基因转移与基因治疗进展

基因转移技术的发展为肿瘤等疾病的治疗开辟了一条崭新的途径。本文对基因转移及基因治疗的一些实验室，前临床科学和临床情况及今后的发展趋势作了简要介绍。     

输血相关病毒(TTV)研究的现状

在人类目前已认识的甲、乙、丙、丁、戊和庚型肝炎病毒(ＨＧＶ)之外 ,似存在其他的非甲～非庚型肝炎致病因子。1997年 12月 ,日本学者Ｎｉｓｈｉｚａｗａｅｔａｌ[1] 应用代表性区别分析 (ＲＤＡ)技术 ,从 1例输血后非甲～非庚型肝炎病人 (ＴＴ)血清中获得 1个新的ＤＮＡ病毒阳性克隆 (Ｎ2 2 ) ,将此病毒核苷酸序列与ＧｅｎＢａｎｋ中已登记的序列比较 ,未发现相同的基因序列 ,分子流行病学的研究证实了Ｎ2 2 与输血后肝炎有一定的相关性 ,表明它有可能是一种新型的肝炎相关病毒 ,遂以病人名字命名为ＴＴ病毒 ,同时又与经输血传播病毒(Ｔｒ…     

克隆超基因家族中新基因的一种PCR同源引物

目的 用同源引物克隆ＲＮＡ低丰度表达的小鼠β－趋化因子受体。 方法：将β－趋化因子受体小鼠ＭＩＰ－ＩαＲ，人ＭＣＰ－１Ｒ和大鼠ＩＬ－８Ｒ跨膜区中高度保守的氨基酸序列中的核苷酸进行相似序列对比后，设计出同源引物，再用ＲＴ－ＰＣＲ扩增出ＤＮＡ片段，经基因库检索为该超基因家族中的新基因序列后设计特异引物，用Ｍａｒａｔｈｏｎ ＰＣＲ扩增出该新基因。 结果：成功克隆出小鼠β－趋化因子受体５（ＣＣＲ５）ｃＤＮ     

CC趋化因子受体5在滤泡状甲状腺癌中的表达

目的:研究CC趋化因子受体5(CCR5)在滤泡状甲状腺癌中的表达,并检测血清中CCR5配体的含量,为进一步探讨CCR5在滤泡状甲状腺癌演进和转移中的作用奠定基础.方法:采用免疫组化方法检测15例滤泡状甲状腺癌患者以及17例甲状腺腺瘤患者,12例癌旁甲状腺组织中CCR5的表达情况, 同时应用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测血清中CCL3、CCL4、CCL5的浓度.结果:滤泡状甲状腺癌组织中,CCR5表达阳性率(11/15)明显高于甲状腺腺瘤和正常甲状腺组织(P＜0.01).滤泡状甲状腺癌患者血清中CCL3、CCL5的浓度显著高于对照组(P＜0.05).结论:滤泡状甲状腺癌组织中存在着CCR5高表达,且外周血CCL3,CCL5浓度明显升高,提示CCR5可能在滤泡状甲状腺癌发病进程中发挥着重要的作用.     

RNA干扰技术

RNA干扰首次发现于美丽线虫,siRNAs(小干扰RNA)的产生可诱导特异内源性mRNA的降解,现在被认为是真核细胞在翻译后水平抑制蛋白产生的主要途径.典型的内源性siRNA是由19-23个碱基构成的双链寡核苷酸RNA,由RNase蛋白复合物聚集降解靶mRNA所产生.RNA干扰最近常被用作逆转录基因工具来沉默多倍体有机体中的基因表达.表达siRNAs的方法日新月异,已经由最初的在体内或者体外利用病毒载体转染合成的siRNA至细胞,发展为在不同型细胞和有机体中建立不同功能的特异蛋白.RNA干扰的方法较之前的方法(反义DNA或抗体封闭技术)在抑制基因表达方面有着明显的优点.RNAi序列特异性的抑制效应是有选择性的、长期的,系统地调节靶向基因.不论是直接转染siRNA或者由RNA载体表达产生,RNAi都可抑制哺乳动物中的特异基因,这无疑加速了基因功能的研究速度,而且极有潜力成为高效的基因特异性治疗方法.药理学家一直梦寐以求可有方法能够选择性的拮抗或剔除个体特异蛋白的功能,RNAi十分有望使其梦想成真.     

克隆人胸腺素α原cDNA及RNA二级结构分析和带Xa因子的融合表达

目的:克隆表达具有重要生物功能的胸腺素α原cDNA(human prothymosinα, huPTMAα).方法:从健康中国人PBMC poly(A)+ RNA中采用RT-PCR法克隆huPTMAα cDNA,并作RNA二级结构分析.结果:克隆出长度为300 bp,编码100个氨基酸的huPTMAα cDNA,经氨基酸序列分析发现在37～41位缺失Asn37-Gly38-Asn39-Ala40-Glu41和65～68位缺失Glu65-Glu66-Glu67-Glu68,与国际基因库连接检索证明是与huPTMAα有86.4%同源性的一个新亚型,融合表达蛋白的相对分子质量为3.7×104,有促进IFN和TNF产生的生物学活性.结论:本研究克隆的huPTMAα cDNA是中国人中新发现的一个多态型基因序列,它的克隆并表达成功为今后该基因的免疫功能研究及中国人基因型研究分析提供了有用的材料.     

克隆人胸腺素α原cDNA及RNA二级结构分析和带Xa因子的融？…

目的;克隆表达具有重要生物功能的胸腺素α原ｃＤＮＡ（ｈｕｍａｎ ｐｒｏｔｈｙｍｏｓｉｎα,ｈｕＰＴＭＡα）。方法：从健康中国人ＰＢＭＣｐｏｌｙ （Ａ）＾＋ＲＮＡ中采用ＲＴ－ＰＣＲ法克隆ｈｕＰＴＭＡα ｃＤＮＡ,并作ＲＮＡ二级结构分析。结果克隆出长度为３００ｂｐ,编码１００个氨基酸的ｈｕＰＴＭＡα ｃＤＮＡ,经氨基酸序列分析发现在３７－４１位缺失Ａｓｎ＾３７－Ｇｌｙ＾３８＝Ａｓｎ＾３９－Ａｌａ＾４     

Sequence of a new prothymosinα cDNA

HUInan Prothmpin a(h~ a) is an ~ogleal ~ator which has mulhple Physiological functions.CauCaSian h~ a gabs has ho cloned lOng before andhas ho used as an anti-~ biolopcal drug in Pre-clinical stubs.,[lj. Considering the ethic gIDuP ~e andthe gene's pci~ic, we cloned the Chinese (ha)huPTMA a and studied its fUnchon. It is Pmved that ourgene is a new suhtype of h~ a and has 86.4% homology with Genbank data. Our gene has been acceptedby Genbank Of NCBI(National Center of Biotechnology…     

趋化因子CXCL13及其受体CXCR5研究进展

趋化因子及其受体是免疫系统的重要组成部分,通过它们之间的信号传导,使得免疫系统正常运作.根据其结构特征,趋化因子及其受体被分为C、CC、CXC、CX3C四个家族,本文将介绍近两年对CXC家族的趋化因子CXCL13的结构特征、表达调控、与细胞因子家族其它成员之间的相互作用,以及它与相应的配体CXCR5结合后所介导的生理和病理作用等方面研究的一些进展,为今后的研究工作提供帮助.