滋阴泻火与益肾填精中药序贯治疗特发性真性性早熟女性患儿临床观察

目的观察滋阴泻火与益肾填精中药对特发性真性性早熟女性患儿的青春发育进程及骨骼发育的影响。方法将54例特发性真性性早熟7~8岁女性患儿随机分为中药组(27例,滋阴泻火与益肾填精中药序贯治疗),西药组(27例,甲地孕酮治疗)。另收取家长不愿进行任何治疗,仅愿意定期检查的27例特发性真性性早熟7~8岁女性患儿为观察组。中药组治疗第1阶段(治疗至年龄10.5岁)服用滋阴泻火方,第2阶段(年龄10.5+~11.5岁)服用益肾填精方;西药组第1阶段服用甲地孕酮,第2阶段不服用药物。治疗前、治疗第1阶段及第2阶段,测定3组患儿的乳核单位、子宫卵巢容积、促性腺激素释放激素(GnRH)兴奋试验LH峰值、桡骨骨密度、血清骨钙素及计算骨龄差/年龄差,并进行最终身高预测。结果治疗第1阶段:中药组乳核单位、子宫容积、LH峰值下降,并低于同期的观察组(P0.05,P0.01);骨龄差/年龄差、骨密度、骨钙素下降,并低于同期西药组和观察组(P0.05,P0.01)。西药组乳核单位、子宫容积、LH峰值下降,并低于同期观察组(P0.05,P0.01);骨密度上升(P0.05)。观察组乳核单位、子宫容积、卵巢容积、骨密度上升(P0.05)。治疗第2阶段:中药组子宫容积增大,并高于同期西药组和观察组;乳核单位、卵巢容积、LH峰值上升,并高于同期西药组;骨龄差/年龄差、骨密度、骨钙素上升,但仍低于同期西药组和观察组(P0.05,P0.01);最终身高预测值增加,并高于同期西药组和观察组(P0.01)。西药组乳核单位、子宫容积、卵巢容积、LH峰值低于同期观察组(P0.05,P0.01);骨龄差/年龄差、骨密度、血清骨钙素均无下降。观察组骨密度上升(P0.05),最终身高的预测值下降(P0.01)。结论滋阴泻火与益肾填精中药的序贯治疗方案能有效地调整性早熟儿童青春发育的进程,显著防止骨骺过早融合并改善最终身高。     

儿童性早熟的研究进展

性早熟是一种生长发育异常,表现为青春期特征提前出现。近年来本病的发生率显著增高,已成为最常见的小儿内分泌疾病之一。复旦大学公共卫生学院儿童少年卫生学教研室与复旦大学儿科医院联合进行的临床流行病学调查显示,目前上海地区儿童性早熟的患病率约为100/万。     

环境内分泌干扰物对青春期儿童性发育的影响

环境内分泌干扰物是环境中存在的一类化学物质,包括的种类很多。动物实验表明,环境内分泌干扰物具有拟/抗雌激素、拟/抗雄激素、拟/抗甲状腺激素等活性,其中有拟雌激素活性或抗雄激素活性的占大多数,能够造成发育期动物内分泌、生殖功能改变,可引起幼年动物的生殖毒性。青春期儿童处于发育期,其下丘脑_垂体_性腺轴对进入体内的环境内分泌干扰物很敏感,因此,环境内分泌干扰物可能是引起青春期性发育异常的一个重要因素,在女孩主要表现为性早熟,在男孩主要表现为青春期延迟。     

4-壬基酚、双酚A对幼雌SD大鼠生殖器官的拟雌激素样作用探讨

目的检测4-壬基酚(4-NP)、双酚A(BPA)对幼雌SD大鼠的拟雌激素样作用和内分泌干扰作用。方法以21日龄雌性SD大鼠为实验对象,选取4-NP和BPA为染毒物质,均设高中低剂量,连续喂饲3天,于末次给药后24h处死。以子宫湿重、脏器系数、子宫内膜及平滑肌增生程度和细胞增殖核抗原(PCNA)的蛋白表达作为检测指标,采用单因素方差分析方法进行统计。结果染毒动物实验结果显示,高中剂量的4-NP(200mg/kg和100mg/kg)和BPA(600mg/kg和400mg/kg)能够使染毒动物的子宫湿重及脏器系数明显增加(P<0.01),并且具有一定的剂量-效应关系;4-NP和BPA高、中、低剂量都能够使子宫内膜上皮增高,平滑肌增厚,PCNA蛋白表达增强(P<0.05)。结论动物染毒实验进一步证实了4-NP、BPA作为环境内分泌干扰物的拟雌激素作用及其剂量-效应关系。     

