外科创新技术/器械临床研究方法学--IDEAL框架与推荐系列文章之二:IDEAL报告规范解读

严格遵守报告规范有助于研究者完整、清晰和透明地报道方法学和研究结果。目前国际报告规范网站收录的与外科干预相关的报告指南主要针对某种研究设计类型和部分研究内容。因IDEAL框架是对外科创新技术发展的所有阶段进行评估,而每个阶段都有其核心问题和关键要素,若仅采用已有针对设计类型的报告规范可能忽略这些重要特征,导致研究者不能全面准确地报道相关信息。2018年IDEAL协作网启动制订适用于外科创新技术发展不同阶段的报告规范。本文旨在从产生背景、制作过程和核心内容上对IDEAL报告规范进行解读,促进其在国内研究人员中的理解与应用。     

血液肿瘤CAR-T细胞治疗的现状与挑战

过继性细胞免疫疗法（adoptive cellular immunotherapy,ACI）是药物开发中一种全新模式,目前已具备在肿瘤疾病中带来临床益处的明确证据。其中嵌合抗原受体修饰的T细胞（chimeric antigen receptor-modified T cells,CAR-T）疗法利用基因工程技术重编程T细胞,使其具备非主要组织相容性抗原复合物（major histocompability complex,MHC）限制性的靶向结合并杀伤肿瘤细胞的能力,并在急性B淋巴细胞性白血病（B-cell acute lymphoblastic leukemia,B-ALL）、非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin's lymphoma,NHL）、多发性骨髓瘤（multiple myeloma,MM）患者中展现出显著的缓解率,为难治复发性血液肿瘤疾病提供了治愈希望,因此多项商品化CAR-T产品也获批应用于临床,开拓了肿瘤免疫治疗的新时代。然而,细胞因子释放综合征（cytokine release syndrome,CRS）、免疫效应细胞相关神经毒性综合征（immune effector cell-associated neurotoxicity syndrome,ICANS）和其他并发症的发生是其应用的安全性挑战,并且部分患者发生CAR-T治疗无效或复发,需要提出优化CAR-T细胞疗法的新策略,在不同水平强化肿瘤清除作用,以确保安全性和有效性。本文对血液肿瘤领域的CAR-T细胞疗法临床研究进展进行综述,并归纳了下一代CAR-T细胞疗法面临的主要挑战,为拓展CAR-T细胞基础研究及临床转化研究方向提供思路。      

乳腺癌放射治疗指南(中国医师协会2020版)

乳腺癌是严重影响女性身心健康的恶性肿瘤,发病率和死亡率分别居中国女性恶性肿瘤的第1位和第5位。手术、放射治疗(放疗)、化疗、靶向治疗和免疫治疗等多学科的综合治疗策略,大大改善了乳腺癌患者的预后。放疗是乳腺癌综合治疗的重要手段,是降低保乳手术和高危乳房切除手术患者复发并延长生存的重要措施,也是不可手术局部晚期和转移性乳腺癌患者的重要姑息治疗手段。当前,我国乳腺癌放疗领域暂没有统一的标准放疗指南。在中国医师协会放射肿瘤治疗医师分会的推动下,基于乳腺癌领域最新理论和实践知识,并结合我国国情,我们制定了《中国乳腺癌放射治疗指南》。该指南旨在指导乳腺癌放疗的实施,促进规范和标准化国内乳腺癌放疗实践,最终达到提高我国乳腺癌放疗水平,改善广大乳腺癌患者预后的目标。     

EGFP标记的hVEGF165重组腺病毒构建新方法及其相关特性的体外研究

利用细菌内同源重组法快速构建增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)标记的人血管内皮细胞生长因子 16 5(hVEGF165)重组腺病毒载体 ,并对其相关特性进行体外研究。首先将hVEGF165cDNA亚克隆到含EGFP基因的腺病毒穿梭质粒 pAdTrack CMV中 ,然后与腺病毒骨架质粒pAdEasy 1共同电击转化大肠杆菌BJ5183 ,同源重组获得重组腺病毒质粒 pAd EGFP/hVEGF165,鉴定后通过脂质体法转染HEK2 93细胞 ,产生重组腺病毒Ad EGFP/hVEGF165。通过体外试验观察病毒的形态、均一性和安全性 ,靶细胞的感染效率及hVEGF165的表达情况。结果显示 ,通过细菌内质粒间同源重组法在短期内成功地构建了复制缺陷型重组腺病毒载体Ad EGFP/hVEGF165;借助于EGFP的表达 ,直接在荧光显微镜下观测到靶细胞的感染效率和外源基因的表达。经纯化的病毒颗粒在电镜下成分均一 ,滴度可达 2× 10 12 pfu/ml。病毒感染Hela细胞后经多次传代未见细胞病变。以感染复数 (MOI) =10 0感染hUVEC可获得最大增殖刺激作用。同样浓度感染小鼠骨髓单个核细胞效率达 2 7.3% ,培养上清中hVEGF165蛋白含量达 1385± 332 pg/ 10 6cells。结论 :细菌内同源重组法构建腺病毒载体具有高效、省时、省力的特点 ,辅以EGFP为标记基因可以直观检测靶细胞感染和外源基因的表达情况。利用该     

PCNA表达与肺癌细胞株凋亡的关系

 目的　探讨肺癌细胞株增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达与肺癌细胞株凋亡的关系。方法　用三氧化二砷 (As2 O3 )诱导肺癌细胞株GLC 82凋亡。运用细胞培养、MTT、流式细胞技术 (FCM )检测及逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)检测PCNA表达在细胞凋亡过程中的变化及相互关系。结果　三氧化二砷可明显抑制GLC 82细胞增殖 ,使细胞周期阻滞于G2 /M并随后凋亡 ,PCNA表达受到抑制。结论三氧化二砷诱导GLC 82凋亡过程中 ,PCNA表达受到明显抑制。对于耐药性肿瘤 ,PCNA活性的抑制可能代表一种新的化疗策略。     

外科创新技术/器械临床研究方法学——IDEAL框架与推荐系列文章之一:IDEAL框架与推荐介绍

外科技术和器械的快速创新是外科临床研究和实践的重要内容,其评价总体思路与药物干预类似,但具体方法学存在很大差异。2009年IDEAL协作网提出一套适用于外科创新干预的方法学框架—IDEAL框架,将外科创新技术发展分为5个阶段,涵盖从概念提出到推广应用的全生命周期。2019年,协作网更新IDEAL框架,在原有基础上增加临床前评价(Pre-IDEAL),梳理明确各阶段研究目的、核心问题和伦理依据。作为IDEAL框架和推荐系统的首篇文章,本文将详细介绍IDEAL推荐和框架的产生、发展、具体内容、应用推广现状,旨在促进该方法在国内外科临床研究领域的应用和传播。     

瘦素对大鼠离体胰岛β细胞胰岛素分泌和Kir6.2基因表达的调节

研究瘦素在不同的葡萄糖浓度下对离体大鼠 β细胞胰岛素分泌以及ATP敏感性K 通道(KATP)亚单位Kir6.2基因表达的调节及其可能的细胞内信号转导途径。结果表明在不同的葡萄糖浓度下 ,瘦素对胰岛素分泌的调节呈双向变化 ,对Kir6.2基因表达的调节可能通过细胞内与胰岛素受体底物 2有关的磷脂酰肌醇 3 激酶信号途径的介导