P53和PCNA在辐射诱导犬胆管增殖平滑肌细胞凋亡中的表达及意义

目的探讨在辐射诱导犬胆管增殖平滑肌细胞凋亡中,P53和PCNA的表达及意义。方法12只犬随机分两组,每组6只犬,在犬胆管内分别植入103pd(103钯)放射性支架和普通胆管支架,术后30d取出胆管标本采用ABC法进行PCNA免疫组化染色,核出现棕色反应为阳性细胞;原位杂交进行P53细胞染色,细胞浆出现棕褐色反应为阳性细胞;又行平滑肌细胞凋亡染色,阳性细胞为细胞核有棕黄色颗粒即为凋亡细胞。结果103Pd支架组PCNA蛋白阳性表达率明显低于普通支架组,两组之间比较差异有非常显著性(P<0.01),103Pd支架组P53蛋白阳性表达率明显高于普通支架组,两组之间比较差异有非常显著性(P<0.01)。103Pd支架组平滑肌细胞凋亡数较普通支架组明显增多,两者有显著差异(P<0.05),103pd放射性支架组犬胆管腔无明显狭窄,而普通支架组犬胆管腔有明显狭窄。结论以上结果证实103Pd支架组犬胆管平滑肌组织PCNA表达较弱,而普通支架组犬胆管平滑肌组织PCNA表达却增高,说明辐射可以抑制平滑肌细胞增殖,辐射可激活P53基因而诱导犬胆管平滑肌细胞凋亡,同时抑制犬胆管损伤后胆管狭窄。     

犬胆管腔内放射对BCL 2基因表达的影响及其与平滑肌细胞凋亡的关系

目的探讨γ射线对犬BCL-2基因的影响及其与胆管壁增殖平滑肌细胞凋亡的关系和意义。方法将^103钯（^103pd）放射性支架和普通支架分别植入犬的肝外胆管内；取出胆管标本，用免疫组化方法检测γ射线诱导的胆管壁凋亡增殖平滑肌细胞中的BCL-2基因，并检测凋亡细胞数量，计算机图象检测系统检测两组胆管腔面积。结果^103pd支架组胆管组织中BCL-2基因表达较普通支架组为弱；BCL-2基因低表达组犬胆管出现增殖平滑肌细胞明显凋亡；肝外胆管无明显狭窄；BCL-2基因高表达组胆管未出现增殖平滑肌细胞明显凋亡，而肝外胆管有明显狭窄。结论实验犬BCL-2基因表达水平与细胞凋亡的发生和细胞对辐射敏感性有关；^103pd放射性支架通过降低BCL-2基因表达，促进胆管增殖平滑肌细胞凋亡，从而抑制肝外胆管狭窄。     

辐射诱导犬胆管增殖平滑肌细胞凋亡中胱冬肽酶-3活性的影响

目的探讨γ射线对胱冬肽酶-3(Caspase-3)基因在犬胆管壁增殖平滑肌细胞凋亡中的活性影响。方法将^103pd放射性支架和普通支架分别植入犬肝外胆管内，取出胆管标本，用免疫组化进行平滑肌细胞凋亡染色，并在JEM-1200EX电镜下观察凋亡细胞超微结构变化；又用RT-PCR检测7射线诱导犬胆管壁凋亡的增殖平滑肌细胞中Caspase-3基因的mRNA。结果^103pd支架组犬胆管组织中Caspase-3基因表达较普通支架组明显，且Caspase-3基因高表达组犬胆管出现明显增殖平滑肌细胞凋亡，而且犬肝外胆管无明显狭窄；而普通支架Caspase-3基因低表达，且犬胆管未出现增殖平滑肌细胞明显凋亡，而且犬肝外胆管有明显狭窄。结论辐射可以使Caspase-3基因活性增高，切与细胞凋亡有关；^103pd放射性支架通过激活Caspase-3基因，促进犬胆管增殖平滑肌细胞凋亡，可以抑制犬肝外胆管狭窄。     

电离辐射诱导犬胆管成纤维细胞凋亡及防治胆管损伤后瘢痕增生的研究

目的探讨电离辐射诱导犬胆管成纤维细胞凋亡及防治胆管损伤后狭窄关系。方法将103Pd放射性支架,放射性活度为125×104kBq,和普通支架分别植入犬肝外胆管内,取出胆管标本,用DNA凝胶电泳检测成纤维细胞凋亡和透射电镜观察凋亡细胞形态和DNA的变化;并用计算机图像检测系统检测两组胆管腔面积。结果103Pd放射性支架明显抑制犬胆管组织中增生性瘢痕成纤维细胞生长,并出现典型的细胞凋亡特征,即出现凋亡小体、DNA梯状条带等。而且,103Pd放射性支架犬肝外胆管无明显狭窄,普通支架组犬胆管未出现成纤维细胞凋亡,胆管有明显狭窄。结论103Pd放射性支架诱导增生性瘢痕成纤维细胞凋亡是防治胆管损伤后由于增生瘢痕导致胆管狭窄的重要机理之一。     

γ射线诱导下胱冬肽酶-3基因在犬胆管壁增殖平滑肌细胞凋亡中的表达及意义

目的：探讨在射线诱导下,胱冬肽酶-3(caspase-3)基因在犬胆管壁增殖平滑肌细胞凋亡中表达及意义。方法：将^103钯(^103Pd)放射性支架植入6只犬肝外胆管内,普通支架植入6只犬肝外胆管内,取出胆管标本,用RT—PCR方法检测γ射线诱导犬胆管壁凋亡的增殖平滑肌细胞中caspase-3基因的mRNA。结果:^103Pd支架组犬胆管组织中caspase-3基因表达较普通支架组明显,且caspase-3基因高表达组犬胆管出现明显增殖平滑肌细胞凋亡,而且犬肝外胆管无明显狭窄;caspase-3基因低表达组犬胆管未出现增殖平滑肌细胞明显凋亡,而且犬肝外胆管有明显狭窄。结论:caspase-3基因表达水平与细胞凋亡发生和对辐射敏感性有关,^103Pd放射性支架通过激活caspase-3基因,促进犬胆管增殖平滑肌细胞凋亡,从而抑制犬肝外胆管狭窄。     

103钯支架诱导犬胆管增殖平滑肌细胞凋亡与防治胆管狭窄关系研究

目的探讨^103钯(^103Pd)放射性支架诱导犬胆管增殖平滑肌细胞凋亡与防治犬胆管损伤后胆管狭窄的关系。方法将12只犬随机均分为^103Pd支架组和普通支架组，然后将^103Pd放射性支架和普通支架分别植入2组犬的肝外胆管内，30d处死全部动物，取出胆管标本，用凝胶电泳和免疫组化染色进行凋亡细胞检测，并用计算机图像检测系统检侧两组胆管腔面积。结果^103Pd支架组犬胆管组织中出现明显增殖平滑肌细胞凋亡，而且犬肝外胆管无明显狭窄；普通支架组犬胆管增殖平滑肌细胞凋亡不明显，而且犬肝外胆管有明显狭窄。结论^103Pd放射性支架通过促进犬胆管增殖平滑肌细胞凋亡，从而抑制犬肝外胆管损伤后的胆管狭窄。