三种中药皂甙对K562细胞诱导分化作用的实验研究

目的研究人参总皂甙（ＴＳＰＧ）、绞股蓝总皂甙（ＧＰ）、三七总皂甙（ＰＮＳ）对Ｋ５６２细胞诱导分化的影响；方法采用细胞体外培养技术，通过细胞形态学、细胞化学、表面膜抗原（ＨＩＲ２、ＣＤ１５、ＣＤＷ４１）等检测方法；结果经三种皂甙诱导后，ＴＳＰＧ、ＧＰ不能诱导Ｋ５６２细胞合成过氧化物酶（ＰＯＸ）而能合成血红蛋白（Ｈｂ），仅有表达ＣＤＷ４１，ＨＩＲ２的阳性细胞数明显增加；而ＰＮＳ不能诱导Ｋ５６２细胞合成Ｈｂ而能合成ＰＯＸ，表达ＣＤＷ４１、ＨＩＲ２、ＣＤ１５的阳性细胞数均明显增加；结论ＴＳＰＧ、ＧＰ、ＰＮＳ均能诱导Ｋ５６２细胞向多系分化为较成熟的细胞，ＴＳＰＧ、ＧＰ主要诱导其向红系分化，ＰＮＳ则诱导其向粒系分化为主     

Cys C的原核表达载体构建和鉴定

目的:构建人胱抑素C(Cys C)的原核表达载体,为进一步表达纯化Cys C重组蛋白奠定基础.方法:从HL-60细胞中提取总RNA,RT-PCR扩增Cys C基因,再将目的基因克隆至PET32a( )表达载体中,构建人Cys C原核表达质粒PET32a( )/Cys C;再将此重组子进行双酶切电泳鉴定和测序鉴定.结果:酶切电泳鉴定结果显示Cys C基因克隆入载体中,测序结果证实克隆的基因序列与GeneBank中的Cys C序列相符.结论:获得了人Cys C原核表达质粒PET32a( )/Cys C,为进一步表达和纯化Cys C重组蛋白奠定了工作基础.     

骨保护素抑制小鼠植骨气囊模型中聚乙烯磨损颗粒诱导的溶骨效应

目的 运用小鼠植骨气囊模型,研究骨保护素(osteoprotegerin,OPG)减少破骨细胞骨破坏的吸收效应.方法 在小鼠背部注入空气形成气囊,取同源小鼠的颅骨植入气囊内制作气囊模型.实验分成3组:空白组(气囊内注入生理盐水)、颗粒组(气囊注入聚乙烯颗粒和生理盐水)、OPG组(气囊内注入聚乙烯颗粒和OPG).3周后取...     

血清精氨酸代琥珀酸裂解酶的测定在肝病诊断中的意义

目的探讨血清精氨酸代琥珀酸裂解酶（ASL）对肝病的诊断效能。方法测定291例肝病患者、247例非肝病患者和32名健康对照血清ASL和ALT、AST、GGT、LDH、ALP活性及TBil浓度；其中31例肝病患者进行了病理组织学检查。结果ROC曲线显示ASL对判断肝病的敏感度为100．0％，特异性为91．1％（分界值=8．0U／L）；ALT和AST的敏感度为97．60%和83．8％，特异性仅分别为24．7％和28．3％（分界值=40．0U／L）。ASL在不同肝病的变化情况是肝癌〉急性肝炎〉肝硬化〉慢性肝炎；ASL浓度[（86．9±26．5）u／L]与肝病理组织学炎症活动度计分（9．83±3．36）呈正相关（r=0．417，P=0．019）。结论ASL诊断肝病的敏感度、特异性优于AST和ALT，是肝病诊断的有用指标。     

