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91.
目的 探究睾丸高表达细胞分裂周期相关蛋白2基因(Cdca2)在小鼠精子发生和生育力中的生理功能。方法 通过Q-PCR和Western blot检测Cdca2在小鼠不同组织部位的表达情况;利用CRISPR/Cas9基因编辑技术和Cre-loxP介导的重组系统构建Cdca2组织特异性敲除的小鼠品系;通过苏木精-伊红(HE)染色和形态学分析了解小鼠CDCA2缺失对精子发生的各个阶段生精细胞形态的影响;通过精子全自动检测分析系统检测小鼠CDCA2缺失对精子活率及运动参数的影响;通过生育力测试实验检测CDCA2缺失对雄性小鼠生育能力的影响。结果 Cdca2是一个睾丸高表达的基因;利用CRISPR/Cas9技术和生殖系统特异性Cre的工具鼠,成功获得了Cdca2生殖细胞特异性敲除的小鼠;小鼠CDCA2缺失对精子发生中各阶段生精细胞、精子运动参数及雄性生育能力的影响改变无统计学意义。结论 基因Cdca2对于小鼠精子发生和雄性生育力的维持可能是非必需的。 相似文献
92.
目的 对N-乙酰基转移酶10 (NAT10)在人慢性髓原白血病细胞系K562中的RNA结合图谱进行描绘。方法 利用紫外交联免疫沉淀技术(eCLIP)捕获NAT10在K562细胞中结合的转录本集合,对其进行高通量测序,并对数据进行生物信息学分析。通过peak-calling分析和对peaks进行注释,鉴定NAT10结合位点。并对所结合基因的类型和结合区域进行分析。进一步通过基因功能富集分析,探索其结合的RNA的功能。结果 NAT10主要结合于蛋白质编码基因的转录本,并在3′非翻译区域(3′UTR)富集,预测显示其结合的转录本与DNA损伤修复等功能相关。结论 NAT10可能通过与DNA损伤修复相关信使RNA(mRNA)的3′UTR区域结合,实现基因表达调控作用。 相似文献
93.
目的 探讨西地那非(Sil)对勃起功能障碍(ED)大鼠主动脉血管组织中NLRP3/caspase-1通路蛋白表达的影响作用。方法 建立ED大鼠模型,随机分为ED组、Sil组,另取10只大鼠作为对照组。Sil组给予20 mg/kg西地那非灌胃(1次/d,连续2周)后,HE染色观察主动脉血管组织形态变化;Masson染色检测主动脉纤维化;免疫组化测定主动脉中白细胞介素-1β(IL-1β)和内皮源性一氧化氮合酶(eNOS)的含量及分布;RT-qPCR及Western blot检测主动脉中NLRP3、caspase-1、GSDMD、IL-1β和eNOS的表达。结果 ED组大鼠主动脉血管组织形态发生病理变化,内皮细胞局部脱落较多,纤维化明显;主动脉中NLRP3、caspase-1、GSDMD、IL-1β的mRNA和蛋白表达均增高,eNOS的mRNA和蛋白表达均降低(P<0.05)。与ED组相比,Sil组大鼠主动脉血管组织形态学病理变化改善,内皮局部细胞脱落减少,纤维化减轻;主动脉中NLRP3、caspase-1、GSDMD、IL-1β的mRNA和蛋白表达降低,eNOS的mRNA和蛋白表达增... 相似文献
94.
