γ-线对小鼠细胞遗传学的影响及重组人超氧化物歧化酶抗放作用的研究

研究γ－射线对小鼠遗传学的影响及重组人超氧化物歧化酶抗放作用。方法：实验用甲基纤维素缩集法计算淋巴细胞微核率，活体秋水内素法进行骨髓染色体畸变率分析。     

用蛋白Ⅷ在噬菌体表面展示抗体分子效果的观察

目的 观察抗体分子通过丝状噬菌体主要外壳蛋白Ⅷ（cpⅧ）和次要外壳蛋白Ⅲ（cpⅢ)在噬菌体表面呈现效果的差异。方法 分别构建通过cpⅢ或cpⅧ展示抗乙肝表面抗原（HBs)Fab,ScFv和抗角蛋白（Ker)Fab的表达载体，制备噬菌体抗体，比较其抗原结合活性和Fab呈现水平。用多种方法尝试提高cpⅧ介导的噬菌体展示效果。结果 cpⅧ对不同特异性抗体Fab段和不同形式的小分子抗体（Fab和ScFv)的展示效果均低于cpⅢ的展示，增加cpⅧ－Fab对野生型cpⅧ的表达比例，试用不同菌株，在Fab和cpⅧ之间插入间隔序列及换用控制更为严密的启动子等,匀未能改善cpⅧ介导的噬菌体展示。结论 以前所报道的通过cpⅧ多价展示Fab段不是普遍存在的现象，对有些抗体基因不能达到多价展示。     

包装菌株XL-pⅢ的构建及缺陷型辅助噬菌体的制备

目的构建能用来制备基因Ⅲ缺失的辅助噬菌体的包装菌株。方法采用重叠延伸PCR方法将完整的噬菌体基因Ⅲ和氯霉素抗性基因体外拼接起来,利用λRed重组系统将其整合到E.coliXL1-Blue染色体上的组氨酸操纵元位点构建包装菌株,用氯霉素抗性进行筛选,并用PCR及组氨酸表型鉴定;用PCR法构建功能基因Ⅲ缺失的噬菌体基因组,将其转化到包装菌株中培养制备辅助噬菌体,以集落形成来测定滴度。结果重组菌株能在氯霉素抗性平板上生长,PCR扩增可得到目的片段,组氨酸表型缺失,说明靶基因定向重组到了细菌染色体的靶位点,将重组包装菌株命名为XL-pⅢ,以其制备的缺陷噬菌体滴度可达到3.7×108,只具备一次感染力。结论成功构建包装菌株,并能制备辅助噬菌体,有望用于选择感染性噬菌体(SIP)体系。     

布比卡因硬膜外麻醉血浆药物浓度的演变及其药效时间的初步观察

盐酸布比卡因(Bupivacaine hydrochloride)自1963年以来逐渐成为一个被普遍使用的局麻药,受到人们的重视。并在1978年就有布比卡因误入血管内发生全身痉挛,引起循环虚脱、复苏困难的报告。为此,有必要对布比卡因在硬膜外阻滞麻醉时的药代动力学进行探讨,了解其在体内吸收、分布、转化和排泄的规律。本实验对其相应的血浆药物浓度下的药效     

从半合成噬菌体抗体库中克隆抗地高辛人单链抗体

目的：从半合成噬菌体抗体库中克隆抗地高辛（Dig）人单链抗体（ADA ScFv），为Dig中毒的诊断和治疗提供人源性抗体。方法：①以改良法制备Dig-BSA偶联物②以固相化的Dig-BSA偶联物对人噬菌体ScFv抗体库进行了4轮筛选，通过ELISA筛选出能结合Dig的抗体克隆并鉴定其活性，通过ELIS竞争抑制实验分析其特异性，对阳性克隆的DNA进行测序分析。结果：①在对抗体库的筛选过程中可见有明显的富集；②获得一株可结合Dig及其类似物的阳性克隆；③阳性克隆的可变区分别属于VH5和Vλ1亚群。结论：利用噬菌体抗体库技术获得了能与Dig及其它洋地黄类药物结合的人ADA ScFv，经过一步分析及抗体工程改造后，有可能为临床上诊断及治疗洋地黄类药物中毒提供具有实用价值的人源性抗体。     

