一对高亲和力抗人肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体的制备及鉴定

目的 获取抗人肌钙蛋白Ⅰ（cTnI）的单克隆抗体（McAb）.方法 以人cTnI作为抗原,免疫Balb/c小鼠,通过杂交瘤技术制备了抗人cTnI高亲和力、高特异性单克隆抗体.随后采用间接ELISA法测定抗血清效价,用protein G亲和纯化法纯化抗体,抗原竞争ELISA法鉴定抗体亲和力,SDS-PAGE法鉴定纯度,Western blotting鉴定抗cTnI单克隆抗体的特异性,竞争ELISA法分析抗原结合位点.结果 筛选出9株稳定分泌抗cTnI的单抗杂交瘤细胞株,其中A3、A9两株免疫球蛋白亚类均为IgG2a,分泌的抗体纯度高,与CK-MB、cTnT无交叉反应,效价均为：1：1024000,亲和力分别为4.21×10^8mol/L、1.07×10^8mol/L,抗原结合位点不同.结论 成功制备出了一对高亲和力、高特异性抗人cTnI单克隆抗体.     

静电纺丝新技术及其在生物医药领域的应用

介绍几种静电纺丝法调控纤维形态和结构的新技术,包括制备芯-鞘、中空、多孔、串珠状纤维和取向结构纤维的技术.制备芯-鞘结构纤维的主要方法包括同轴共纺、乳液电纺和相分离.其中,同轴共纺和相分离的方法可以加以延伸,成为制备中空纤维的技术.将两种材料进行混纺,再除去其中一种成分,可以得到具有多孔结构的纤维.乳液电纺也可应用于串...     

中国不同地理居群半夏遗传多样性分析

半夏Pinellia ternate (Thunb) Breit为天南星科半夏属植物，以块茎入药［1］。我国大部分地区均有分布。但是随着半夏野生资源逐渐减少，民间多以同属其他植物作为代替品入药，加之引种途径各异，长期无性繁殖，导致品种退化。许多地区品种背景资料，种系不清，缺乏统一的分类标准，使得古方中所用道地药材在形态和质量方面出现变化，给半夏的临床用药安全带来很大的隐患。因此，就需要一种可靠的分类鉴定手段。本实验应用AFLP(amplified fragment length polymorphism)分子标记技术，对采自我国30个不同地理居群的半夏遗传多样性进行了分析。     

新型基因载体G5-PAMAM-D在前列腺癌HSV-tk/GCV自杀基因系统中的应用

背景与目的:考察纳米级阳离子聚酰胺-胺型树枝状聚合物(polyam idoam ine dendrimers,PAMAM-D)作为基因载体进行前列腺癌自杀基因治疗的可行性,为前列腺癌的基因治疗寻找新的基因载体。方法:以第5代PAMAM-D(G5-PAMAM-D)为载体将含增强型荧光蛋白(EGFP)基因片段的重组质粒pEGFP-C1转染至前列腺癌细胞系PC-3和22Rv1,成功表达EGFP后,再以G5-PAMAM-D为载体将含HSV-tk自杀基因的真核表达重组质粒pcDNA3-tk转染至前列腺癌细胞系PC-3和22Rv1,转染48h后,对转染的两种细胞给予浓度为0、10、100、1000、10000μmol/L前体药更昔洛韦(Ganciclovir,GCV),24h后采用MTT比色法测定药物对细胞增殖的影响。制作前列腺癌皮下荷瘤小鼠,将G5-PAMAM-D/pcDNA3-tk复合物瘤内注射,24h后腹腔注射GCV,观察这一复合物体内对肿瘤生长的抑制作用。结果:荧光观察及FCM结果证明G5-PAMAM-D可将pEGFP-C1转入两种前列腺癌细胞并表达EGFP。采用G5-PAMAM-D将pcDNA3-tk重组质粒转染PC-3和22Rv1细胞,给不同浓度的前体药GCV后,实验组细胞与对照组相比有明显浓度依赖性生长抑制。荷瘤小鼠在给予瘤内注射G5-PAMAM-D/pcDNA3-tk复合物后,行腹腔注射GCV,治疗后第40天,实验组肿瘤体积(1135±245mm3)与对照组裸质粒组(9965±2109mm3)和PAMAM-D组(8357±1956mm3)相比肿瘤生长明显被抑制(P<0.01),生存时间延长。结论:G5-PAMAM-D可作为前列腺腺癌自杀基因治疗的基因载体,有良好的应用前景。     

