三氟拉嗪诱发细胞凋亡及对DNA依赖蛋白激酶催化亚单位表达和P38磷酸化的抑制作用

目的　探讨三氟拉嗪(TFP)对肿瘤细胞生长的抑制作用和分子机制,寻找抑制肿瘤生长的作用靶分子。方法　用不同剂量TFP作用于人宫颈癌上皮细胞(HeLa) ,体外细胞计数绘制生长曲线;荧光染料染色及DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡;γ射线及TFP处理细胞观察TFP对细胞辐射敏感性的影响;Western印迹分析蛋白表达或磷酸化。结果TFP作用后HeLa细胞的生长受到抑制,对γ射线的敏感性增加,且随着剂量的增加细胞凋亡的比率也增加。TFP还可有效诱导DNA修复蛋白DNA依赖蛋白激酶催化亚单位(DNA-PKcs)被切割,且可抑制辐射诱发的P3 8的磷酸化。结论　TFP可抑制肿瘤细胞的生长,对DNA-PKcs的表达和P3 8的磷酸化都有抑制作用     

基于报告基因和PPARγ信号通路的药物筛选模型的建立

目的　建立基于报告基因和PPARγ(peroxisomeprolif erator activatedreceptorγ)信号通路的药物筛选模型,用此模型筛选具有胰岛素增敏活性的小分子化合物。方法　五种细胞分别进行瞬时转染,将含有目的片段PPRE(peroxisomeproliferatorresponseelement)和报告基因荧光素酶(Luc)的质粒及表达PPARγ的质粒共转染到细胞中,通过测定荧光素酶活力来考察马来酸罗格列酮对PPARγ信号通路的影响,选取诱导表达倍数最高的细胞株建立模型。用其他类型核受体激动剂对此模型进行特异性考察。结果　293T细胞中,荧光素酶的表达受马来酸罗格列酮的诱导倍数最高,可达4 9倍,并呈现一定的剂量依赖关系,Z′因子为0 .72。而其他各类核受体激动剂的诱导表达率均在1倍左右。马来酸罗格列酮在转染剂量范围内无促进细胞增殖的作用。结论　马来酸罗格列酮对共转染报告基因质粒和表达PPARγ质粒的293T细胞Luc的表达具有较强的诱导作用,此模型具有较好的特异性和稳定性,适用于建立筛选PPARγ激动剂的高通量筛选模型。     

Bcl-2蛋白的小分子抑制剂

Bcl-2蛋白家族在调节细胞凋亡中发挥重要作用，人类恶性肿瘤细胞高表达Bcl-2和Bcl-XL，而高表达这些抗凋亡分子的细胞对于化疗药物有抗性，因此，以Bcl-2家族蛋白为靶点的小分子抑制剂成为很有潜力的可用于多种肿瘤治疗的药物，通过下调Bcl-2和Bcl-XL的表达直接影响肿瘤细胞的存活及其对化疗药物的抗性。     

药物传送中的纳米混悬液

目前，许多候选新药因不溶于水，生物利用度低而放弃研发。应用结晶纳米混悬液可解决药物的溶解问题，改善药代动力学特征。纳米混悬液可通过匀化、湿磨等方法制备，在口服、注射、肺部及中枢神经系统给药中都发挥着优势。该技术为未来药物研究提供了新方法。     

药物靶标搜寻和验证方法的研究进展

药物靶标是寻找药物的基础，近年来新的药物靶标搜寻和验证方法不断出现。本文从基因、mRNA和蛋白质水平的角度综述了计算机方法、核酶、反义寡核苷酸、RNA干扰、基因芯片技术、抗体与胞内抗体、寡聚核苷酸适配子、多肽、化学发光辅助激光灭活、蛋白质组学和蛋白质微阵列在药物靶标搜寻及验证领域的应用新进展。     

液质联用技术研究肽类药物药动学中的样品制备技术

肽类药物的研究开发成为新生物技术药物研究开发的热点之一.然而,建立可靠、灵敏和准确的肽类药物体内分析方法是肽类药物临床前和临床药动学研究的难点.样品制备技术是建立符合药动学研究要求的定量分析方法的关键.现综述液质联用技术在肽类药物药动学研究中的样品制备技术方法的目的、要求、特点和分类.结合近年发表的文献具体阐述了固相萃取法、蛋白质沉淀法、超滤离心法、亲和层析法和部分其他方法的原理及其应用实例.     

液质联用技术研究肽类药物药动学中的样品制备技术

肽类药物的研究开发成为新生物技术药物研究开发的热点之一。然而，建立可靠、灵敏和准确的肽类药物体内分析方法是肽类药物临床前和临床药动学研究的难点。样品制备技术是建立符合药动学研究要求的定量分析方法的关键。现综述液质联用技术在肽类药物药动学研究中的样品制备技术方法的目的、要求、特点和分类。结合近年发表的文献具体阐述了固相萃取法、蛋白质沉淀法、超滤离心法、亲和层析法和部分其他方法的原理及其应用实例。     

四物汤对放射线致血虚证小鼠骨髓蛋白质表达的影响

目的 :观察四物汤对血虚证小鼠骨髓蛋白质表达的影响 ,为阐明四物汤补血作用的分子机理提供理论和实验依据。方法 :采用 3.5Gy⁶⁰Coγ射线全身 1次性照射 ,制备小鼠血虚证模型。利用双向电泳、图像分析、胶内酶切、质谱鉴定等蛋白质组学技术 ,结合生物信息学 ,分离、分析、鉴定蛋白质。结果 :四物汤可以逆转放射线致血虚证小鼠骨髓 10个上调和 5个下调的蛋白质。其中 8个蛋白质可能分别是淋巴细胞特异性蛋白质 1、蛋白酶体26SATP酶亚组分 4、造血细胞蛋白质酪氨酸磷酸酶、H-ras、3-磷酸甘油醛脱氢酶、生长因子受体结合蛋白 14及Lgals12。结论 :四物汤能调节骨髓蛋白质表达 ,并可能由此促进造血细胞的生长和分化 ,发挥补血作用。     

雪莲注射液HPLC指纹图谱研究

目的 :研究雪莲注射液的HPLC指纹图谱测定方法。方法 :以紫丁香苷为对照品 ,应用HPLC ,色谱柱Diamonsil^TM C₁₈(4.6mm× 250mm ,5 μm) ,流动相甲醇 1%冰醋酸 (线性梯度洗脱 ) ,柱温 30℃ ,检测波长 270nm ,分析时间 60min ,流速 1. 0mL·min^-1。结果 :标示出雪莲注射液的 11个特征指纹峰。结论 :该方法准确、重复性好 ,为雪莲注射液的指纹图谱质量控制提供了依据。     

中药以食品补充剂进入美国市场的条件及建议

中药以食品补充剂(DietarySupplements)的形式进入美国市场是将中药产品推向国际市场的一个可行的选择,同时中药以食品补充剂的形式进入国际市场将会产生更大的效益.本文主要就中药进入美国市场的几种形式、美国对食品补充剂上市的要求、美国进口食品补充剂的程序、<生物恐怖应对法>对食品补充剂进口美国的影响,以及中药以食品补充剂进入美国市场的相关事宜进行了分析阐述.