中药尿毒清冲剂治疗大鼠慢性肾衰的实验观察

连续喂养0.5％腺嘌呤使Wistar大鼠产生氮质血症,毒素蓄积及水电介质代谢紊乱等与人慢性肾衰相类似的代谢异常。两周后,治疗组大鼠每天用中药尿毒清(3.75g/kg、1.25g/kg)灌胃连续6周:明显改善了大鼠肾衰症状,BUN、Scr水平明显降低(P<0.05);显著升高RBC、HGB,HCT (P<0.05),肾衰的高血磷,低钙均有不同程度的改善。病理学观察,给药组与肾衰模型对照组大鼠比较,肾重量减轻(P<0.01),肾组织内结晶沉积物减少(P<0.01),纤维组织增生减轻,部分肾小管形态趋于正常。结果表明尿毒清对大鼠肾衰有明显治疗效果。     

苦豆子总碱对大鼠实验性结肠炎SOD,MDA,NO,MPO表达的影响

目的:观察苦豆子总碱对实验性结肠炎大鼠的结肠组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、髓过氧化酶(MPO)表达的影响。方法:将SD大鼠随机分成6组,采用三硝基苯磺酸(TNB)灌肠法,制备实验性结肠炎大鼠模型。第2天开始灌胃,3周后测定结肠黏膜组织中SOD活力、MDA含量、NO含量、MPO活力。评价大鼠的症状和结肠组织学变化。结果:造模组大鼠结肠炎黏膜SOD值显著低于正常组,MDA,NO,MPO值显著高于正常组(P<0.05)。各治疗组均能升高SOD值,降低MDA,NO,MPO值(P<0.05),改善大鼠的症状和结肠组织学损伤(P<0.05)。结论:苦豆子总碱可能通过抑制氧自由基反应,抑制NO生成,抗炎作用来改善或减轻结肠炎症状。     

苦参碱体外诱导人结肠腺癌SW620细胞凋亡的实验研究

目的 观察苦参碱(MT)诱导结肠腺癌细胞株SW620凋亡的作用并探讨其可能机制.方法 采用MTT法检测MT对SW620细胞的增殖抑制作用.应用流式细胞仪检测MT对SW620胞生长周期的影响,光学显微镜、荧光显微镜、电镜下观察细胞形态学变化.Annexin V-FITC法检测MT对SW620细胞凋亡的影响.结果 MT抑制SW620细胞增殖和诱导SW620细胞的凋亡作用均呈剂量和时间依赖性,其48 h IC50=0.934 mg/ml.与对照组相比,苦参碱处理后的SW620细胞G0/G12期百分比明显增高,S期细胞比例下降.细胞爬片HE染色以及透射电镜可见实验组细胞出现典型的细胞凋亡形态改变:细胞皱缩,体积减小,胞浆凝聚,空泡化明显,凋亡小体形成以及所谓的"印戒"细胞.结论 MT在体外能抑制SW620细胞的增殖.诱导细胞凋亡,其诱导作用具有明显的量效和时效关系.     

莪术、哈蟆油对去势后大鼠雌激素水平及受体表达的影响

目的 检测莪术、哈蟆油对去势后大鼠血清雌激素水平、脾脏雌激素受体表达,探讨其对生殖内分泌-免疫网络的影响及作用机制.方法 将成年SD雌性大鼠去势后制成更年期综合征模型,给药12周后,采用放射免疫法测定大鼠血清性激素(E2、FSH、LH、T、P)和白介素-2含量.取脾脏用免疫荧光法检测雌激素受体表达.结果 与模型对照组比较大剂量莪术、哈蟆油能升高去势大鼠血清E2、T、P水平(P<0.01),明显提高IL-2含量(P<0.01),有降低FSH、LH含量趋势(P0.05),并能显著升高脾脏ER表达水平(P<0.01).结论 莪术、哈蟆油可提高去势大鼠血清性激素水平,增强脾脏ER表达.为临床治疗更年期综合征提供实验依据.     

重组生长激素释放激素GHRH的纯化及活性测定

目的 用基因工程的方法在大肠杆菌中诱导表达重组生长激素释放激素(GHRH),检测其生物学活性。方法 将重组表达质粒pET-28a /L-ansB-GHRH,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导融合蛋白表达。经裂解细胞、洗涤、乙醇沉淀、酸水解、SP-Sephadex C-25和Sephadex G25柱层析等方法纯化GHRH。用人生长激素放免试剂盒检测GHRH多肽的活性。结果 SDS-PAGE分析显示重组表达质粒在大肠杆菌中成功地表达了融合蛋白,它以不溶性的包涵体形式存在,占菌体总蛋白的30%左右。经抽提、酸水解、层析等方法表明纯化倍数达147倍,多肽收率为0.68%。通过电喷雾质谱测得多肽的相对分子质量为5235.25,与理论计算值相吻合。多肽的纯度经SDS-PAGE测定为单一峰。GHRH三组刺激实验组与空白对照组相比之间差异显著(P<0.01),且随着剂量增加,差异明显增加。结论 体外重组GHRH多肽具有较高的生物学活性。     