目的 研究SMYD3表达在泛癌中的预后价值,分析SMYD3对于肿瘤组织免疫浸润的影响。方法 从TCGA、GTEx、HPA等数据库收集基因表达矩阵以及蛋白质表达等数据。使用Kaplan-Meier算法评价了SMYD3在不同肿瘤中的预后价值。使用ESTIMATE算法和Timer数据库的信息分析SMYD3与免疫浸润的关系。以小鼠黑色素瘤细胞系B16为例,在细胞水平验证SMYD3对抗原提呈基因表达的影响。结果 转录组和蛋白组学数据表明SMYD3在肿瘤组织中表达升高,并且SMYD3的高表达和泛癌的不良预后相关(P<0.05);SMYD3抑制了多种免疫细胞的浸润(P<0.05),敲除Smyd3的B16细胞抗原呈递基因表达水平升高(P<0.05)。结论 Smyd3是一个重要的肿瘤预后相关基因,其通过下调抗原递呈基因的表达,抑制免疫细胞浸润,诱导肿瘤细胞免疫逃逸。 相似文献
95.
p53反义RNA对肠癌细胞恶性表型的抑制作用 总被引:8,自引:0,他引:8
研究p53反义RNA对大肠癌细胞中突变型p53致癌性的抑制效应,为肿瘤基因治疗提供新思路。方法2.1kb的人p53全长cDNA反向插入哺乳动物表达载体pREP9,得到p53反义RNA表达载体pREP9-p53(AS),并将其导入人肠癌细胞株SW1116(内源性突变型p53),采用MTT和FCM方法测定pREP9-p53(AS)表达的p53反义RNA对SW1116细胞生长的影响。结果带有pREP9-p53(AS)的SW1116细胞,与对照组SW1116细胞和带pREP9空载体的SW1116细胞相比,由于p53反义RNA的表达,其增殖速度显著下降,FCM的结果也证明带pREP9-p53(AS)的细胞部分受阻于G0/1期,而带pREP9空载体的细胞则无明显变化。结论p53反义RNA可以有效地抑制大肠癌细胞中突变型p53的致癌性,可用于实验性肿瘤基因治疗研究 相似文献
96.
葡萄糖调节蛋白94在人胚胎发育中的表达 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 为探讨葡萄糖调节蛋白94(GRP94)在胚胎发育中的作用,研究了10-31周人胎组织GRP94的定位及表达。方法 用SP免疫组织化学方法。结果 结肠粘膜上皮,肾小管上皮及肝细胞的胞质内,在10周已有GRP94的表达,18-20周时表达增多,一直维持较高水平。胃粘膜上皮及心肌细胞也有较强的表达。 相似文献
97.
目的探讨高胰岛素高雄激素无排卵综合征的发病机制。方法采用放射配体结合分析法首次对雄激素致高胰岛素高雄激素无排卵大鼠(ASR)肝脏、卵巢和肾上腺的的胰岛素受体作了鉴定,并与正常对照大鼠进行比较。结果ASR肝脏、卵巢和肾上腺胰岛素受体的数目及亲和力均与正常大鼠相似。结论ASR不存在受体水平的胰岛素拮抗。 相似文献
98.
凉山彝族男性血管紧张素转换酶基因多态性与高血压的关系 总被引:2,自引:1,他引:1
目的 探讨血管紧张素转换酶(ACE) 基因多态性与高血压的关系。方法 应用横断面调查方法和PCR 技术。结果 正常血压人群ACE 基因DD、ID 和II基因型分别占13 .0 % 、50 .9 % 和36 .1 % 。I和D等位基因频率分别是为61 .6 % 和38 .4 % 。高血压人群ACE 基因DD、ID 和II基因型分别占9 .7 % 、48 .4 % 和41 .9 % 。I和D 等位基因频率分别是66 .1 % 和33 .9 % 。彝族男性高血压和正常血压人群的ACE基因型分布及I/D 等位基因频率差异无显著性。结论 彝族男性ACE 基因多态性与高血压的关联尚不能确定。 相似文献
99.
刘丰 《南京医科大学学报(自然科学版)》1999,(3)
研究蔗糖对测定红细胞膜脂流动性稳定性的影响。应用荧光偏振技术测定膜脂流动性,并对比其在单纯悬浮液和含0.25mol/L蔗糖悬浮液中的测定结果的变异系数。结果在含有蔗糖悬浮液中测得结果的变异系数要比单纯悬浮液中的小3~5倍。结果表明,加入蔗糖对膜脂流动性的测定具有稳定性作用。 相似文献