四君子汤多糖分离纯化对IEC-6细胞迁移药效活性的影响

目的：本研究对四君子汤多糖进行提取和分离纯化,观察不同多糖样品对小肠上皮细胞（IEC?6）迁移的影响,从而进行多糖纯化过程的药效活性追踪,为探讨四君子汤多糖药效物质基础提供参考。方法：①四君子汤水提醇沉得到四君子汤多糖1;经Sevag法去蛋白得到四君子汤多糖2;经DEAE?52纤维素柱层析并超纯水洗脱得到四君子汤多糖3a;经Sephadex G?100葡聚糖凝胶柱层析并超纯水洗脱得到四君子汤多糖4a和多糖4b;并以苯酚?硫酸法检测各多糖样品糖含量（以葡萄糖计）。②凝胶渗透色谱法（GPC）检测四君子汤多糖3a、多糖4a和多糖4b纯度。③在IEC?6细胞迁移模型上,观察四君子汤多糖不同样品促进细胞迁移的药效活性。结果：4种多糖样品（四君子汤多糖1、2、3a、4b）糖含量分别为71.35%、75.45%、81.00% 和98.50%,其促进细胞迁移的最低有效剂量分别为200、100、50、30mg·L^?1;表明纯化步骤最多的多糖4b糖含量最高、药效最优,且GPC 法测得其为均一性多糖组分。结论：四君子汤多糖经不同纯化步骤后,糖含量和纯度提高,药效活性随之增强,研究结果为探讨四君子汤促进细胞迁移的药效物质基础研究提供参考。     

白术甲醇提取物对小肠上皮细胞增殖、迁移及磷脂酶C-γ1表达的影响

目的观察白术甲醇提取物(以下简称白术提取物)对小肠上皮细胞(IEC-6)增殖、迁移及磷脂酶C-γ1(PLC-γ1)表达的影响,旨在探讨益气健脾中药白术促进胃肠黏膜损伤修复的作用机制。方法细胞分为空白组,精脒(5μmol/L)组,白术提取物(50、100、200 mg/L)组;负荷实验设α-二氟甲基鸟氨酸[(α-difluoromethylornithine,DFMO)多胺合成抑制剂]组,精脒+DFMO组,白术提取物(50、100、200 mg/L)+DFMO组。细胞贴壁培养24 h,给予受试药培养相应时间后,采用实时细胞分析仪(Real-time Cell Analyzer,RTCA)观察白术提取物对IEC-6细胞增殖的影响;划痕法检测白术提取物对IEC-6细胞迁移数目的影响;采用荧光定量PCR法和Western blot法检测PLC-γ1 m RNA及其蛋白表达。结果与空白组比较,白术提取物对细胞增殖无明显影响(P0.05),精脒和白术提取物(100、200 mg/L)对细胞迁移均有促进作用(P0.01),并能增加细胞迁移过程PLC-γ1 m RNA和蛋白表达(P0.01)。与DFMO组比较,精脒、白术提取物(100、200mg/L)能逆转DFMO所致的细胞迁移抑制及PLC-γ1 m RNA及其蛋白表达的抑制作用(均P0.01)。结论白术提取物可通过促进多胺介导的上皮细胞迁移发挥修复胃肠黏膜损伤作用,细胞增殖不是其主要药效作用。     

黄芪多糖调控多胺介导的Ca~(2+)-RhoA通路促进小肠上皮细胞迁移研究

目的考察黄芪多糖对小肠上皮细胞(IEC-6)迁移及迁移过程细胞内多胺水平、细胞质游离钙离子([Ca2+]cyto)的量、细胞骨架蛋白Rho A表达的影响,探讨黄芪修复胃肠黏膜损伤的疗效机制。方法黄芪药材经水提醇沉、Sevage法去蛋白后得到黄芪粗多糖,运用DEAE纤维素柱分离得到黄芪多糖I、II、III、IV,黄芪多糖I以Sephadex LH-20凝胶柱色谱得到黄芪多糖V。Tips划痕法建立IEC-6细胞损伤迁移模型,柱前衍生高效液相色谱法测定多胺的量,流式细胞仪检测[Ca2+]cyto水平,Western blotting法检测Rho A蛋白表达。考察黄芪多糖对正常IEC-6细胞[未加α-二氟甲基鸟氨酸(DFMO)]和多胺耗竭IEC-6细胞(加入DFMO)迁移、多胺水平、[Ca2+]cyto的量及Rho A蛋白表达的影响。结果黄芪粗多糖、黄芪多糖I、黄芪多糖V(50、100、200 mg/L)均能促进IEC-6细胞迁移(P0.01),并且可逆转多胺合成抑制剂DFMO所致的细胞迁移抑制效果(P0.01);在正常(未加DFMO)或多胺耗竭情况(加DFMO),黄芪多糖V均可提高迁移过程细胞内多胺的量(P0.01);黄芪多糖V可提高细胞迁移过程[Ca2+]cyto水平(P0.01),并且可逆转DFMO所致的[Ca2+]cyto水平下降(P0.01);黄芪多糖V(100、200 mg/L)可明显提高Rho A蛋白表达,同时可逆转DFMO所导致的Rho A蛋白表达抑制作用。结论黄芪多糖可加速胃肠黏膜损伤早期修复过程,其机制可能与增加黏膜上皮细胞多胺的量,提升[Ca2+]cyto,从而提高Rho A蛋白表达,进而促进胃肠黏膜上皮细胞迁移有关。     