三种不同类型性早熟女童骨生长及骨代谢变化研究

目的探讨真性特发性性早熟女童三种不同类型胰岛素样生长因子1（IGF1）、骨龄（BA）及骨密度（BD）的变化。方法真性特发性性早熟女童196例，分为快速进展型、缓慢变化型及生长相对迟缓型，分别检测不同类型性早熟女童IGF1、BA及BD，并进行三种类型间比较，观察其骨生长及骨代谢的变化。结果快速进展型性早熟女童其IGF1、BA显著高于缓慢变化型及生长相对迟缓型女童（P〈0．05）；缓慢变化型女童IGF1及BA高于生长相对迟缓型患儿（P〈0．05），生长相对迟缓型患儿其IGF1明显降低，甚至低于同年龄女童正常值，BA与实际年龄相当，BD在三种类型患儿间差异无统计学意义。结论快速进展型女童存在明显的骨生长加速、成熟提前，生长潜力缩短；缓慢变化型女童尽管也存在骨生长、成熟加速，但生长速度、骨成熟进程相对较缓；生长相对迟缓型女童骨生长迟滞，呈现出性腺轴与生长轴分离现象。     

肾本质理论研究与临床应用

本项目属于中西医结合医学。中医核心理论之一“肾”的研究始于上世纪五十年代，最先发现肾阳虚证病人肾上腺皮质功能低下，得到国内7个省市和日本学者的重复验证并获得学术界的公认，进一步对下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴功能的研究，推论肾阳虚证主要发病环节在下丘脑，采取以药测证并证明唯有补肾药才能提高下丘脑的CRF基因表达，首先在国内外对肾阳虚证阐明其物质基础后，对肾作了功能定位。最近的深入研究，发现肾的功能涵盖了神经内分泌免疫网络，补肾药可对以下丘脑为中心的众多分子网络群进行调控整合，这一系列重大原创性理论研究居国内外领先水平。     

滋阴泻火中药对雌性青春期大鼠生长板ERα、IGF-1 R及EGFR基因表达和蛋白合成的调节作用

目的 观察滋阴泻火中药对雌性青春期大鼠生长板雌激素受体α(ERα)、胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)及表皮细胞生长因子受体(EGFR)基因表达和蛋白合成的调节作用,探讨滋阴泻火中药改善骨骼发育的作用环节和作用机制.方法 将青春期大鼠分为对照组和中药干预组,采用免疫组织化学和实时定量-聚合酶链反应(Realtime-PCR)对干骺端生长板ERα、IGF-1R和EGFR的基因表达和蛋白合成情况进行检测.结果 给予滋阴泻火中药干预后,青春期大鼠干骺端生长板ERα和IGF-1R的基因表达明显下调,蛋白合成显著减少;EGFR的基因表达和蛋白合成无明显改变.结论 滋阴泻火中药可以通过调节生长板ERα和IGF-1R的表达,对骨骼的发育和成熟发挥调节作用.     

性早熟患儿血清中四种环境内分泌干扰物的检测

目的建立高效液相色谱分析法测定性早熟患儿血清中4种环境内分泌干扰物(DEHP、MEHP、p,p′-DDE、4-NP)含量的方法。方法正己烷提取血清样品,采用C18色谱柱分离。以甲醇∶水∶三氟乙酸(1000∶50∶1)为流动相,应用紫外检测器在波长228nm处检测DEHP和MEHP,在波长238nm处检测p′-DDE;应用荧光检测器在激发波长275nm、发射波长312nm处检测4-NP。结果血清中待测组份的浓度和峰面积呈良好的线性关系,的线性范围是0·002~1·0μg/ml。检测限均为1ng/ml。回收率DEHP为96·84%~103·44%,MEHP为87·69%~104·92%,p,p′-DDE为87·6%~109·89%,4-NP为98·57%~105·1%。结论该方法样品处理简单、操作简便,能够节省生物样品,缩短检测时间,提高检测效率。     

