)、闪烁邻近测定法(Scintillation proximityassay ,SPA)、载黑色素细胞测定法(Melanophoreassay)、报告基因测定法 (Reportergeneassay)和钙离子测定法等测定方法。在这些方法中 ,报告基因测定法和钙离子测定法占了主导地位。非放射性、无需底物和辅助剂的报告基因测定方法和荧光钙离子指示剂的钙离子测定方法可能是将来G 蛋白偶联受体的功能分析和高通量药物筛选的发展方向     

二甲双胍在大鼠体内的药动学和组织分布

目的研究二甲双胍在大鼠体内的药动学和组织分布。方法大鼠腹腔注射二甲双胍(100 mg·kg~(-1))并在0、10、20、30、60、120、240、480和720 min共9个时间点采集血样(大鼠共3只)和各组织样品(大鼠共27只,每个时间点3个),测定血浆和组织样品中的二甲双胍的浓度。结果AUC为(4 676±s 171)mg·min·L~(-1),CL为(21.4±0.8)mL·min~(-1)·kg~(-1),t(1/2)为(50±5)min,t_(max)为(20.0±1.0)min,c_(max)为(59±4)mg·L~(-1):给药后10 min,所有的组织中都能检测到二甲双胍,给药后12 h,肝脏、肺、脾脏和大脑中已检测不到二甲双胍。结论二甲双弧的血药浓度-时间曲线符合一室模型,在体内叹收快,兮布广泛,清除迅速,且可能主要是由肾脏清除;二甲双胍能够进入大脑。     

Caco-2细胞中二甲双胍的摄取和转运特征

目的从细胞和分子水平考察二甲双胍在Caco-2细胞上的摄取和通透性质,探讨二甲双胍与药物抵抗蛋白特别是P-gp的相互关系。方法HPLC方法对二甲双胍在Caco-2细胞摄取和通透性作定量分析;RT-PCR方法测定二甲双胍对MDR1基因表达的影响;钙黄绿素(calcein AM)测定体系考察二甲双胍与多药抗药性转运体(P-gp、MRP1和MRP2)的作用关系。结果二甲双胍在Caco-2细胞上摄取呈浓度相关性,且有较强通透性(Papp=2.86×10-6cm.s-1);二甲双胍摄取和转运不因P-gp特异性抑制剂维拉帕米存在与否而改变;二甲双胍能提高MDR1基因表达;对细胞中calcein水平无影响。结论二甲双胍在Caco-2细胞上易转运,不是P-gp底物,对MDR1表达有上调作用,对P-gp和MRPs无抑制作用。     

社会比较对象对后悔情绪波动性的影响:一项静息态fMRI研究

目的采用连续风险决策任务范式,通过功能核磁共振技术来探究在静息状态下脑区之间功能连接对于不同社会比较对象所引起的后悔情绪波动性的影响。材料与方法共有38名健康大学生被试参与本研究。实验中,被试需要假想有两个不同的对手(亲密好友与陌生人),他们会和自己同时完成连续风险决策任务,双方的结果会同时呈现在一起,被试根据双方结果进行情绪评分。所采集到的静息态数据通过功能磁共振静息态数据处理助手(data processing assistant for resting-state fMRI,DPARSF)来处理并计算脑岛(insula)与眶额叶皮层(orbital frontal cortex)等其他脑区的功能连接值,最后进一步将功能连接值与情绪评分指标(情绪波动性)及社会比较量表进行相关分析。结果在收益情境下,个体的结果比陌生人差时,脑岛与眶额叶皮层的功能连接与被试的情绪波动性呈负相关(r=-0.399,P0.05),该功能连接也与个体的社会比较能力呈负相关(r=-0.472,P0.01)。结论个体在静息状态下,脑岛与眶额叶皮层的功能连接与个体在面对陌生人时的情绪波动性及社会比较能力有关。     

经济状况对不公平感相关决策的影响:基于静息态的fMRI研究

目的使用最后通牒博弈任务,通过静息态功能磁共振成像技术探究功能连接对于提议者经济状况对回应者不公平感相关决策产生影响的预测作用。材料与方法 30名健康被试参与本研究。在任务中,被试首先会得知提议者的经济状况(好或差),之后会得知来自提议者的分配方案,他们可以选择接受或拒绝该分配。本研究采用被试的拒绝率和公平感评分来衡量提议者经济状况对回应者进行决策的影响。通过静息态功能磁共振数据处理助手(data processing assistant for resting-state fMRI,DPARSF)处理采集到的静息态数据并计算右侧背外侧前额叶皮层及右侧丘脑与全脑体素的功能连接值,进一步将功能连接值与拒绝率和公平感评分进行相关分析。结果当不公平分配来自于经济状况较好提议者时,右侧背外侧前额叶皮层和右侧内侧前额叶皮层的功能连接与拒绝率之间呈负相关(r=-0.80,P0.01),右侧丘脑与左侧内侧前额叶皮层的功能连接与公平感评分之间呈负相关(r=-0.59,P0.01)。结论在静息状态下背外侧前额叶皮层、丘脑及内侧前额叶皮层间的功能连接对于经济状况对不公平感相关决策的影响具有一定的预测作用。     