甜梦口服液治疗冠脉搭桥术后患者焦虑抑郁的临床观察

冠状动脉搭桥术(coronary artery bypass grafting,CABG)是治疗冠心病的重要手段,但作为一种手术创伤,常导致患者产生焦虑、抑郁等心理应激反应[1],影响患者的康复。笔者观察甜梦口服液治疗CABG术后患者焦虑、抑郁的效果,现报道如下。1资料与方法1.1临床资料:为本院2004年4月至     

G-821树脂提取三七叶皂苷的工艺研究

三七为五加科植物三七Panax notoginseng(Burk)F.H.Chen的块根,具有活血化瘀、消肿止痛的作用,且能滋补强身。其主要活性成分为三七总皂苷。三七叶与块根有相似的药理作用,其主要活性成分亦为三七总皂苷,以人参皂苷Rb1、Rg1、Re和三七皂苷R1为主要成分。对于三七叶中有效成分的     

普适计算环境下信任机制的研究进展

在普适计算环境下,各种资源、设备和用户均是高度动态变化的,服务请求者和服务提供者一般互相不了解,因此普适计算环境下各陌生实体间的相互认证是传统的基于身份的认证机制无法解决的.普适计算信任建模机制可以解决普适计算环境下的不确定性问题,为陌生实体间建立信任关系,因此成为普适计算中的一个研究热点.基于此,本文对于目前国外关于普适计算信任建模机制的研究现状做了一个总结,通过分析和比较,给出了普适计算信任建模的设计原则,探讨了普适计算信任建模问题的未来发展方向.     

莲子心提取物抗心律失常作用及其急性毒性研究

目的 研究莲子心提取物的抗心律失常药效作用及其急性毒性.方法 采用氯仿、乌头碱诱发心律失常动物模型,分别观察了5个莲子心提取物样品的抗心律失常作用及急毒情况.结果 树脂吸附法制备的提取物的抗心律失常效果优于3种单体及溶剂萃取法制备的提取物,而且毒性也最低.结论 莲子心树脂吸附法提取物药效好、毒性小,具有一定的开发前景.     

芦荟大黄素对T淋巴细胞增殖和细胞[Ca2+]i变化的影响

目的研究芦荟大黄素对植物血凝素(PHA)引起的大鼠T淋巴细胞增殖和细胞内Ca2 浓度([Ca2 ]i)变化的影响,探讨芦荟大黄素对T淋巴细胞增殖的作用和机制。方法采用MTT法检测细胞增殖,用单细胞钙成像系统记录细胞胞浆[Ca2 ]i。结果芦荟大黄素对PHA引起的细胞增殖有显著抑制作用,且其抑制作用与剂量有关;加入PHA引起细胞[Ca2 ]i迅速升高,并持续维持高[Ca2 ]i水平,芦荟大黄素对PHA引起的[Ca2 ]i升高有显著抑制作用,其作用途径包括阻断胞内Ca2 释放和抑制胞外Ca2 内流。结论芦荟大黄素可抑制T淋巴细胞增殖,其作用机制可能与抑制淋巴细胞内[Ca2 ]i升高相关。     

基于剂量-反应模型的苯职业暴露健康风险定量评价方法研究

目的 初步建立一种评价职业暴露导致的健康风险的定量方法,为我国职业健康风险的定量研究提供理论依据.方法 根据健康风险评价的基本方法,利用剂量-反应模型计算个体暴露于剂量为d的某物质所导致的致癌概率.暴露物质的人体内剂量与致癌概率间的函数关系可用probit模型、logit模型、Weibull模型、单击模型、多击模型和多阶模型来表达.通过药代动力学分析或人类流行病学数据拟合,可以得到暴露剂量与人体内剂量间的函数关系,将其带入剂量-反应模型,即可得出不同环境浓度下暴露人群的致癌风险.结果 根据测得的环境苯浓度值,分别用2阶模型、单击模型和Weibull模型计算得到的剂量-反应曲线均为直线,2阶模型得出的致癌风险最高,Weibull模型得出的致癌风险最小,苯的平均浓度为7.25 mg/m3时,3个模型对应的风险值分别为7.50×10-4、1.83×10-4、2.31×10-6.结论 初步建立了一种定量评价职业健康风险的方法,可利用此方法对工作场所中的有害物质暴露情况进行分析,得出工人在此环境下的致癌风险.