NGS检测乙型肝炎病毒耐药基因突变情况及其临床意义

目的检测乙型肝炎患者的HBV YMDD突变情况,探究下一代测序技术(next generation sequencing,NGS)检测HBV耐药基因突变的可行性及患者性别与其YMDD突变的相关性,并为临床用药提供参考。方法运用NGS测序技术对收集的100例临床样本进行HBV YMDD突变的检测,并与临床检测金标准Sanger测序法的测序结果进行比对。结果运用NGS检测100例HBV样本,其中YMDD野生型88例,HBV YMDD耐药基因突变12例,与Sanger测序法的测序结果完全相符。结论本研究结果显示,NGS技术可用于HBV耐药基因突变检测,患者性别与HBV耐药突变无明显相关性。     

量子点作为荧光探针的生物应用进展

量子点作为一种新型的荧光纳米材料,因其量子效应,宽激发光谱及高摩尔消光系数等优点引起了广泛关注,近年来,随着水溶性量子点制备技术的发展,其生物学应用也愈发广泛。本文简述量子点的结构和特性,及水溶性量子点作为荧光探针在生物成像、体外诊断及其他方面的生物学应用,对磁珠量子点在体外诊断的应用、量子点在快速诊断中的应用、量子点的双标记、量子点在光激化学发光法的初步应用作重点论述。另外本文还对其应用的高通量、自动化、多元化作一展望。     

类风湿关节炎并发冠心病实验室诊断及相关性

目的 探讨相应实验室指标在类风湿关节炎 (RA) 并发冠心病 (CHD) 中的诊断价值及相关性.方法 以性别和年龄匹配设置RA并发CHD组、单纯RA组, 单纯CHD组和健康对照组各102例, 回顾性分析RA特异性指标 (ESR、RF、ACCP、IL-6) 和CHD特异性指标 (CK、CK-MB、α-HBDH、hs-TnT、Mb) 在4组中水平变化, 统计分析2组特异性指标在RA并发CHD组中的相关性.结果 4组间RA患病组 (包括单纯和并发) 关节畸形率明显高于非RA疾患组 (P<0.001) , 单纯CHD组高血压患病率及吸烟率明显高于其余3组 (P=0.016, 0.021) , 4组间BMI、TC差异无统计学意义 (P>0.05) ;RA并发CHD患者中, RA特异性指标ESR、RF、ACCP和IL-6, 以及CHD特异性指标CK、CK-MB、hs-Tn T和Mb均出现明显的升高 (P<0.05) ;ACCP与CK、CK-MB明显正相关 (P<0.05) , IL-6与CK、CK-MB、Mb明显正相关 (P<0.05) .结论 对RA患者ACCP或IL-6的检测, 可预测RA并发CHD的发生.     

凝血及炎性因子检测在类风湿关节炎并发冠心病患者中的临床意义

目的探讨实验室凝血指标及相关炎性指标检测在类风湿关节炎(RA)并发冠心病(CHD)患者中的临床意义。方法选择2015年1月至2016年12月昆明医科大学第六附属医院住院患者为研究对象,按照疾病种类将研究对象分为RA并发CHD组、单纯RA组,单纯CHD组,同时选取健康体检者作为对照组,每组研究对象120例。分析各组抗环瓜氨酸抗体(ACCP)、类风湿因子(RF)、白细胞介素-6(IL-6)及凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、血浆纤维蛋白原(FIB)水平和凝血酶时间(TT)、D-二聚体(D-D)和纤维蛋白(原)降解产物(FDP)的水平。结果 RA并发CHD组中,RF、ACCP、IL-6水平均明显高于其他3组(P0.012 5);单纯RA组的RF、ACCP和IL-6水平与其他3组比较,差异均有统计学意义(P0.012 5);单纯CHD组RF、ACCP水平与单纯RA组和RA并发CHD组比较,差异有统计学意义(P0.012 5)。单纯RA组和RA并发CHD组的D-D、FIB、FDP水平与其他3组比较差异均有统计学意义(P0.012 5);单纯CHD组的D-D、FDP水平与单纯RA组和RA并发CHD组比较,差异有统计学意义(P0.012 5)。结论 ACCP、IL-6及凝血指标D-D、FIB、FDP的检测能及时反映RA并发CHD患者的病情发展及体内凝血和纤溶系统失衡情况,可在临床推广使用。     

NGS检测乙型肝炎病毒耐药基因突变情况及其临床意义

目的 检测乙型肝炎患者的HBV YMDD突变情况,探究下一代测序技术(next generation sequencing,NGS)检测HBV耐药基因突变的可行性及患者性别与其YMDD突变的相关性,并为临床用药提供参考. 方法 运用NGS测序技术对收集的100例临床样本进行HBV YMDD突变的检测,并与临床检测金标准Sanger测序法的测序结果进行比对. 结果 运用NGS检测100例HBV样本,其中YMDD野生型88例,HBV YMDD耐药基因突变12例,与Sanger测序法的测序结果完全相符.结论 本研究结果显示,NGS技术可用于HBV耐药基因突变检测,患者性别与HBV耐药突变无明显相关性.     