重组人胰高血糖素样肽-1衍生物诱导PC12细胞的分化

Glucagon-like peptide-1 (GLP-1) and its long-acting analogues have neuroprotective and neurotrophic properties and are emerging as potential treatments for neurodegenerative diseases.Its short half-life has limited the application of GLP-1 in the clinic.We generated a mutated form of human GLP-1 (mGLP-1) using site-directed mutagenesis and gene recombination techniques,and found that these modifications significantly prolonged the biological half-life of GLP-1 compared with native GLP-1 (nGLP-1).This study investigated the role of mGLP-1 on inducing PC12 cell differentiation.mGLP-1 induced PC12 cell differentiation with neurite outgrowth and increased the expression of growth-associated protein-43 and neuronal class III-tubulin,and significantly increased cyclic adenosine monophosphate level.No significant difference was found between mGLP-1 and nGLP-1.The results indicate that mGLP-1 activates the GLP-1 receptor,induces PC12 cell differentiation,and has neurotrophic effects.     

咬合改变和束缚应激中小鼠全脑神经激活的比较研究

目的 观察咬合改变导致小鼠焦虑情绪后全脑神经元激活情况,并与束缚应激中全脑神经元激活情况进行比较,以探索咬合改变致小鼠焦虑情绪的神经机制。方法 选取成年C57BL/6J雄性小鼠随机进行实验,咬合升高后第7、8天分别进行旷场测试、高架十字迷宫测试检测动物焦虑样行为。免疫荧光染色观察小鼠在咬合升高、束缚刺激后2 h全脑cfos蛋白表达情况。结果 咬合升高后1周小鼠焦虑样行为显著增加(P＜0.05),咬合升高或束缚刺激2 h后全脑部分神经元激活,其中屏状核、伏隔核、外侧隔核、下丘脑室旁核、孤束核中表达cfos蛋白的神经元数目在两种刺激中均显著增加(P＜0.05)。结论 咬合改变与束缚刺激后小鼠全脑激活神经元存在差异,但在屏状核、伏隔核、外侧隔核、下丘脑室旁核、孤束核中共同激活。     

谷氨酸致人神经母细胞瘤细胞兴奋性毒损伤的机制(英文)

目的探讨谷氨酸导致人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y cells)兴奋性毒损伤的机制。方法MTT法检测SH-SY5Y细胞存活率;测定乳酸脱氢酶释放量观察细胞损伤程度;DAPI染色法观察细胞凋亡形态学特点;钙流法检测胞浆钙离子浓度变化 ;以胞内谷胱甘肽、超氧化物歧化酶活性和胞外丙二醛含量检测谷氨酸引发SH-SY5Y细胞的氧化应激状态。结果谷氨酸导致SH-SY5Y细胞受损,包括存活率下降、乳酸脱氢酶释放量增多及形态结构发生改变;谷氨酸处理 20 min 后,胞浆钙离子浓度无显著改变,而处理 24 h 后,胞浆钙离子大量增加,且 MK801 (NMDA受体拮抗剂)及LY341495 (代谢型谷氨酸受体拮抗剂)均不能抑制钙离子内流的增多;谷氨酸可导致SH-SY5Y氧化损伤,包括胞内谷胱甘肽含量减少、超氧化物歧化酶活性降低、胞外脂质过氧化产物丙二醛水平升高等,而丹参酮IIA (一种抗氧化剂)可减轻这些氧化损伤。结论谷氨酸导致SH-SY5Y细胞兴奋性毒损伤可能是通过氧化损伤产生的,而不依赖于 NMDA 受体介导的钙稳态的破坏。     

磨牙咬合升高对小鼠短期内焦虑情绪的影响

目的:建立磨牙咬合升高小鼠模型,观察其短期内焦虑样情绪及臂旁核、杏仁核中神经元激活水平的变化。方法 :8周龄C57BL/6J雄性小鼠,随机分为2组:假手术组和咬合升高组。造模后连续记录体重及进食量;于第1天、第3天、第7天及第14天,行高架十字迷宫测试、旷场测试、新环境抑制进食测试、社交探索测试等焦虑样情绪相关的行为学检测;免疫荧光染色观察小鼠杏仁核中央区Fos蛋白表达水平。结果:磨牙区咬合升高对小鼠体重、进食量及基础活动能力并无短期影响。在处理后7、14 d,咬合升高组小鼠焦虑样行为明显增加。与假手术组相比,咬合升高导致小鼠臂旁核、杏仁核神经元激活水平升高。结论:磨牙区咬合升高会导致小鼠短期内焦虑样情绪水平增加。