脂肪血制备的去白细胞悬浮红细胞储存期代谢特性研究

目的:探讨脂肪血制备的去白细胞悬浮红细胞在储存期的主要代谢途径转换,为脂肪血制备的悬浮红细胞储存提供参考。方法:选择脂肪血和正常全血各10 U,制备成去白细胞悬浮红细胞,在制备当天(d 0)、d 14、d 35分别取样,采用UPLC-MS/MS检测红细胞内的代谢物。采用Mann-Whitney U检验分析2组标本糖酵解途径和磷酸戊糖途径代谢物的差异,分析脂肪血制备的悬浮红细胞储存期的代谢途径变化。结果:d 0实验组红细胞内代谢物葡萄糖、腺嘌呤、丙酮酸、GSH、GSSG和烟碱酰胺水平均高于对照组(P0.05)。d 14实验组红细胞中葡萄糖、丙酮酸和GSH水平低于对照组(P0.05),腺嘌呤、烟碱酰胺和GSSG水平高于对照组。D 35实验组红细胞中葡萄糖水平低于对照组(P0.05),腺嘌呤、烟碱酰胺水平高于对照组(P0.05),两组之间的丙酮酸、GSSG和GSH水平差异无统计学意义(P0.05)。结论:与正常红细胞相比,脂肪血红细胞储存期内能量代谢减弱,磷酸戊糖途径增强。     

人参总皂苷对人慢性粒细胞性白血病K562细胞Fas、sFas和FasL的影响

人参Panax ginseng C.A.Meyer是祖国医学“补气”要药，人参总皂苷（total saponins of Panax ginseng ,TSPG）是其主要有效部位。既往研究已经证明TSPG既能促进造血干／祖细胞增殖分化及其信号转导，诱导造血生长因子基因表达，又能诱导白血病细胞凋亡和向较成熟细胞分化。诱导细胞凋亡的信号和转导途径多种多样，其中Fas—FasL途径属于死亡因子及其受体介导的信号转导途径。本实验就TSPG诱导人慢性粒细胞性白血病K562细胞凋亡的信号转导机制进行探讨，旨在为研究TSPG治疗白血病等肿瘤的机制提供实验依据。     

《免疫学及免疫学检验》多媒体教学的几点体会

经过《免疫学和免疫学检验》的多媒体教学实践，证明此种教学方法具有形象、生动、直观的优越性，提高了课堂教学的效率，并能充分发挥网络优势；但同时也存在教学活动中缺乏师生间的交流和互动、课件的设计开发不令人满意等缺点。通过认真总结和思考，提出几种改进方法，以期使之发挥更好的教学效果。     

人参多糖对K562细胞增殖抑制及诱导分化的实验研究

目的　研究人参多糖(GPS)对人白血病细胞株(K562)增殖抑制及诱导分化的影响。方法　采用细胞体外培 养技术,MTT法检测细胞增殖抑制,光镜和电镜观察细胞形态变化;联苯胺(Benzidine)、糖原染色(PAS)、过氧化物酶 (POX)、非特异性脂酶(α- NAE)细胞化学染色分别检测K562细胞向红系、粒系、巨核系分化的特征;免疫细胞化学检测细胞 表面分化抗原及因子表达(CD14、CD15、HIR2、EPO、GM CSF);FAS及FAS L等检测细胞凋亡情况。结果　GPS对K562细胞 的增殖有明显抑制作用并能诱导K562细胞向红系或粒系细胞分化,表现为:①K562细胞的增殖受到抑制;②K562细胞形 态学上可见细胞体积缩小,核直径减小,核仁减少或消失,核染色质浓缩,胞浆丰富,核浆比例降低,可见中晚期粒、红系细 胞;③K562细胞血红蛋白(Hb)、糖原、α- NAE的表达明显增加,而过氧化物酶(POX)的表达与对照无显著性差异;④细胞表 面分化抗原CD15、HIR2、EPO、GM CSF的表达明显增强,CD14的表达与对照无显著性差异;⑤细胞凋亡明显增加。结论　人 参多糖(GPS)能明显抑制K562细胞增殖并能诱导其凋亡并使K562细胞向成熟方向分化。     

人参皂甙诱导白血病细胞凋亡及对Fas、FasL表达的影响

目的　研究人参总皂甙诱导白血病细胞凋亡及其机制,为进一步开发人参皂甙提供理论与实验依据。方法 　采用图像分析术、流式细胞术、形态学观察与免疫细胞化学等方法,研究人参总皂甙诱导K562细胞凋亡。结果　人参 总皂甙对K562细胞有增殖抑制作用,并可诱导K562细胞凋亡明显增加,同时K562细胞Fas表达升高。结论　人参总皂 甙能诱导K562细胞凋亡,其机制可能与调控Fas表达升高有关。