碱性MAGE家族新成员restin在大肠杆菌中的表达和抗体制备

目的:从维甲酸诱导的白血病细胞系HL60中,克隆编码219个氨基酸的新基因restin,构建原核表达载体、制备抗血清并进行初步应用。方法:采用PCR技术,以维甲酸诱导的白血病细胞的cDNA为模板,扩增出restin的编码区。将其克隆入大肠杆菌表达载体中。经过温度诱导获得restin表达蛋白。利用SDS-PAGE纯化的目的蛋白免疫新西兰大白兔,制备该蛋白的抗血清。以该抗体做间接免疫荧光,初步观察restin在COS-7细胞内的表达分布。结果:大肠杆菌中表达的restin蛋白的Mr为26000。将其初步纯化后免疫新西兰白兔制备的抗血清,用Westernblot检测其效价为1∶800。间接免疫荧光显示,restin蛋白主要分布在细胞核内。结论:成功地制备抗restin的抗体,为进一步研究restin蛋白在组织中的表达、细胞内亚定位以及信号转导通路提供了前提条件。     

射频磁控溅射法制备羟基磷灰石/β-磷酸三钙生物涂层

目的以粉末冶金烧成的羟基磷灰石(HA)/-β磷酸三钙(β-TCP)陶瓷为靶材,采用磁控溅射法在钛合金(Ti6Al4V)基体上制备HA/β-TCP生物涂层。方法利用XRD研究了复合涂层的晶化程度,讨论了涂层成分与生物降解性及相容性的关系。结果HA/β-TCP生物涂层为非晶态,经700℃,3h大气处理可显著提高涂层的晶化程度,当涂层成分为50wt%HA/50wt%β-TCP时其细胞相容性最好。结论在钛合金基体上制备HA/β-TCP生物涂层,通过HA与β-TCP的复合来控制材料的降解速度,使它的降解速度与周围骨组织的生长速度相匹配,使植入体具有良好的生物降解性、生物活性和力学性能。     

中药虎杖雌激素活性组分的分离及活性测试

药材虎杖用70%乙醇冷浸法进行提取。对虎杖中蒽醌类化合物集中分布的乙酸乙酯分配组分首先进行硅胶柱分离,得到6个组分,利用转基因酵母法测定其雌激素活性,结果表明前三个组分具有较高的雌激素活性。进一步对其中的第三个活性组分利用制备高效液相色谱进行了精制,对流出物按2分钟间隔收集,共得到20个馏分。转基因酵母法测定其雌激素活性的结果显示,在这20个馏分当中,有5个馏分具有较强的雌激素活性。分别将其雌激素活性与化学组成进行关联,发现其中的sub-fraction-13中可能存在非大黄素的雌激素活性成分。     

5种病原学检测方法在肺结核病诊断中的应用评价

目的 评价涂片法(AFS)、罗氏培养法(L-J)、环介导等温扩增法(LAMP)、多色半巢式荧光定量PCR(Xpert MTB/RIF)、线性探针技术(LPA)对肺结核病的诊断价值。方法 选取2016年1月— 2018年3月陕西省结核病防治研究所和汉中市第二人民医院就诊的258例肺结核可疑症状者作为研究对象,同时应用AFS、L-J、LAMP、Xpert MTB/RIF、LPA对所有研究对象的同一份痰样本进行检测,以临床诊断为标准,分组计算5种病原学检测方法的阳性率;以培养和鉴定为金标准,计算4种方法的敏感度和特异度,并结合受试者工作特征 (ROC)曲线进行分析比较。结果 在肺结核病组中LAMP(73.30%)、Xpert MTB/RIF(77.27%)、LPA(70.45%)的阳性率均显著高于AFS(46.02%)和L-J(58.52%),差异均有统计学意义;以培养和鉴定为金标准,AFS、LAMP、Xpert MTB/RIF、LPA的敏感度分别为68.93%、93.20%、97.09%、92.23%;特异度分别为93.55%、74.84%、75.48%、83.23%;ROC曲线下的面积分别为0.812、0.840、0.863、0.877,P均< 0.05。结论 5种病原学检测方法对肺结核病的诊断均具有较好的辅助作用;与AFS和L-J相比,LAMP、Xpert MTB/RIF、LPA具有较高的阳性检出率,有助于传染源的早期发现。     

GB/T 9999—2018标准的解读及其执行中存在的问题

【目的】分析我国期刊执行GB/T 9999.1—2018《中国标准连续出版物号 第1部分:CN》和GB/T 9999.2—2018《中国标准连续出版物号 第2部分:ISSN》(以下合称GB/T 9999—2018)中存在的问题,并对GB/T 9999—2018有关期刊的部分内容进行解读,为期刊更好地执行国家标准提供参考。【方法】2019年12月,采用抽样统计方法,随机选取某图书馆订阅的2019年10—12月出版的900余种期刊中的110种,对封一、题名页、版权页(块)、目次页、封四等执行GB/T 9999—2018的情况进行查看与统计分析。【结果】随机选取的110种期刊大部分存在执行GB/T 9999—2018标准不规范问题。【结论】期刊出版单位对GB/T 9999—2018学习贯彻不够,期刊出版管理部门在期刊审读与评比中注意检查GB/T 9999—2018标准的执行情况,督促期刊出版单位严格执行国家标准。     

