A组轮状病毒检测方法的研究及初步应用

用抗自制A组轮状病毒(RV)共同组抗原的McAb(2C7)建立了检测A组RV的2种新方法(RIHA,OS),并与RT和PAGE法进行了比较。结果显示,这2种方法实用性强,特异性好,方法简便,快速,便于推广。对54例疑为RV感染的婴儿粪样。用4种方法进行测定,阴、阳性总符合率为90.7％(49/54)。RIHA、OS与PAGE法符合率均为96.2％。经统计学处理P值>0.05,表明3种方法之间无显著性差异。RIHA、OS可作为A组RV快速诊断之用。但RV McAb(2C7)为识别A组RV共同组抗原的McAb,故不能区别A组RV的亚组及血清型。     

丙型肝炎病毒核心抗原C33的测定

目的探索丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）Ｃ３３抗原在正常人群及各类临床病人血清及肝组织中分布状况。方法用人工合成的ＨＣＶ核心抗原Ｃ３３肽（含３３个氨基酸）与小鼠血清白蛋白,经异型双功能交联剂ＳＰＤＰ连接后免疫Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠,制成２株Ｃ３３肽单克隆抗体（ＭｃＡｂ）,分别用作包被抗体和酶标抗体,建立检测血清中Ｃ３３肽抗原的酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）,共检测了１２３６例各类病人。并用免疫荧光及固相免疫酶法检测肝活检组织中的ＨＣＶＣ３３肽抗原。结果急性丙型肝炎（ＨＣ）患者,Ｃ３３肽的阳性检出率为１４．０％（６／４３）;仅抗－ＨＣＶＩｇＧ阳性患者Ｃ３３肽的阳性检出率为８．８％（３５／３９６）;慢性丙型肝炎患者为６．５％（４／６２）;白血病患者为４．３％（１／２３）;血透病人为３．３％（１９／５７６）;普通住院病人为１．５％（２／１３６）;正常供血员为１．４％（６／４３８）。肝活检免疫荧光、固相免疫酶检测显示ＨＣＶＣ３３肽在细胞核、细胞质、细胞膜上均有表达,在胞质中或集中于全胞质一侧或弥散分布于胞质中。结论ＨＣＶＣ３３抗原测定,可以作为ＨＣＶ感染的标志物之一。     

骨复生对激素性股骨头缺血性坏死家兔血浆一氧化氮的影响

为探讨激素性股骨头缺血坏死家兔血浆中一氧化氮 (NO)的变化及骨复生对其的影响 ,采用给日本大耳白兔大剂量肌肉注射醋酸波尼松龙 8W的方法 ,造成激素性股骨头缺血坏死的病理模型 ,随机分为骨复生组、马氏骨片组、模型对照组与空白对照组。结果显示模型组血浆 NO含量降低 ,与空白对照组相比差异非常显著 (P<0 .0 1)。治疗 4周后 ,骨复生组、马氏骨片组与模型组相比血浆 NO含量升高 (P<0 .0 5 )。两治疗组相比无明显差异 (P>0 .0 5 )。表明激素诱导的股骨头缺血坏死与血管功能障碍、血管内皮受损有关。骨复生具有升高血浆 NO浓度、保护血管内皮、改善微循环、改善血瘀状态、抑制血栓形成 ,而这些作用是其治疗激素性股骨头缺血坏死的可能机制之一     

骨复生胶囊对激素性股骨头缺血坏死家兔一氧化氮及纤溶活性的影响

目的 :研究骨复生胶囊对激素性股骨头缺血坏死家兔一氧化氮及纤溶活性的影响。方法 :4 0只日本大耳白兔 ,随机分为 4组 :骨复生组 ( A)、马氏骨片组 ( B)、模型组 ( C)、空白组 ( D)。用糖皮质激素造成家兔激素性股骨头缺血坏死模型。自第 9周起 ,A组用骨复生煎液按 4 5 g·kg-1·d-1灌胃 ;B组用马氏骨片浸膏按0 .1 7g·kg-1·d-1灌胃 ;C组与 D组用等量生理盐水灌胃。于造模第 4、8周和给药第 4周测各组家兔血浆中一氧化氮、组织型纤溶酶原活化物、纤溶酶原激活物抑制物的含量。结果 :C组与 D组相比血浆中一氧化氮、组织型纤溶酶原活化物含量下降 ( P<0 .0 1 ) ,纤溶酶原激活物抑制物的含量升高 ( P<0 .0 1 )。两个治疗组与模型组相比血浆中一氧化氮、组织型纤溶酶原活化物含量升高 ( P<0 .0 5 ) ,纤溶酶原激活物抑制物含量下降 ( P<0 .0 5 )。两个治疗组相比无显著性差异 ( P>0 .0 5 )。结论 :骨复生对股骨头缺血坏死的治疗作用可能与其升高血浆一氧化氮浓度、保护血管内皮及提高纤溶活性有关     