急性心肌梗塞患者的高胰岛素血症

检测13例合并糖尿病的急性心肌梗塞(AMI),23例无糖尿病AMI患者的空腹血胰岛素和C肽水平,并与20例正常人作比较,发现两组均存在高胰岛素血症,合并糖尿病的AMI组更为明显.10例AMI患者4周后复查,血胰岛素水平有显著下降.提示胰岛素在AMI发病中有意义.     

＋Gz对鼠肺肾上腺素能受体和心血肾素系统的影响

笔者对大鼠在 Gz负荷下肺细胞膜肾上隙素能α、β受体和心血肾素和血管紧张素作了观察，采用放射性配基结合法(RBA)检测鼠肺α、β受体及放免法测心血肾素和血管紧张素。11只大鼠承受 Gz负荷( Gz组)，10只大鼠承受 Gz前预防性使用心得安(心得安加 Gx组)；10只为对照组。结果显示， Gz组鼠肺α受体增多，卢受体减少，心血肾素和血管紧强素上升；心得安加 Gx组则α与β卢受体变化不大，接近对照组，心血肾素和血管紧张素水平下降，说明心得安对 Gx负荷有一定保护作用。     

异丙酚对大鼠海马CA1区锥体神经元GABA_A受体的作用

目的 :研究异丙酚对大鼠海马CA1区锥体神经元γ 氨基丁酸A型 (GABAA)受体的作用。方法 :采用膜片钳全细胞记录技术。结果 :临床血药浓度异丙酚 (3～ 12 μg ml)对海马脑片CA1区锥体神经元电压门控性钠、钾、钙离子通道的开放、失活、最大电流幅值没有影响。海马脑片CA1区锥体神经元自发抑制性突触后电位 (sIP SC)可被GABAA 受体特异性阻断剂荷包牡丹碱 (Bic)所阻断。异丙酚对海马脑片CA1区锥体神经元sIPSC具有增频作用 ,但对其幅度没有影响 ,且其增频作用可被Bic阻断。结论 :临床浓度的异丙酚对海马脑片CA1区锥体神经元的sIPSC具有增频作用 ,说明海马可能是异丙酚作用的靶器官     

急性心肌梗塞患者的高胰岛素血症

检测１３例合并糖尿病的急性心肌梗塞（ＡＭＩ），２３例无糖尿病ＡＭＩ患者的空腹血胰岛素和Ｃ肽水平，并与２０例正常人作比较，发现两组均存在高胰岛素血症，合并糖尿病的ＡＭＩ组更为明显。１０例ＡＭＩ患者４周后复查，血胰岛素水平有显著下降。提示胰岛素在ＡＭＩ发病中有意义。     

急重期慢性肺心病患者血浆肾上腺髓质素浓度测定及基础研究

目的探讨慢性肺源性心脏病(chronicpulmonaryheartdisease,CPHD)患者血浆肾上腺髓质素(adrenomedullin,AM)浓度的变化及机制.方法用放免法测定了28例急性加重期的CPHD患者血浆AM浓度及大鼠主动脉和肺动脉在不同条件下孵育液和孵育组织中AM含量.结果CPHD患者血浆AM浓度(30.4±6.8ng/L)显著高于正常对照组(10.4±2.4ng/L,P＜0.01),并且AM浓度同PaO2(r=-0.65,P＜0.01)和pH值(r=-0.39,P＜0.05)呈显著相关关系.在脂多糖、缺氧和酸中毒条件下主动脉和肺动脉孵育液中AM含量也几乎均显著高于对照组.结论细菌感染、缺氧和酸中毒可能参与了CPHD急性加重期血浆AM的升高机制.