有氧运动对肥胖青少年心率变异性的影响

目的：探讨有氧运动对肥胖青少年心率变异性（HRV）的影响,为制定特异性的运动处方提供依据。方法：40名男性肥胖青少年［体质量指数（BMI) ≥                25 kg.m^-2）］随机分为运动组（n=20）和对照组（n=20）。运动组受试者进行有氧运动干预,每周5次,每次持续50～60　min,共8周;对照组受试者保持日常生活习惯不变。实验前后分别测定受试者的身体成分、血液动力学参数［（心率（HR）和血压）］和心率变异性(HRV)参数［总功率（TP）、标准化低频功率（LFn）、标准化高频功率（HFn）以及LFn/HFn比值］。结果：实验前2组受试者各指标比较差异均无统计学意义（P>0.05）。与实验前比较,实验后运动组受试者脂肪质量（FM）、体脂百分比（BF％）、安静HR、收缩压（SBP）和舒张压（DBP）均下降(P<0.05或P<0.01),TP和HFn（P<0.01）升高,LFn和LFn/HFn比值降低（P<0.01）;对照组受试者各指标差异无统计学意义（P>0.05）。与对照组比较,实验后运动组受试者FM、BF％、安静HR、SBP、DBP、LFn和LFn/HFn比值均明显降低(P<0.05或P<0.01),TP和HFn明显升高（P<0.01）。结论：有氧运动可有效降低肥胖青少年安静时的交感神经活性,增加迷走神经张力。
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稳定表达SAV细胞的建立及其相互作用蛋白的筛选

目的建立能稳定表达SAV(Salrador Homolog)的人胚胎肾细胞HEK293细胞池并从中纯化出SAV相互作用蛋白复合物。方法从人胚胎肾细胞HEK293中提取RNA,RT-PCR扩增得到SAV基因片断,构建表达质粒pBabe-SBP-FLAG-SAV。将pBabe-SBP-FLAG-SAV质粒和病毒包装质粒共同转染HEK293T细胞来产生病毒,收获病毒后感染HEK293细胞。通过嘌呤霉素筛选直至没有细胞死亡并用Western-blot验证表达情况。用链酶亲和素beads从该稳定细胞池中纯化SAV相互作用蛋白并通过银染检测。结果 pBabe-SBP-FLAG-SAV真核表达载体构建成功,包装病毒感染HEK293后通过Western-blot检测可见SAV蛋白的表达,FLAG beads和链酶亲和素beads免疫沉淀进一步证明了该融合蛋白表达的正确性。链酶亲和素纯化出的SAV相互作用蛋白复合物在银染时可见。结论成功构建了pBabe-SBP-FLAG-SAV真核表达载体及稳定表达细胞池,纯化得到SAV相互作用蛋白复合物。为阐明这些蛋白复合体在Hippo信号通路中的作用提供了可靠信息。     

人乳头瘤病毒16亚型LAMP检测法的建立

目的本研究旨在建立一种简单、快速、灵敏的检测方法,使环介导等温扩增技术(LAMP)应用于HPV16亚型的检测。方法根据Gen Bank登录的HPV16亚型序列(FJ610152)中E7基因序列设计了多套特异引物,通过LAMP real-time Turbidimeter仪对HPV16亚型的LAMP引物进行筛选并对反应体系和反应条件进行检测和实时监控以检测其特异性和敏感性。反应结束后加入SYBR Green I染料肉眼判定并与仪器检测结果进行比对。结果建立的LAMP方法在61℃下可对HPV16核酸进行高效扩增,反应结束后加入染料肉眼判定结果与Real-time Turbidimeter仪检测结果一致;该方法具有较强的特异性和较高的敏感性(最低检出限量为3.0×103 copies/μL)。LAMP法与HPV分型试剂盒对35份样品的检测结果一致。结论本研究建立的可视化LAMP方法操作简便,适用于HPV16的快速检测。     

黄芪甲苷对大鼠心肌局部缺血再灌注损伤的改善作用及其对PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响

目的：观察黄芪甲苷（AS-Ⅳ）对大鼠心肌局部缺血再灌注（I/R）损伤的改善作用及其对PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响,阐明AS-Ⅳ对心肌I/R损伤的保护作用及可能机制。方法：选择60只雄性Sprague-Dawley大鼠,采用阻断左冠状动脉前降支血流30 min再灌注120 min的方法制备局部I/R模型,随机分为模型组（等体积生理盐水）、AS-Ⅳ组（于再灌注前5 min静脉注射10  mg/kg AS-Ⅳ）、PI3K抑制剂Wortmannin（WOR）组（于再灌注前10 min静脉注射0.6 mg/kg WOR）和AS-Ⅳ+WOR组（于再灌注前5、10min依次静脉注射10 mg/kg AS-Ⅳ和0.6 mg/kg WOR）。同时选取15只同周龄大鼠作为正常对照（对照组）。分析各组大鼠I/R后的心脏质量、心肌缺血程度和梗死程度及心功能情况［左室收缩期平均压（LVSP）、舒张末期压力（LVEDP）、短轴缩短率（FS）和射血分数（EF）］;采用Western blotting法检测心肌梗死区Akt及mTOR磷酸化(p-Akt和p-mTOR)水平,特异性荧光探针DHE染色分析心肌活性氧自由基水平。结果：与对照组比较,模型组大鼠心肌缺血程度、梗死程度、LVEDP、心肌p-Akt/Akt和p-mTOR/mTOR及活性氧自由基水平均升高（P<0.05）,LVSP、FS和EF均降低（P<0.05）。与模型组比较,AS-Ⅳ组大鼠心肌缺血程度、梗死程度、LVEDP及活性氧自由基水平均降低（P<0.05）,心肌p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR 及LVSP、FS和EF均升高（P<0.05）;与AS-Ⅳ组比较,WOR组和AS-Ⅳ+WOR组大鼠心肌缺血程度、梗死程度、LVEDP及活性氧自由基水平均升高（P<0.05）,心肌p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR及LVSP、FS和EF均降低（P<0.05）。结论：AS-Ⅳ对心肌I/R损伤有改善作用,可降低心肌梗死及氧化应激程度并提高心功能,其机制可能通过激活PI3K/Akt/mTOR信号通路发挥作用。     

对1例腹膜透析患者的药学监护

1例67岁男性患者,因冠心病、急性冠脉综合征入院治疗,入院时合并有风湿性心脏病、慢性肾功能不全尿毒症期（双侧肾脏萎缩）等多种疾病,给予扩冠、降脂、抗血小板、抗凝等治疗,并于入院后第2天行经皮冠状动脉介入治疗,术后患者出现急性左心衰合并肺部感染,给予利尿、强心、化痰、平喘、抗感染等药物治疗。针对患者需要腹膜透析的情况临床药师建议进行强心药物地高辛的血药浓度监测,规避地高辛蓄积中毒的风险。在抗感染治疗中,根据痰培养结果,结合腹膜透析可部分清除氟康唑的特点,建议在透析后给予氟康唑,并给予不受腹膜透析影响的左氧氟沙星进行抗感染治疗,同时对抗感染治疗过程中使用的亚胺培南西司他丁以及左氧氟沙星引起的震颤、失眠等不良反应进行监测。