补肾中药对青春期大鼠下丘脑生长抑素基因及其蛋白表达的影响

背景：性早熟患儿在下丘脑-垂体-性腺轴提前启动的同时伴有骨骼生长加速，骨骺提前融合，临床上在发病时采用滋阴泻火中药可延缓骨龄提前融合，到性发育年龄时改用益肾填精中药，可促进性发育及促进骨骼生长加速，性早熟患者性发育及骨生长过程与正常青春期发育相同，只是时间的提前。中药改变骨生长的机制及对影响骨生长的生长抑素的作用尚不明确。目的：探讨补肾中药对下丘脑室周核生长抑素的调节作用。设计：完全随机分组设计，对照实验。单位：上海交通大学附属儿童医院内分泌科。材料：实验于2001-10／2002—04在上海复旦大学附属儿科医院儿科研究所宪成。采用清洁级纯种雌性SD大白鼠共24只。随机分为4组；对照Ⅰ组，滋阴泻火药组，对照Ⅱ组，滋阴泻火＋益肾填精药组，每组6只。方法：（1）对照Ⅰ组：灌胃生理盐水5mL／次，1次／d，共1个月；滋阴泻火药组：灌胃滋阴泻火中药合剂（生地黄、炙龟板、黄柏、知母等），5mL／次，1次／d，共1个月；对照Ⅱ组：灌胃生理盐水5mL/次，1次／d，共2个月；滋阴泻火＋益肾填精药组：先灌胃滋阴泻火中药5mL／次，1次／d，1个月，再喂饲益肾填精中药合剂（熟地黄、龟板胶，仙灵脾，鹿角胶等），5mL／次，1次／d，1个月。②采用漂浮法原位杂交、常规免疫组化技术。以医学图像分析软件，作各组大鼠下丘脑室周核生长抑索mRNA、生长抑素免疫反应阳性神经元计数并检测其阳性细胞面积吸光度（A值）反映其基因表达及蛋白表达的水平。单位面积阳性神经元数即每平方毫米面积中所含阳性神经元数量。③计量资料比较采用单因素方差分析处理，组间差异采用，检验。主要观察指标：滋阴泻火及益肾填精中药对下丘脑室周核生长抑索基因和蛋白表达水平的影响。结果：大鼠24只均进入结果分析。①下丘脑室周核生长抑素mRNA阳性神经元数、单位面积阳性神经元数和阳性细胞面积A值：滋阴泻火药组明显高于对照Ⅰ组（P〈0．05），滋阴泻火＋益肾填精药组明显低于滋阴泻火药组（P〈0．05）。②滋阴泻火药组下丘脑室周核生长抑素阳性神经元数、单位面积阳性神经元数、阳性细胞面积A值：滋阴泻火药组明显高于对照Ⅰ组（P〈0.05），滋阴泻火＋益肾填精药组明显低于滋阴泻火药组（P〈0.05）。结论：滋阴泻火与益肾填精中药可通过对下丘脑生长抑素基因表达与蛋白表达的调控，调节垂体生长激素的合成及释放。     

从分子水平研究补肾法对性早熟与衰老的调控规律

肾阴肾阳失衡是性早熟和衰老的病理基础,衰老是“生理性肾虚”,其阴阳失衡是以肾阳虚为主;性早熟的本质是阴虚火旺,其阴阳失调是以肾阴虚为主。由肾气盛衰主导的生长、发育、衰老过程中,主要涉及生长激素轴和性腺轴,性早熟惠儿可见这两轴的提前启动,表现为阴虚火旺;而衰老时是这两轴的率先衰退,表现为阳气虚损。分别采用温补肾阳方药以延缓衰老与滋阴泻火方药以抑制性早熟取得临床与实验的显著效果,通过以药测证,推测发病部位,证明性早熟或衰老,其病理损害是在下丘脑或更高中枢。