红毛五加的抗炎作用

用大鼠和小鼠炎症模型研究了红毛五加醇提物的抗炎作用。结果表明,红毛五加醇提物对蛋清诱发的大鼠足跖水肿和巴豆油诱发的小鼠耳壳局部肿胀有明显抑制作用,对大鼠棉球肉芽组织增生性炎症有抑制作用;明显抑制大鼠由佐剂引起的早期局部急性炎症和后期继发性全身炎症反应。红毛五加醇提物对摘除双侧肾上腺大鼠的蛋清足肿胀仍有明显的抑制作用。结果还显示其抗急性炎症作用不依赖于垂体——肾上腺系统。红毛五加醇提物能减少炎性组织中PGE含量,明显降低组织胺引起的毛细血管通透性增高。     

氧化苦参碱对人结肠癌SW620细胞p16/cyclinD1/CDK4通路的影响

目的观察氧化苦参碱诱导人结肠腺癌细胞株SW620凋亡的作用并探讨其可能机制。方法采用MTT法检测氧化苦参碱对SW620细胞的增殖抑制作用;Hoechst33258荧光染色检测氧化苦参碱对SW620细胞凋亡的影响;流式细胞仪检测氧化苦参碱对SW620细胞周期的影响;实时定量PCR法检测细胞内p16、cyclinD1及CDK4基因表达水平;免疫印迹法检测细胞内p16、CyclinD1及CDK4蛋白表达水平。结果氧化苦参碱抑制SW620细胞增殖作用呈剂量依赖性,其作用24 h的IC50为4.02μmol/L;与对照组相比,苦参碱处理后的SW620细胞G1期比例明显增高,G2期细胞比例下降(P<0.05);氧化苦参碱作用后SW620细胞p16基因和蛋白水平升高(P<0.05),cyclinD1及CDK4基因和蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论氧化苦参碱在体外能抑制SW620细胞的增殖,诱导细胞在G1期阻滞,其诱导作用与其调控p16、cyclinD1及CDK4基因和蛋白表达有关。     

槐定碱对小鼠免疫器官的影响

[摘要] 目的 观察槐定碱(SRI)观察对昆明小鼠免疫器官的影响。方法 将50只昆明小鼠分为槐定碱高剂量组(SRI H)、槐定碱低剂量组(SRI L)、氟尿嘧啶组(5-FU)、槐定碱+氟尿嘧啶合用组和生理盐水阴性对照组,腹腔注射给药两周。计算不同组别小鼠的胸腺指数、脾脏指数,进行胸腺、脾脏、肝脏、肾脏的病理组织学观察。结果 槐定碱组小鼠的胸腺、脾脏指数与阴性对照组比较均无显著变化(P>0.05);5-FU组小鼠胸腺和脾脏指数与阴性对照组比较显著降低(P<0.01);合用组小鼠的胸腺和脾脏指数与阴性对照组相比显著降低(P<0.01),胸腺指数与各组相比均有显著性差异(P<0.01),脾脏指数与5-FU组相比差异有显著性 (P<0.01),与对照组、槐定碱组比较差异无显著性 (P>0.05)。结论 SRI对昆明小鼠的免疫功能无明显抑制作用,可以拮抗5-FU对脾脏的免疫抑制。     

UV法测定哈蟆油中蛋白质的含量

哈蟆油（Oviductus Ranae,OR）系蛙科动物中国林蛙（Rana temporaria chensinesis David）雌蛙的输卵管干制品,为《中国药典》收载品种。其别名有田鸡油、哈士蟆油、蛤蟆油等。哈蟆油为我国特产的动物中药材。主产地是黑龙江、吉林、辽宁三省,尤以吉林省为主。具有补益肾精、润肺养阴之功效。临床上用于阴虚体弱、神疲乏力、     

苦豆子总碱抗肿瘤作用的实验研究

目的 观察苦豆子总碱(TASA)抗肿瘤的作用.方法 采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)考察TASA对人肝癌细胞株QGY7703,大鼠肝癌细胞株CBRH7919,人胃癌细胞株BGC823,人结肠癌细胞株SW480及HT29的增殖抑制作用;以小鼠S180肉瘤为模型,考察TASA对体内肿瘤生长的抑制作用.结果 TASA对前四种细胞株均有较明显的增殖抑制作用,且在0.4～3.2 mg/ml之间呈现良好的浓度-效应关系,IC50分别为2.49,2.37,0.88,0.78 mg/ml,但对HT29作用不明显;TASA对小鼠S180肉瘤也有显著的抑制作用,并对S180荷瘤小鼠的脾脏指数及胸腺指数无显著影响.结论 TASA体内外均有抗肿瘤作用.