肺癌患者EGFR及KRAS基因突变检测方法的建立和临床应用

目的本研究拟在评估二代测序(next generation sequencing,NGS)技术在肺癌临床分子诊断中应用的可行性。方法本研究选取108例肺癌石蜡包埋样本(formalin fixed paraffin embedded,FFPE),同时进行一代测序(sanger sequencing)和NGS检测样本中EGFR和KRAS基因的突变情况。结果在108例肺癌样本中,一代测序检出突变在二代测序中均检出,另外NGS还检测出目标区域外其他突变。结论 NGS的检测准确性可达到100%。NGS可以应用于肺癌临床分子诊断,同时NGS能给临床提供更详细的基因突变信息,为分子靶向治疗提供依据,更具有市场潜力及应用前景。     

玉溪地区高敏肌钙蛋白T在人群中的分布特点分析

目的了解玉溪地区高敏肌钙蛋白T(high sensitive cardiac troponin-T,hs-cTnT)在普通人群中的分布特点。方法以玉溪市人民医院2017年7月至10月的1 594例18～89岁健康体检者为研究样本,对hs-cTnT在普通健康人群检出率、分布特点及与常规生化指标的相关性进行统计分析。结果 (1)hs-cTnT在普通健康人群检出率为57.31%,其中男性的检出率是74.52%,女性的检出率是23.75%;(2)普通健康人群中男性的hs-cTnT平均水平为(5.59±5.08)ng/L,女性为(3.46±1.45)ng/L,男性与女性hs-cTnT水平有统计学差异(P<0.05),各年龄段hs-cTnT水平比较男性均高于女性;(3)hs-cTnT水平随年龄增长而增大,男性和女性66岁以上人群与其它各年龄组人群的hs-cTnT水平比较均有统计学差异(P<0.05);(4)hs-cTnT与年龄和肾功能指标尿素(urea nitrogen,Urea)、肌酐(creatinine,Crea)尿酸(uric acid,UA)呈明显正相关。结论 hs-cTnT存在性别和年龄的分布差异,应建立不同性别、不同年龄的参考区间;56岁以下女性hs-cTnT检出率较低,将其作为心脑血管疾病早期筛查和监测的指标意义有限。     

CRISPR-Cas13a系统在基因编辑和分子诊断领域中的研究进展

成簇的规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)-CRISPR相关蛋白(Cas)系统是一个强大的基因编辑工具。相对于Cas9,Cas13a可靶向多基因转录产物,从而调控基因功能表达,填补了Cas9仅限于DNA水平的编辑及脱靶效应等缺陷。不仅如此,利用Cas13a靶向RNA的特性,该系统被成功地改造成下一代核酸诊断工具。文章概述了CRISPR-Cas13系统在基因编辑及分子诊断领域的最新研究进展,并对该系统的应用前景进行了展望。     

不同HBV感染自然史状态及肝硬化患者抗-HBc水平及其临床意义

目的 研究慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染不同自然史状态及肝硬化患者血清乙型肝炎病毒核心抗体(抗-HBc)水平及其用于自然史状态区别诊断的临床价值.方法 纳入2015年3月至2016年6月就诊的慢性HBV感染患者160例,根据自然史状态分为免疫耐受组(n=43)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)阳性慢性乙型肝炎(CHB)组(n=37)、非活动携带组(n=39)及HBeAg阴性CHB组(n=41),同时纳入HBeAg阳性(n=44)及阴性肝硬化患者(n=46).收集患者一般情况,检测血清乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、HBeAg、抗-HBc、HBV DNA载量及HBV基因型.分析抗-HBc与临床指标的相关性及其用于自然史状态区别诊断的价值.结果 不同自然史状态抗-HBc由高至低为:HBeAg阳性CHB组(4.22±0.68)log10 IU/mL、HBeAg阴性CHB组(3.89±0.88)log10 IU/mL、非活动携带组(3.07±0.68)log10 IU/mL及免疫耐受组(2.88±0.82)log10 IU/mL.HBeAg阳性及阴性肝硬化患者抗-HBc分别为(3.04±0.82)、(3.15±0.86)log10 IU/mL.HBeAg阳性CHB组抗-HBc与ALT(r=0.353,P=0.032)及AST(r=0.421,P=0.009)呈正相关;HBeAg阴性CHB组抗-HBc与HBV DNA(r=0.343,P=0.028)、ALT(r=0.458,P=0.003)及AST(r=0.495,P=0.001)呈正相关.抗-HBc区别诊断免疫耐受状态及HBeAg阳性CHB的AUC为0.903,区别非活动携带状态及HBeAg阴性CHB的AUC为0.833.结论 不同慢性HBV感染自然史状态下血清抗-HBc水平存在明显差异,且抗-HBc可用于慢性HBV感染自然史状态的区别诊断,诊断价值高于HBsAg水平.     

肺癌患者EGFR及KRAS基因突变检测方法的建立和临床应用

目的 本研究拟在评估二代测序(next generation sequencing,NGS)技术在肺癌临床分子诊断中应用的可行性. 方法 本研究选取108例肺癌石蜡包埋样本(formalin fixed paraffin embedded,FFPE),同时进行一代测序(sanger sequencing)和NGS检测样本中EGFR和KRAS基因的突变情况. 结果 在108例肺癌样本中,一代测序检出突变在二代测序中均检出,另外NGS还检测出目标区域外其他突变. 结论 NGS的检测准确性可达到100％.NGS可以应用于肺癌临床分子诊断,同时NGS能给临床提供更详细的基因突变信息,为分子靶向治疗提供依据,更具有市场潜力及应用前景.