Raji-MG63细胞共培养体系中心肌营养蛋白样细胞因子1(CLCF1)对RANKL/OPG比值及成骨细胞分化的影响

目的探讨Raji-MG63细胞共培养体系中,心肌营养蛋白样细胞因子1(cardiotrophin-like cytokine factor 1,CLCF1)基因对骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)和成骨细胞分化的影响。方法通过CRISPR/Cas9基因编辑技术构建CLCF1基因敲除Raji细胞系,实验分2组:对照组(Control组)和CLCF1敲除组(CLCF1-KO组)。应用Transwell技术建立Raji-MG63细胞共培养体系,通过蛋白质印迹法(western blot,WB)检测CLCF1、OPG、RANKL及JAK2/STAT3蛋白的变化。运用碱性磷酸酶(ALP)活性检测和茜素红染色观察成骨细胞分化能力。结果WB结果显示,与对照组比较,CLCF1敲除组OPG(P<0.01)蛋白明显下调,RANKL/OPG比值升高(P<0.001),磷酸化JAK2(P<0.001)和STAT3(P<0.01)蛋白明显下调,差异具有统计学意义;ALP活性检测和茜素红染色结果显示,Raji-MG63细胞共培养体系中,CLCF1敲除组MG63细胞ALP活性和矿化形成能力降低,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.001)。结论CLCF1基因能通过调控RANKL/OPG比值和JAK2/STAT3通路影响成骨细胞分化。     

续苓健骨颗粒治疗肾虚血瘀型绝经后骨质疏松症的疗效及转录机制研究

探讨续苓健骨颗粒治疗肾虚血瘀型绝经后骨质疏松症的临床疗效及转录组机制。方法 选取肾虚血瘀型绝经后骨质疏松症患者,随机分为续苓健骨颗粒试验组及骨化三醇对照组。观察两组中医证候积分、骨密度及安全性指标。取6例试验组患者治疗前、后的外周血进行转录组测序,另选6例健康组作为对照,筛选差异表达基因并行KEGG分析。结果 完成病例：试验组27例,对照组27例。试验组中医证候疗效总有效率为96.30 %,显著优于对照组的77.78 %（P?0.05）。治疗后两组中医证候积分、腰脊刺痛、下肢痿软等临床症状评分较治疗前均下降（P<0.05）,但组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。两组治疗前后骨密度比较差异无统计学意义（P>0.05）,但均保持稳定或呈现上升趋势。两组均未出现严重不良反应。转录组测序：试验组治疗前、后有319个差异基因;试验组治疗前与健康组有598个差异基因,其中19个差异基因（包括FOSB、H4C2、RAMP3等）在治疗后其表达显著改变。KEGG分析结果表明,FOSB参与破骨细胞分化、IL-17信号通路。结论 续苓健骨颗粒治疗绝经后骨质疏松症,能够显著改善临床症状,中医证候疗效优于骨化三醇,其作用机制可能与FOSB、RAMP3、H4C2基因及FOSB参与的破骨细胞分化、IL-17信号通路相关。     

骨碎补-续断药对对成骨/破骨代谢的双向调控作用及其对Hif1ɑ基因的影响

目的 分析骨碎补-续断药对对成骨/破骨代谢的调控作用并初步探讨其机制。方法 分别制备空白、低剂量、中剂量及高剂量的骨碎补-续断含药血清。采用CCK-8法、ALP染色法和茜素红染色法,分别观察含药血清对MC3T3-E1细胞增殖、成骨和矿化能力的影响;采用CCK-8法和TRAP染色法观察含药血清对RAW264.7细胞增殖和破骨分化能力的影响。采用系统药理学的方法分析药物的可能作用靶点,并结合RT-PCR和Western-blot的方法验证。结果 中剂量和高剂量骨碎补-续断含药血清可促进MC3T3-E1细胞的增殖,抑制RAW264.7细胞的增殖,中剂量组和高剂量组间没有明显差异;同时,中、高剂量含药血清可促进MC3T3-E1细胞的ALP活性和钙化能力,抑制RAW264.7细胞的TRAP活性,中剂量和高剂量间没有显著性差异。骨碎补-续断药对的可能作用靶点涉及HIF1ɑ,RT-PCR和Western-blot结果证实中剂量含药血清可提高MC3T3-1细胞Hif1ɑ基因的mRNA和蛋白水平及RAW264.7细胞的HIF1ɑ蛋白水平。结论 骨碎补-续断药对具有促进成骨代谢,抑制破骨代谢的作用,HIF...     

