抗ICAM-1单克隆抗体的制备与特性鉴定

目的:制备有生物学活性的抗人细胞间黏附分子-1(ICAM-1)单克隆抗体(mAb)并进行特性鉴定。方法:以纯品ICAM-1为抗原免疫BALB/c小鼠4次。采用杂交瘤技术,经3次亚克隆筛选稳定分泌抗人ICAM-1 mAb的杂交瘤细胞株。采用动物体内诱生的方法大量制备mAb。以protein G对其进行纯化后,用间接ELISA法测定mAb的效价并鉴定其Ig亚类。用Western blot鉴定mAb的特异性。结果:筛选出4株可稳定分泌抗人ICAM-1 mAb的杂交瘤细胞株,分别命名为B9株、F1株、C11株和D6株。4株mAb的Ig亚类均为IgG1。4株mAb培养上清的效价均为1∶1 000;腹水的效价B9株与D6株为1∶2×105,F1株与C11株为1∶4×105。纯化后mAb的蛋白浓度为1.2 g/L,均可与ICAM-1特异性结合。结论:成功制备出效价高、特异性良好的4株抗ICAM-1 mAb,为进一步研究ICAM-1的生物学功能和临床应用奠定了基础。     

人甲状腺过氧化物酶抗原决定簇基因在E.coli细胞中的表达

目的：探索在E.coli BL21中表达hTPO抗原决定簇片段（AA568－AA874）。方法：将hTPO抗原决定族基因（1702－2622,编号相对于起始密码子）连接到表达型载体pGEX-4T-3,构建重组表达质粒。然后转化E.coli BL21,IPTG诱导表达。表达产物采用亲和层析方法纯化,SDS－PAGE法测定其分子质量,ELISA法鉴定免疫学活性,考马斯亮蓝染色法定量。结果：成功地表达了hTPO抗原决定簇基因。纯化的GST－hTPO融合蛋白分子质量为61.4ku,hTPO片段分子质量为37.6ku。以此作为抗原按ELISA法分别与TPOAb阳性血清或阴性血清反应,结果表明,GST－hTPO及hTPO片段均与TOPAb特异性结合。纯化的GST－hTPO产量为10mg/L培养基;hTPO片段产量为1.2mg/L培养基。结论：利用基因工程技术可获得高纯度的GST－hTPO融合蛋白及hTPO片段,产物具有良好的免疫学活性。     

细胞间粘附分子-1与自身免疫性甲状腺疾病

近年研究表明细胞间粘附分子 1与自身免疫性甲状腺疾病发病密切相关 ,综述了细胞间粘附分子 1的结构和功能、在自身免疫性甲状腺疾病中的表达、与甲状腺浸润淋巴细胞之间的相互作用、与甲状腺自身抗体之间的关系以及在甲状腺功能亢进伴突眼中的作用 ,并且简述了细胞间粘附分子 1的单克隆抗体的应用。     

核医学激素测定在甲状腺疾病中的应用

叙述了应用核技术测定血清STSH、FT₃、FT₄等项参数来评价甲状腺疾病的甲状腺功能;介绍了血清内抗甲状腺抗体、抗甲状腺自身抗体、Tg与降钙素的测定在甲状腺疾病中的应用;并对-些特殊类型甲状腺疾病如T₃甲亢、T₄甲亢、高TSH甲亢及甲状腺激素不应症(或称甲状腺激素抵抗综合征)等方面的应用进行阐述。