用RIHA法对小儿腹泻病病原检测结果分析

本文对本院1987年2月至1990年11月收治小儿粪样中病原因子分布状态进行调查。586例粪样中共检出A组轮状病毒(RV)245例,阳性检出率为41.8%;鼠伤寒杆菌阳性18例,阳性率为3.13%;痢疾杆菌仅4例阳性。这一结果提示,在我国南京地区A组RV是小儿腹泻的主要病原。本文还简要介绍A组RV抗原的反向间接血凝试验(RIHA)测定法,该法敏感、特异、操作简便,便于推广应用。     

手法加中药治疗膝关节退行性骨关节病156例临床体会

膝关节退行性骨关节病在骨科临床属常见病、多发病。西医治疗虽见效快，但副作用大且易复杂：中医治疗虽病情控制稳定，但由于疗程长，许多患者往往不能坚持治疗，致使病程迁延日久。近年来，我们采用推拿按摩，功能锻炼加中药内服外敷治疗，疗效确切，具有标本兼治、简便验廉之特点，患者乐于接受，故值得进一步完善，提高和推广。     

应用多重聚合酶链反应法检测并鉴别结核分支杆菌与非结核分支杆菌DNA

OBJECTIVE: To improve the specificity and sensitivity of polymerase chain reaction (PCR) technique for detecting and identification of DNA of M. tuberculosis and M. nontuberculosis. METHOD: Three pairs of oligonucleotide primer were used in triplex-PCR. A 383 bp DNA fragment encoding part of the 65,000 mycobacterial surface antigen, a 123 bp fragment corresponding to a specific M. tuberculosis complex sequence which was the insertion sequence 6110 (IS 6110) and a 268 bp fragment for human beta-globin were amplified by triplex-PCR respectively. RESULT: The sensitivity of the triplex-PCR-electrophoresis for the DNA of mycobacterium was 0.6 pg. The specific bands of 383 bp and 123 bp among the amplified DNA from M. hominis, M. bovis, BCG and M. simiae were present in the agarose gel. By contrast, only a band of 383 bp was found among the M. nontuberculosis which contained M. avium, M. chelonae, M. scrofulaceum, M. xenopi, M. kansasii, M. intracellulare and M. smegmatis. Compared with the standard strains, there was an additional 268 bp band in simulated clinical samples infected by Mycobacterium. The above 3 specific bands were found neither in other 15 bacterial species tested nor in Mycoplasma pneumoniae. 182 clinical samples were examined by culture, smear and triplex-PCR. 72 nontuberculous clinical samples were all negative. In 110 tuberculosis clinical samples, the positive rates were 2.7%, 13.6% and 32.7%, respectively. CONCLUSION: The triplex-PCR possesses a high specificity and sensitivity. This method could detect and identify the DNA of M. tuberculosis and M. nontuberculosis except M. simiae. It is a valuable tool for early diagnosis and differentiation for infection of M. tuberculosis and M. nontuberculosis.     

分泌抗α_2-巨球蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞系建立

α_2-巨球蛋白(α_2-Macroglobulin,α_2-M)是人血清中α球蛋白的一种重要成分。含量约占血清总蛋白量的3％,分子量82万左右,α_2-M有抑制多种蛋白分解酶和活化生长激素与胰岛素的作用。参予免疫调控,具有抗放射性损伤的作用。最近我们用细胞融合技术建立了分泌抗α_2-M单克隆抗体的杂交瘤细胞系,本文就这一细胞系的建立情况及初步鉴定结果报告如下:     

单克隆抗体的简易酶标记技术

自从kohler和Milstein 1975年建立杂交瘤技术以来,我国已建立了针对不同抗原的单克隆抗体杂交瘤细胞系百余种。由这些细胞系分泌的单克隆抗体(McAb)是均一的蛋白质。目前McAb在临床上主要用于疾病诊断和了解人类疾病的发病机理。近年来许多学者进行了这方面的探讨。实验表明,纯化后的McAb不易标记酶和荧光素,往往采用标记第二抗体进行间接法检测,因而使实验研究和临床应用受到一定的限制。最近,我们直接用腹水型单克隆     

产生纤维连结蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及初步鉴定(摘要)

纤维连结蛋白(Fibronectin,FN)是存在于多种细胞表面和细胞外液中的高分子糖蛋白,与细胞的许多生物活性有关。近年