灸脐对原发性痛经志愿者IRRTM和MBPU的影响

目的:观察灸脐对原发性痛经志愿者任脉线上循经红外辐射轨迹(IRRTM)和微循环血流灌注量(MBPU)的影响。方法:运用石墨烯智能理疗仪对入选的20例原发性痛经志愿者进行灸脐观察,比较灸脐前及灸脐30 min后任脉线上IRRTM和MBPU变化情况。结果:用石墨烯智能理疗仪灸脐可以使任脉线上IRRTM变长、均匀,可以使任脉线上关元穴区MBPU升高(P0.01)。结论:石墨烯智能理疗仪灸脐能够疏通因原发性痛经导致的气血运行不畅,其主要作用是改善任脉线上的微循环,使得任脉线上的IRRTM均匀连贯。     

畲药十二时辰本草乳膏的处方工艺优选及药效学初探

目的 优选畲药十二时辰本草乳膏的处方工艺,并对其药效学进行研究。方法 运用Box-Behnken响应面法,优化畲药十二时辰本草乳膏处方工艺;通过醋酸扭体法、甲醛致痛模型、热板法观察畲药十二时辰本草乳膏的镇痛效果(P<0.05,P<0.01)。结果 单硬脂酸甘油酯0.60 g、硬脂酸2.5 g和十二烷基硫酸钠0.3 g为畲药十二时辰本草乳膏油相基质的最优配方。制得的畲药十二时辰本草乳膏具有较好的镇痛效果。结论 优化后的畲药十二时辰本草乳膏稳定性良好,制备工艺重现性良好,有明显的镇痛作用且随着剂量的增加作用增强,为临床提供了实验依据。     

畲药十二时辰的质量标准研究

目的 建立畲药十二时辰的质量标准,为其质量控制和开发提供参考。方法 对十二时辰进行性状、显微特征、薄层色谱鉴别;参照《中华人民共和国药典》2020年版相关规定,对十二时辰水分、灰分、浸出物进行测定;以齐墩果酸为对照物质,采用高效液相色谱法对其含量进行检测。结果 十二时辰药材在性状、显微和TLC鉴别方面均有专属性特征;6批不同采收期的十二时辰水分平均值为11.79%,总灰分平均值为3.16%,酸不溶性灰分平均值为0.34%,热浸法水溶性浸出物含量为31.46%;含量测定齐墩果酸平均质量分数为1.72%。结论 该研究结果可为畲药十二时辰的质量标准的制定提供依据,暂定本品水分不得超过14.0%,总灰分不得超过4.00%,酸不溶性灰分不得超过0.40%,浸出物含量不得低于25.00%。     

人工生态种植对土壤理化性质、多花黄精产量及品质的影响

目的：研究不同人工生态种植模式对土壤理化性质、肥力、多花黄精产量和品质的影响。方法：以野生混交林的土壤和野生多花黄精为对照,测定黄桃、杉木林及竹林在人工生态套种多花黄精下,土壤理化性质、土壤肥力、多花黄精块茎生长量和黄精药材指标性成分含量。结果：3种人工生态种植模式能显著提升土壤物理性状及肥力,并提高多花黄精块茎生长量及药材品质,影响大小顺序为：黄桃套种>杉木林套种>竹林套种>CK。黄桃套种模式下,土壤含水量、pH值、孔隙度分别为20.42%、6.23和56.24%,容重仅为0.71 g/cm³;土壤有机质、有效磷、速效钾、碱解氮含量分别为112.33、506.47、722.14和483.60 mg/kg;多花黄精种植3年块茎重量、块茎生长量和相对生长速率分别为378.97 g、354.22 g和1 433.78%;多花黄精块茎醇溶性浸出物和总多糖含量分别为86.14%和15.53%。结论：人工生态种植能改善土壤的物理性状,提升土壤肥力,提高多花黄精产量和药材品质,其中以黄桃套种多花黄精的人工生态种植模式效果最佳,该研究为多花黄精人工生态种植技术...     

林丽莉教授从肝辨治“畏光失眠”经验

“畏光失眠”是由患者自觉夜卧闭目时眼周有微弱光线刺激而难以入寐的一种疾病。林丽莉教授认为畏光多因肝木失和、目睛失养与肝病及脾、精不养目而发;失眠多因肝郁化火、魂神不守抑或是肝血亏虚、魂神失养而发。畏光与失眠病机本质皆与肝有关,临床上常同时并见,故合称为“畏光失眠”,治疗上以调肝和目为主,兼以安神。肝郁化火者选用逍遥散、柴胡疏肝散合决明子、菊花等清肝明目之品加减;肝血亏虚者以酸枣仁汤为基本方加减,同时不忘顾护脾胃,防止肝病传脾,故在基本方的基础上加党参、黄芪等益气扶正之品。外治方面辅以针刺睛明、风池等穴位,一指禅偏锋推眼眶,生姜刮痧,隔行气药灸等。针灸推拿联合中药内调,从而取得佳效。