靶向Survivin的小分子干扰RNA对骨肉瘤细胞的体内外抑制作用

目的 观察靶向Survivin基因的小分子干扰RNA(siRNA)表达载体对人骨肉瘤细胞MG-63的体内外抑制作用.方法 体外构建Survivin siRNA表达载体pSilence2.1-neo-Survivin,转染骨肉瘤细胞株MG-63、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组织化学(SP)法检测转染前后Survivin mRNA及蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞周期分布,吖啶橙荧光染色法观察细胞凋亡,建立裸鼠移植瘤模型,记录瘤体形成时间及肿瘤生长.结果 转染后MG-63细胞Survivin基因mRNA水平和蛋白表达显著下降,转染后mRAN表达抑制率为85.08%,增殖指数为空白组的28.20%;细胞周期分析显示:shRNA组G0/G1期细胞明显增多,而G2/M期、S期细胞数目减少;吖啶橙染色显示转染组细胞出现明显核碎裂等凋亡改变,转染组凋亡率为24.54%;稳定转染组细胞裸鼠体内致瘤能力降低,转染组成瘤时间为(13.2±2.0)d,空白组为(6.5±1.6)d,两者比较差异有统计学意义(P＜0.01).4周时同空白组相比转染组瘤体体积小62.89%(P＜0.01),重量轻59.07%(P＜0.01).结论 靶向Survivin基因的siRNA表达载体可以显著抑制骨肉瘤细胞MG-63增殖,促进细胞凋亡;明显抑制人骨肉瘤细胞的致瘤活性及裸鼠移植瘤的生长.     

不同采收期枇杷叶的质量评价及其药材稳定性研究

目的对不同采收期的枇杷叶进行质量评价,并考察其稳定性。方法对不同采收季节、树叶和落叶、野生和栽培的枇杷叶进行质量评价,考察高温、高湿和强光对其质量的影响,采用长期试验和加速试验考察其稳定性。结果不同采收季节、野生和栽培的枇杷叶中齐墩果酸和熊果酸的量接近,落叶比树叶略高;高温、高湿和强光对枇杷叶中齐墩果酸和熊果酸的量影响不大;枇杷叶在长期6月和加速6月内基本稳定。结论本研究为制定枇杷叶对照药材的有效期提供依据。     

高等数学教学方法浅析

随着电脑在高等数学中的应用,高等数学作为一种数学工具的功能正在逐步缩减,但作为一种思维方法的功能却愈显风采。一个多元线性方程组如何去解？只要会正确使用数学软件,我们可以交给电脑去完成。但一个实际问题如何通过数学建模转化为一个数学问题,除了必须具备许多综合的知识,还需要具备一定的分析推理能力。针对高等数学的学习特点,本文给出几点学习高等数学的方法和建议。     

近地层基本气象要素的统计建模

基于戈壁下垫面上铁塔观测资料和地面观测资料,采用数理统计和概率论方法,对近地层基本气象要素风速、温度、湿度和气压进行统计建模,分析了不同季节近地层基本气象要素的日变化和垂直结构,得出了近地层基本气象要素典型的时空分布特征,初步建立了戈壁下垫面近地层基本气象要素的统计模型,为大气环境的仿真工程应用奠定了技术基础。     

骨髓内残存白血病细胞检测方法探讨

将不同的白血病细胞株与正常骨髓细胞按比例混合，体外模拟人缓解期白血病骨髓。用染色体核型分析、流式细胞仪－ＤＮＡ（ＦＣＭ－ＤＮＡ）及ＦＣＭ－免疫标志等方法测定，证明该三项实验的灵敏度达０．５％。初步临床验证上述方法亦有一定的应用价值     

北京地区亚健康人群中医基本证候特征的流行病学研究

目的研究亚健康人群的临床表现及其中医基本证候分布特征。方法以体现中医特色的亚健康调查问卷为工具,通过对北京地区亚健康人群的流行病学调查,结合中医临床专家的判断,并应用聚类及因子分析等数理统计方法,探讨亚健康状态主要临床表现、主要证候要素及其基本证候特征。结果对1828份调查数据分析表明,北京地区亚健康人群以疲劳、失眠、情绪失调、疼痛等症状群为主要临床表现;以虚、湿、热、郁、瘀、气滞、津亏、痰为主要证候要素;脏腑功能失调多见于心、肝、脾、肾、胆、胃等;以心脾两虚、肝郁脾虚、脾虚湿困、肝肾阴虚、气阴两虚、气虚血瘀、湿热蕴结、肝郁化失、脾肾两虚、痰气互结等10类基本证候多见。结论亚健康人群的临床表现多呈现某一症状为主,其他症状伴随出现的症状群,其证候要素和基本证候分布以心、肝、脾等脏腑功能虚损为主,有一定的规律性。     

"能力本位"培养21世纪中医高素质创新人才

能力,是人的综合素质在行为上外在的表现.人的素质是能力的内在基础,是人的内在本质力量,而人的能力则是人的内在素质的外在表现、实现和确认.     

流动注射微分光度法测定格列齐特片含量

目的建立流动注射微分光度法测定格列齐特片含量的方法。方法基于磷酸缓冲液介质中(pH 7.4),格列齐特在226 nm波长处有最大吸收的特点,利用自行研制一套流动比色装置,安装到检测器中样品光束和参比光束位置,建立了流动注射微分光度法测定。结果格列齐特含量在1~22μg/mL范围内符合比耳定律,方法的灵敏度较普通光度法提高1.7倍,进样频率为180次/h,精密度为RSD为0.97%(n=14)。结论应用于样品中格列齐特含量分析,结果满意。     

论中医药临床数据的科学价值

"源于临床,服务临床"是中医药学术发展和技术进步的基本模式,临床数据是传播中医药科学技术知识的重要载体,也是国家宝贵的知识财富.本文从临床数据的学术价值、国内外研究进展、社会需要三方面讨论了中医药临床数据的科学价值.     

鼠胚成骨细胞的原代培养与鉴定

目的 探讨经济、高效的原代成骨细胞培养方法,为进一步的实验研究奠定基础。方法孕龄19天的昆明孕鼠（KM）,无菌条件下剖腹取出胎鼠,然后取胎鼠的颅盖骨,剔净、漂洗、剪碎。甩0．25％胰蛋白酶消化10分钟,终止消化后,将碎骨块接种于培养瓶中培养,通过相差显微镜、透射电镜观察,并用碱性磷酸酶染色、骨钙素免疫组化染色和钙结节茜素红染色等方法对所获得的细胞进行鉴定。结果所培养的细胞具有典型的成骨细胞形态特征,碱性磷酸酶染色、骨钙素染色和钙结节染色均呈阳性。结论改良的组织块培养法可在较短时间内获得大量成骨细胞,所培养的细胞具有典型的成骨细胞形态和功能。