连翘苷元对老年大鼠氧化应激和肾功能的改善作用

目的　研究连翘苷元对老年大鼠氧化应激和肾功能的影响及相关机制。 方法　将15只 SD雌性老年大鼠（24月龄）随机分成3组,每组5只,老年对照组（Aged rats）,老年连翘苷元低剂量组[Aged rats+FA(20 mg/kg)],老年连翘高剂量组[Aged rats+FA(100 mg/kg)]。另取5只12周龄SD雌性大鼠为青年对照组（Young rats）。连翘苷元低、高剂量组大鼠灌胃给药60 d。考马斯亮蓝检测24 h尿液总蛋白并分析血清肌酐和尿素氮水平。HE染色和TUNEL染色检测肾组织病理损伤情况。Western Blot检测Caspase-3和Caspase-9的表达。检测氧化应激标记物超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和还原型谷胱甘肽（GSH）的水平。ELISA检测血清中炎症因子IL-18和IL-1β水平。Western Blot检测核因子E2相关因子（Nrf 2）、血红素氧合酶1（HO-1）和还原型辅酶/醌氧化还原酶（NQO-1）的表达。 结果　老年对照组与青年对照组相比,尿中蛋白含量显著提升,血清中肌酐和尿素氮含量显著上升;肾组织细胞排列不规则,出现大量炎性细胞浸润,凋亡细胞比率显著提高;Caspase-3和Caspase-9的表达水平显著上调;SOD活性显著降低,MDA含量显著上升,GSH含量显著下降;血清中IL-18和IL-1β含量显著升高;Nrf 2、HO-1和NQO-1的表达显著下调。连翘苷元低、高剂量组与老年对照组相比,尿液中蛋白含量显著降低,血清肌酐和尿素氮含量显著下降;肾组织细胞排列趋向规则,炎性细胞浸润明显减弱,凋亡细胞比率显著下降;Caspase-3和Caspase-9的表达水平显著下调;SOD活性显著提高,MDA含量显著降低,GSH含量显著上升;血清中IL-18和IL-1β含量显著降低;Nrf 2、HO-1和NQO-1的表达显著上调。 结论　连翘苷元抑制老年大鼠氧化应激反应,改善老年大鼠肾功能,其作用机制可能与Nrf 2-ARE通路激活相关。     

基于SWOT分析的我国在线健康社区发展研究

结合SWOT分析法,文章阐述了我国在线健康社区的优势(患者可享受到方便及时的优质医疗服务、降低就医成本、提供个性化服务等)、劣势(存在用户信息泄露、服务面临资质和质量风险)、机会(政府重视并大力支持、用户健康需求增加、互联网技术的促进作用等)、威胁(监管滞后、用户观念尚未完全转变、市场竞争激烈),并提出相应对策建议,以...     

响应面法优化绞股蓝总皂苷超声提取工艺

目的通过响应面法优化绞股蓝总皂苷的超声提取工艺。方法以超声功率、提取时间、温度、乙醇体积分数为考察因素,以绞股蓝总皂苷提取率为考察指标,通过Box-Behnken设计方案,对绞股蓝总皂苷超声提取工艺进行优化,得到最佳工艺参数。结果在超声功率300 W、提取时间50 min、提取温度为60℃、乙醇体积分数为60%的最佳提取工艺条件下,绞股蓝总皂苷的提取量可达到5.98%。结论响应面法优化绞股蓝总皂苷的提取工艺稳定可靠。     

基于BrO-3-Ce4+-H+-丙二酸/酒石酸振荡体系的中药电化学指纹图谱研究

该文提出了BrO-3-Ce(SO4)2-H2SO4-丙二酸/酒石酸复合有机振荡反应体系,在考察各组分浓度对空白体系稳定性和特征参数影响的基础上,获得了30种中药的电化学指纹图谱。结果表明,电化学指纹图谱可用于中药的识别、不同部位区分及道地性鉴定,快速、灵敏、准确。同时,探讨并验证了振荡机制及中药指纹图谱的形成机制。     

不同剂量右美托咪定在脑瘫选择性脊神经后根切断术中的应用效果及对血清S100β蛋白、NSE水平的影响

目的探讨不同剂量右美托咪定(Dex)在脑瘫选择性脊神经后跟切断术中的应用效果及对血清S100β蛋白、NSE水平的影响。方法将68例脑瘫患儿随机分为观察组与对照组,各34例。观察组麻醉诱导前输注0.5μg/kg的Dex,术中以0.3μg/(kg·h)维持量至手术结束;对照组麻醉诱导前输注1.0μg/kg的Dex,术中以0.5μg/(kg·h)维持量至手术结束。比较两组的临床效果。结果 T1、T2时,两组的MAP、HR均低于T0时,但观察组高于对照组(P<0.05)。治疗后,两组的NSE及S100β蛋白水平均低于治疗前(P<0.05)。两组患儿用药前、后EEMG振幅保留率和潜伏期比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两组的不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论在脑瘫选择性脊神经后根切断术中不同剂量Dex均可调低NSE及S100β蛋白水平,而以0.5μg/kg输注,0.3μg/(kg·h)维持麻醉时患儿血流动力学更加平稳,同时不增加不良反应且对EEMG检测无明显影响。