少突胶质祖细胞的体外分离、培养和定向分化

目的探索体外培养获得高纯度少突胶质祖细胞的方法,观察少突胶质祖细胞的形态学特点以及增殖和分化规律。方法选取新生1～2 d SD大鼠,应用选择性分离程序,根据细胞的不同贴壁特性,通过2次细胞选择性贴壁培养和2次不同频率的振荡,分离纯化少突胶质祖细胞。应用物理振荡方法进行细胞传代,进一步纯化细胞。传代细胞分别用无血清和有血清的培养基培养,应用免疫荧光法进行细胞鉴定。结果纯化后的少突胶质祖细胞达95%。在无血清的情况下,少突胶质祖细胞定向分化为少突胶质细胞;在有血清的情况下,定向分化为2-型星形胶质细胞,并且细胞骨形态形成性蛋白质4(BMP4)表达增加。结论应用选择性分离程序,通过振荡分离的方法可以获得高纯度的少突胶质祖细胞。少突胶质祖细胞具有增殖和双向分化的潜能。BMP4参与了祖细胞定向分化的调控。     

浅谈军人的心理卫生状况

军人担负着维护国家安全、祖国领土完整和社会稳定的任务,心理应激出现的强度、频率以及作用时间远较普通人群高。调查显示,军人心理障碍发病呈上升趋势,已经成为部队战斗力减员的重要因素之一。本文对近年来军队心理卫生调查情况进行了分析、总结,现综述如下。     

脓毒症相关急性肾损伤的生物学标志物研究进展

脓毒症相关急性肾损伤(sepsis-associated acute kidney injury, S-AKI)是急诊科和重症监护病房中脓毒症患者最常见的并发症之一,其病死率极高。S-AKI的早期诊断和可靠监测对预防脓毒症患者进展为多器官功能衰竭甚至死亡至关重要。目前虽然对S-AKI的发病机制、诊断和治疗进行了广泛研究,但仍未找到理想的指标来早期诊断和监测该疾病,这是当前面临的具有重大挑战性的问题。本文对近年来早期预测S-AKI的标志物进行总结,分析新型生物学标志物在S-AKI等危重症患者救治过程中的作用,旨在为临床S-AKI患者提供帮助。     

SARS引起部队战士与军校学生心理应激的对照研究

目的了解SARS事件引起武警部队战士与学员心理应激的中介因素与心理健康的关系。方法采用中国科学院心理研究所编制的“全国民众非典调查问卷”(新版 ) ,对SARS高发疫区的 80 0名武警战士和学员进行测试。结果大多数人对SARS事件的看法比较乐观。战士较学员认知更为积极 ,心理恐慌和无助感也明显低于学员 (P <0 .0 0 1)。战士与学员多使用积极的应对方式来应对应激。学员采用某些回避性应对和积极应对与战士有显著差异 ,如注意转移、自我保护性应对等 (P <0 .0 1)。战士与学员获得主观和客观社会支持上大部分没有显著差异 ,只是个别条目有所不同。SARS对士兵与学员的心理影响不大 ,学员的心理适应要好于士兵 (P <0 .0 5 )。相关因素分析显示认知、应对方式及社会支持与心理状态相关。结论认知、应对方式及社会支持影响人们对应激源的心理反应。     

胀痛消胶囊对胃肠运动的药理研究

“胀痛消”由左金丸加味组成，临床用于胃肠道疾病取得了较好疗效。本文以胃排空、小肠推进及离体肠管解痉试验观察胀痛消胶囊的胃肠道药理作用。动物雌雄兼用，随机分组，分别观察该药对正常及胃复安、阿托品负荷小鼠胃排空的影响和对正常及新斯的明、肾上腺素负荷小鼠小肠推进的影响，同时观察该药对家兔离体十二指肠自发活动的作用及拮抗氯化乙酰胆碱、氯化钡、组织胺所致离体回肠痉挛的作用。研究结果表明该药明显抑制正常小鼠的胃排空及胃复安所致胃排空加快，对阿托品所致胃排空减慢有协同作用；明显抑制正常小鼠小肠推进，对新斯的明所致小鼠小肠推进加快有明显抑制作用，但对肾上腺素所致小鼠小肠推进减慢没有明显影响；抑制家兔离体十二指肠自发活动以及拮抗氯化乙酰胆碱、氯化钡、组织胺所致家兔回肠痉挛性收缩。以上研究结果提示胀痛消具有调整胃肠运动亢进及缓解胃肠平滑肌痉挛的药理作用。     

医学生应付方式与心理健康水平的关系

有研究发现，良好、成熟的应付方式有助于缓解精神紧张，帮助个体最终成功地解决问题，从而起到平衡心理、保护精神健康的作用。本研究试图探讨医学生应付方式与心理健康水平的关系，为进一步干预研究提供依据。